Questão 6
Os fragmentos de DNA podem ser inseridos em vetores de clonagem, pequenos fragmentos de DNA que se replicam dentro de uma célula. Um vetor de clonagem deve ter uma origem de replicação, um ou mais sítios de restrição únicos e marcadores selecionáveis.
As etapas abaixo estão relacionadas com a clonagem de um gene de interesse. Analise e ordene cada uma das etapas de acordo com a sequência para a obtenção de um vetor de clonagem
1 – Tratamento do cDNA e do plasmídeo com a mesma enzima de restrição.
2 – Isolar o mRNA de determinada célula de interesse.
3 – Inserção do plasmídeo na bactéria.
4 – Com a ajuda da DNA ligase, inserir o fragmento de DNA no vetor de clonagem.
5 – Usar a enzima transcriptase reversa para fazer um cDNA que seja complementar ao mRNA.
A ordem correta das etapas é:
A) 2 – 5 – 3 – 4 – 1
B) 1 – 2 – 5 – 3 – 4
C) 3 – 4 – 1 – 2 – 5
D) 4 – 1 – 2 – 3 – 5
E) 2 – 5 – 1 – 4 – 3
