Aula Prática Introdução à Biologia Celular e do Desenvolvimento

Roteiro de Aula Prática Introdução à Biologia Celular e do Desenvolvimento Disciplina Introdução à Biologia Celular e do Desenvolvimento ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 1 Unidade 3 Aula White LabelSeção KLS 31 SOFTWARE Software Acesso online Pago Não Pago Infraestrutura O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR ELE NÃO DEVE SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO POIS ALGUNS PLUGINS SÃO BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO A VELOCIDADE DE ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA 1 Caso utilize o Windows 10 dê preferência ao navegador Google Chrome 2 Caso utilize o Windows 7 dê preferência ao navegador Mozilla Firefox 3 Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador 4 Verifique se o seu navegador está atualizado 5 Realize teste de velocidade da internet Descrição do software Laboratório Algetec ATIVIDADE PRÁTICA 1 Atividade proposta Extração e purificação de DNA e RNA Objetivos Analisar as funções e as finalidades de cada reagente eou material descritos no protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA Definir cada etapa descrita no protocolo de extração e purificação de DNA ou RNA Procedimentos para a realização da atividade Materiais necessários Jaleco Luvas Máscara Óculos Centrífuga de Eppendorf Vórtex Incubadora Tubo de coleta com amostra de sangue Tubo Eppendorf Tubo spin Hipoclorito de sódio Ponteira para micropipeta Micropipeta Nanodrop espectrofotômetro Água MiliQ Notebook Álcool 96 Kit de extração DNA Tampão de lise S Kit de extração DNA Tampão de lavagem SI Kit de extração DNA Tampão de lavagem SII Kit de extração DNA Tampão de eluição SI Kit de extração DNA Proteinase K tipo L Kit de extração DNA Tampão de proteinase PROCEDIMENTO 1 Segurança do experimento Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no Armário de EPIs Visualize a pia clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Pia localizada dentro do painel de visualização no canto superior esquerdo da tela Se preferir também pode ser utilizado o atalho do teclado Alt1 Abra a torneira clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a pia Abra o armário de EPI clicando com o botão esquerdo do mouse sobre as portas Selecione os EPIs necessários para a realização do ensaio clicando com o botão esquerdo do mouse sobre eles Nesse experimento é obrigatório o uso de jaleco luvas máscaras e óculos Feche as portas do armário de EPIs clicando com o botão esquerdo do mouse sobre elas 2 Etapa da Lise Nesta etapa você deverá pipetar 25 μl da Proteinase K no tubo Eppendorf Em seguida pipetar 200 μl da amostra de sangue no mesmo tubo e por último pipetar 200 μl do tampão lise S no tubo Tampe o Eppendorf e homogeneíze no Vórtex por 20 segundos Após esse tempo incube o Eppendorf por 15 min Para isto siga as etapas ilustradas a seguir Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Bancada ou através do atalho do teclado Alt3 Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo digite o volume e em seguida clique em OK Posicione a pipeta no tubo de Proteinase K clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Proteinase K Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Eppendorf Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo em seguida clique em OK Posicione a pipeta no tubo com a amostra de sangue clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Amostra de sangue Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Eppendorf Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Posicione a pipeta no tampão de lise S clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tampão de lise S Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Eppendorf Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Tampe o tubo Eppendorf clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Homogeneíze o eppendoff no vortex clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Pular tempo Retire o tubo do vortex clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Coloque o tubo na incubadora clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Feche a tampa da incubadora clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela Ligue a incubadora clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de ligar Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Pular tempo Abra a tampa da incubadora clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela Retire o tubo da incubadora cliquando com o botão direito do mouse sobre a mesma 3 Etapa da Ligação Nesta etapa você deverá pipetar 210 μl de álcool 96 no Eppendorf e homogeneízar de novo no Vórtex Em seguida pipete 640 μl do Eppendorf para o tubo spin e centrifugue a 11000 rpm por 1 minuto Para isto siga as etapas ilustradas Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo em seguida clique em OK Posicione a pipeta no recipiente de álcool 96 pura clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Álcool 96 Posicione a pipeta no tubo Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Eppendorf Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Tampe o tubo Eppendorf clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Homogeneíze o eppendoff no vortex clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Avançar Retire o tubo do vortex clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo em seguida clique em OK Posicione a pipeta no Eppendorf clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Eppendorf Posicione a pipeta no tubo spin clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tubo spin Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Coloque o tubo spin dentro do tubo de coleta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Coloque na centrífuga o conjunto de tubos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Ajuste a velocidade de rotação clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a seta para cima Ajuste o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a seta para cima Feche a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Ligue a centrífuga clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de ligar Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Avançar 4 Etapa da Lavagem Nesta etapa você irá retirar o Eppendorf da centrífuga descartar o tubo de coleta e colocar o tubo spin em um novo tubo de coleta Em seguida pipete 500 μl do tampão de lavagem SI no tubo spin e centrifugue novamente Repita o mesmo processo de troca de tubo de coleta porém a lavagem irá utilizar 600 μl o tampão de lavagem SII e centrifugue novamente Por fim repita o mesmo processo da troca do tubo de coleta e centrifugue novamente Siga as ilustrações abaixo Abra a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Retire o conjunto de tubos clicando com o botão direito do mouse sobre a centrífuga Retire o tubo spin do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Retirar tubo spin Descarte o tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Descartar Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo em seguida clique em OK Posicione a pipeta no tampão lavagem SI clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tampão lavagem SI Posicione a pipeta no tubo spin clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tubo spin Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Coloque o tubo spin dentro do tubo de coleta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Coloque na centrífuga o conjunto de tubos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Feche a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Na sequência repita os passos de centrífuga descritos acima Ao finalizar a centrifugação retire o tubo spin do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Retirar tubo spin e descarte o tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Descartar Lembrese estas orientações já estão descritas no roteiro Em seguida ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Posicione a pipeta no tampão lavagem SII clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tampão lavagem SII Posicione a pipeta no tubo spin clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tubo spin Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Coloque o tubo spin dentro do tubo de coleta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Coloque na centrífuga o conjunto de tubos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Feche a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Na sequência repita os passos de centrífuga descritos acima Ao finalizar a centrifugação retire o tubo spin do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Retirar tubo spin e descarte o tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Descartar Lembrese estas orientações já estão descritas no roteiro Coloque o tubo spin dentro do tubo de coleta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Coloque na centrífuga o conjunto de tubos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Feche a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Na sequência repita os passos de centrífuga descritos acima 5 Etapa da Eluição Nesta etapa retire o Eppendorf da centrífuga descarte o tubo de coleta e coloque o tubo spin em um novo tubo de coleta Em seguida pipete 200 μl do tampão de eluição S no tubo spin espere 1 minuto e centrifugue a amostra Observe as orientações e lembrese que estas etapas já foram ilustradas acima Ao finalizar a centrifugação retire o tubo spin do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Retirar tubo spin e descarte o tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Descartar Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume para 200 μl conforme já demonstrado e posicione a pipeta no tampão eluição S clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tampão eluição S Posicione a pipeta no tubo spin clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tubo spin Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Avançar Coloque o tubo spin dentro do tubo de coleta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Coloque na centrífuga o conjunto de tubos clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Feche a tampa clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de abrir e fechar a tampa Ligue a centrífuga clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de ligar Pule o tempo clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box Avançar 6 Realizando a mensuração da amostra Nesta etapa retire o Eppendorf da centrífuga e retire o tubo spin de dentro do tubo de coleta Em seguida abra o espectrômetro e limpeo depois pipete 10 μl de água miliq no mesmo e feche o espectrômetro Ligue o notebook clique na opção Nucleic acid e depois na opção blank Por último limpe o novamente o espectrômetro e pipete 10 μl da amostra feche o espectrômetro e selecione a opção Measure Retire o conjunto de tubos clicando com o botão direito do mouse sobre a centrífuga Retire o tubo spin do tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre o tubo de coleta e selecionado o box Retirar tubo spin Visualize o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Espectrofotômetro ou através do atalho do teclado Alt7 Abra o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre o mesmo Limpe o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o mesmo Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Bancada ou através do atalho do teclado Alt3 Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Mude o volume da pipeta clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o box no canto inferior esquerdo em seguida clique em OK Posicione a pipeta na água ultra pura clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Água Ultra Pura Posicione a pipeta no espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Espectrofotômetro Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Feche o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre ele Visualize o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Notebook ou através do atalho do teclado Alt8 Ligue o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse sobre o botão de ligar Selecione Nucleic Acid no notebook clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tela Selecione Blank no notebook clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tela Visualize o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Espectrofotômetro ou através do atalho do teclado Alt7 Abra o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre ele Limpe o espectrofotômetro clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ele Visualize a bancada clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Bancada ou através do atalho do teclado Alt3 Ajuste o volume da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Reajustar volume Posicione a pipeta no tubo de coleta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Tubo de Coleta Posicione a pipeta no espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Colocar em Espectrofotômetro Troque a ponteira da pipeta clicando com o botão direito do mouse sobre a mesma e em seguida selecione Trocar ponteira Feche o espectrofotômetro clicando com o botão direito do mouse sobre ele Visualize o notebook clicando com o botão esquerdo do mouse na câmera com o nome Notebook ou através do atalho do teclado Alt8 Selecione Measure no notebook clicando com o botão esquerdo do mouse sobre a tela Checklist Observar e analisar as etapas realizadas nos procedimentos focando na compreensão da técnica e reagentes Resultado Aluno você deverá entregar Um arquivo contendo as respostas para os questionamentos a seguir 1 No que consiste a etapa de eluição da purificação 2 Qual a diferença entre os tampões de lavagem SI e SII 3 Na etapa de ligação porque se utiliza o álcool 96 Referências WATSON J D Biologia molecular do gene 7 ed Porto Alegre Artmed 2015 MENCK C F M Genética molecular básica dos genes aos genomas 1 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2017 GRIFFITHS A J F Introdução à genética 12 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2022 ROTEIRO DE AULA PRÁTICA 2 Unidade 4 Aula White LabelSeção KLS 41 SOFTWARE Software Acesso online Pago Não Pago Infraestrutura O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR ELE NÃO DEVE SER ACESSADO POR CELULAR OU TABLET O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO POIS ALGUNS PLUGINS SÃO BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO A VELOCIDADE DE ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA 1 Caso utilize o Windows 10 dê preferência ao navegador Google Chrome 2 Caso utilize o Windows 7 dê preferência ao navegador Mozilla Firefox 3 Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador 4 Verifique se o seu navegador está atualizado 5 Realize teste de velocidade da internet Descrição do software Laboratório Algetec ATIVIDADE PRÁTICA 2 Atividade proposta Analisar as lâminas do aparelho reprodutor feminino e masculino bem como as características de cada órgão como pênis ductos genitais glândulas acessórias testículo epidídimo e ovário Objetivos Observar as estruturas dos aparelhos reprodutores feminino e masculino Analisar as características de cada órgão como pênis ductos genitais glândulas acessórias testículo epidídimo e ovário Identificar os tecidos presentes nestas estruturas Procedimentos para a realização da atividade Materiais necessários Microscópio óptico Kit de lâminas Laminário Óleo de imersão Solução de limpeza 50 éter sulfúrico e 50 clorofórmio C2H6O álcool etílico Cotonete Algodão Papel macio PROCEDIMENTO 1 Segurança do experimento Higienize as mãos na pia e coloque os equipamentos de proteção individual localizados no Armário de EPIs jaleco e luvas 2 Escolhendo a lâmina Abra o laminário selecione uma lâmina e mova para o microscópio No laminário contém as seguintes lâminas testículo epidídimo próstata vesícula seminal pênis e ovário Selecione a lâmina clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina 3 Visualizando a lâmina no microscópio Ligue o microscópio Visualize a lâmina na objetiva de 4x 10x e 40x Atentese à instrução que para movimentação do revólver ou para efetuar as configurações de posicionamento dos parafusos condensador ou diafragma devese clicar com o botão esquerdo do mouse sobre a área desejada e movimentar o cursor do mouse para direita ou esquerda Coloque uma gota do óleo de imersão sobre a lâmina no microscópio e mude para a objetiva de 100x Retorne a lâmina para o laminário Selecione as demais lâminas para observação Visualize a lâmina na objetiva de 4 10 e 40x pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o revólver e movimentando o cursor à direita ou à esquerda Para visualização na objetiva de 100x coloque o óleo de imersão clicando com o botão esquerdo do mouse no contagotas Visualize a lâmina na objetiva de 100x pressionando com o botão esquerdo do mouse sobre o revólver e movimentando o cursor à direita ou à esquerda Retire a lâmina do microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse na lâmina de vidro Repita as etapas para as demais lâminas 4 Ao finalizar feche o laminário e desligue o microscópio Limpe o microscópio clicando com o botão esquerdo do mouse no cotonete algodão e lenço e papel filtro Checklist Observar as lâminas específicas para o experimento Observar e analisar as principais características estruturais dos tecidos observados Observar e esquematizar as lâminas estudada Resultados da aula prática Aluno você deverá entregar Um arquivo contendo o desenho esquemático das estruturas observadas bem como a resposta para os questionamentos a seguir 1 Quais os órgãos envolvidos com o sistema reprodutor feminino e masculino 2 Qual a importância das células de Sertoli e Leydig 3 Quais os estágios de maturação dos folículos ovarianos Referências JUNQUEIRA L C U Biologia celular e molecular 9ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2012 GARTNER L P Atlas colorido de histologia 7 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2018 PAWLINA W Ross histologia texto e atlas correlações com biologia celular e molecular 8 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2021 SADLER T W Langman embriologia médica 14 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan 2021 BIOLOGIA MOLECULAR SISTEMA REPRODUTOR Docente Discente Ilustrações das estruturas observadas Espermátides Espermatocitos Espermatogônias Celulas de Sertoli Celulas de Leydig Ducto Ejaculatorio Próstata Vesícula seminal Tubo secretor sinuoso Epidídimo Ducto eferente Testículo Ovário Cortical Medular Ovócito Zona pelúcida Corona radiata Teco externa Cumulus oophorus Teca interna Antro Células foliculares Questionamentos 1 Quais os órgãos envolvidos com os sistemas reprodutor masculino e feminino R O aparelho reprodutor feminino engloba útero tuba uterina ovários cérvix vagina vulva clitóris O aparelho reprodutor masculino tem como componentes testículo epidídimo glândulas anexas próstata vesiculares bulbouretrais ductos deferentes pênis 2 Qual a importância das células de Sertoli e Leydig R As células de Sertoli são encontradas nos túbulos seminíferos e são de extrema importância pois garantem a sustentação e nutrição dos espermatozóides em desenvolvimento fornecem um ambiente adequado para ocorrência da espermatogênese produzem proteínas para o desenvolvimento e processo de diferenciação dos espermatozoides e proporcionam a barreira hematotesticular auxiliando assim na proteção das células germinativas do sistema imune do organismo As células de Leydig são responsáveis por produzir e secretar a testosterona hormônio responsável por desencadear e manter características sexuais masculinas e regula a produção de espermatozoides 3 Quais os estágios de maturação dos folículos ovarianos R Os estágios de maturação dos folículos ovarianos são primordial primário secundário terciário e maduro O folículo primordial é caracterizado por oócito imaturo cercado por uma camada de células foliculares achatadas Os folículos primários são resultado do desenvolvimento dos folículos primordiais o oócito permanece sendo imaturo porém inicia se a multiplicação celular e as células tornamse cubóides Durante o estágio de folículo secundário o oócito é imaturo e as células foliculares multiplicamse formando diversas camadas ao redor do oócito e iniciase a formação do antro folicular contendo líquido Na fase de folículo terciário o antro folicular expandese o oócito permanece imaturo e rodeado de inúmeras camadas foliculares O estágio final da maturação é chamado de folículo maduro notandose total desenvolvimento do oócito o qual é liberado durante a ovulação antro folicular repleto de líquido e proeminente células foliculares formam a estrutura conhecida como corona radiata REFERÊNCIA GUYTON Arthur C HALL Michael E HALL John E Tratado de fisiologia médica 14 ed RIO DE JANEIRO 2021