Relatorio Aulas Praticas Ensino Digital - Bioquimica e Identificacao de Moleculas

RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO 01 e 02 DATA a Qual o princípio da técnica de Selivanoff b Qual o objetivo de utiliza um tubo apenas com água destilada c Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrico HCl durante o teste de Selivanoff d Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de aldose e cetoses PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados 2 Responda as Perguntas a Por que a ovoalbumina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados b Explique por que a ovoalbumina tornase insolúvel após a precipitação c Explique os resultados encontrados no experimento PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados 2 Responda as Perguntas a Explique os conceitos de Salting out Salting in e camada de solvatação b Qual o princípio bioquímico do experimento c Explique os resultados encontrados durante o experimento REAÇÃO DE BENEDICT IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados 2 Responda as Perguntas a Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento b Qual o conceito de açúcares redutores c Explique os resultados encontrados no experimento d Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica REAÇÃO DE BIURETO 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados Senha enviada com sucesso para o email informado em seu cadastro Confira também seu WhatsApp Caso seja o número cadastrado Recuperação de senha Recebendo muitos emails Cancelar inscrição IDIB Para wesamuca220hotmailcom Sáb 11032023 0848 Prezado SAMUEL PEREIRA DA SILVA Conforme solicitado segue a sua senha de acesso Senha SAMUKA12 Abaixo encontramse informações sobre o horário e o endereço IP da máquina de onde partiu esta solicitação Data 11032023 0748 IP 17271227134 SAC Serviço de Atendimento ao Candidatowwwidiborgbr RELATÓRIO DE PRÁTICA Nome matrícula RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS ENSINO DIGITAL RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS Bioquímica Humana DADOS DOA ALUNOA NOME MATRÍCULA CURSO POLO PROFESSORA ORIENTADORA ORIENTAÇÕES GERAIS O relatório deve ser elaborado individualmente e deve ser escrito de forma clara e concisa O relatório deve conter apenas 01 uma lauda por tema Fonte Arial ou Times New Roman Normal e Justificado Tamanho 12 Margens Superior 3 cm Inferior 2 cm Esquerda 3 cm Direita 2 cm Espaçamento entre linhas simples Título Arial ou Times New Roman Negrito e Centralizado Atenção desenvolva as respostas de maneira resumida mas garanta que todo o conteúdo necessário foi abordado Para essa atividade é obrigatório a indicação de referência bibliográfica RELATÓRIO ATIVIDADE CATALÍTICA DA AMILASE SALIVAR 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados 2 Responda as Perguntas a Qual a composição bioquímica do amido b Qual o objetivo do uso de HCl aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido c Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose d Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico REAÇÃO DE SELIWANOFF REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados 2 Responda as Perguntas UNINASSAU CURSO DE FARMÁCIA ITAMARA COSTA SANTOS RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS BIOQUÍMICA HUMANA 2023 ATIVIDADE CATALITICA DA AMILASE SALIVAR 1 Descreva os procedimentos realizados durante a aula explicando as estapas e quais materiais utilizados Materiais utilizados Reagentes utilizados 3 tubos de ensaio Amido 3 Pipetas Saliva Béquer Lugol Proveta HCL Estante para pipetas Água destilada h20 PROCEDIMENTO Identificamos os tubos de ensaio assim como as suas respectivas pipetas 1 2 3 cada tudo de ensaio adicionamos 5m de água destilada Tubo 1 5ml de água destilada H20 10ml de solução de amido1ml de HCLObs O tubo de ensaio nº 1 permaneceu em repouso na estante sua tonalidade ficou turva Tubo 2 5mL de água destilada H20 10ml de solução de amido 1ml de HCL Obs O tubo de ensaio nº 2 foi submetido a uma temperatura de 100º por 10 minutos e após refrigerado por 5 minutos À sua tonalidade translucida Tubo 3 5ml de água destilada H20 10ml de solução de amido 1ml de HCL Obs O tubo de ensaio nº 3 foi submetido a uma temperatura de 100º por 20 minutos e após descansou foi resfriado em temperatura ambiente na estante A sua tonalidade translucida Após os tubos de ensaios estarem todos adicionados a estante adicionamos 1 gota do reagente LUGOL em cada tudo Logo observamos a presença de amido no tubo 1 tubo 2 a presença do amido estava numa menor quantidade e o tubo 3 ouve uma sutil presença do amido 2 Responda as perguntas AQual a composição do amido É um polissacarídeo natural formado pela união de moléculas de glicose com ligação glico sídica do tipo alfa A fórmula ge ral do amido é C6H10O5 O amido é composto pelas moléculas de glicose que pode ser encontrada na natureza ele é formado por dois polissacarídeos amilose e amilopectina que são constituídos de moléculas de αglicose mas são ligeiramente diferentes O amido é a principal fonte de armazenamento de energia nas plantas e por isso está presente em raízes frutos tubérculos e sementes B Qual o objetivo do uso de HCl aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido A reação com ácido clorídrico favorece a hidrólise do amido Idealmente essa reação é dada por um curto período de aquecimento seguda por um resfriamento com uso de gelo C Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose Com a mastigação há liberação da amilase presente na saliva Ela catalisará a hidrolise nasligações glicosídicas da amilose resultando em maltose glicose e amilopectina e das ligaçõesda amilopectina resultando em dextrina mistura de polissacarídeos D Explique os resultados obditos durante o ensaio bioquímico O tubo 1 em repouso observou uma tonalidade turva já o tubo 2 submetido a uma alteração de temperatura sua tonalidade ficou translucida e o tubo 3 teve uma presença sutil de amido sua tonalidade translucida REAÇÃO DE SELIWANOFF REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES 1 Descreva os procedimentos realizados durante a aula explicando as estapas e quais materiais utilizados Identificar os tubos de ensaio como Glicose Tubo 1 Frutose ou mel de abelha Tubo 2 e água Tubo3 Pipetar para o primeiro tubo 1mL de glicose ao segundo 1mL de frutose ou mel de abelha e ao terceiro1mL de água destilada que vai servir como um controle negativo com pipetas de 1mL Adicionar em todos os tubos de ensaio 15mL de ácido clorídrico Adicionar 05mL de reativo de Seliwanoff Materiais utilizados Ácido clorídrico Água destilada Reativo de Seliwanoff Tubos de ensaio Glicose aldose Pipetas Frutose cetose Pera de borracha 2 Responda as perguntas A Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff O Teste de Seliwanoff ocorre pela reação do ácido clorídrico em contato com os carboidratos que após a mistura provoca a desidratação dos carboidratos devido à hidrólise da ligação glicosídica B Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada É uma solução controle negativo C Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrio HCL durante o teste de Seliwanoff A função do HCL na teste de Seliwanoff é a de desidratar os carboidratos para que esse processo ocorra é preciso que haja energia no meio e essa energia vem da fervura Ao desidratar os carboidratos o HCL forma furfurais e assume a coloração vermelha O HCL é um acido produzido no estomago dos animais a sua função é a de clivar enzinas inativas para a digestão das proteínas no estomago e também agir na digestão das proteínas Além disso é um reagente importante para algumas reações feitas em laboratórios já que ela pode ser sintetizada em laboratório D Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de aldose e cetoses A reação do reagente com aldose sacarose forma hidroximetilfurfural já a reação do reagente com cetose frutose forma o furfural A reação com a cetose é bem mais rápida e intensa ims a formação de furfural é mais fácil do que a formação do hidroximetilfurfural A análise através dos experimentos e visto que a glicose e a frutose trazem a representação de um produto de cetose e um de aldose onde a glicose representa uma aldose e a frutose uma cetose causando a reação pelo reativo de Seliwanoff PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 1Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando asetapas e quais materiais utilizados E como matéria prima a ovoalbumina 10 A precipitação é imediata Tubo para reação com o ácido tricloroacético 20 Adicionar 2 ml de albumina 10 no tubo Adicionar 1 ml de ácido tricloroacético e observar pois a precipitação é imediataForma um líquido leitoso branco indicando a precipitação e formação d e algunsgrumos da proteína Antes conseguimos visualizar o concentrado da solução e apósa precipitação ele fica todo turvo indicando que houve a precipitação da proteína peloácido Tubo para reação com o metal pesado acetato de chumbo Adicionar 2 ml de albumina 10 no tubo Adicionar 5 gotas de acetato de chumbo eobservar Verificamos que também houve uma precipitação Porém conseguimos termais visibilidade e perceber que no tubo do ácido teve uma precipitação mais intensapois o ácido forte tem a capacidade de quebrar as ligações peptídicas da proteína mais do que o chumbo Temos um material mais leitoso no ácido do que no metal pesado De toda forma também temos essa percepção em relação a solução inicial e as soluções precipitadas Com essa prática é possível perceber que além modificação do ponto elétrico do meio de cargas iônicas de tudo isso que a gente tem nas proteínas um ponto que é importante para a precipitação são alguns tipos de elementos químicos que conseguem cativar quebrar as estruturas da proteína fazendo esse processo de precipitação que a gente também pode fazer com o ácido e com o metal pesado Materiais utilizados Pera de borracha Pipeta Becker Ácido tricloroacético 20 Acetato de chumbo 10 Ovoalbumina 10 2 Responda as Perguntas a Porque a ovoalbunina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados Foi possivel perceber nesta prática que além modificação do ponto elétrico do meio de cargas iônicas de tudo isso que a gente tem nas proteínas um ponto que é importante para a precipitação são alguns tipos de elementos químicos que conseguem cativar quebrar as estruturas da proteína fazendo esse processo de precipitação que a gente também pode fazer com o ácido e com o metal pesado b Explique por que a ovoalbumina tornase insolúvel após a precipitação A ovoalbumina foi desnaturada por isso ela precipitou As proteínas podem ser desnaturadas de acordo com as condições de pH e temperatura no meio quando essas variáveis se alteram demais a proteína tende a perder a sua conformação e a sua função c Explique os resultados encontrados no experimento Forma um líquido leitoso branco indicando a precipitação e formação de alguns grumos da proteína Antes conseguimos visualizar o concentrado da solução e apósa precipitação ele fica todo turvo indicando que houve a precipitação da proteína pelo ácido Verificamos que também houve uma precipitação Porém conseguimos ter mais visibilidade e perceber que no tubo do ácido teve uma precipitação mais intensa pois o ácido forte tem a capacidade de quebrar as ligações peptídicas da proteína mais do que o chumbo Temos um material mais leitoso no ácido do que no metal pesado De toda forma também temos essa percepção em relação a solução inicial e as soluções precipitadas PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados A precipitação de proteínas pode ocorrer com grandes ou pequenas quantidades de sais aumentando ou diminuindo a interação entre as proteínas Com o aumento do sal a interação proteínaproteína é maior e com a diminuição do sal a interação proteínaágua é maior Na aula observamos dois tubos um com água sulfato de amônio e ovoalbumina e um sem água com sulfato de amônio e ovoalbumina para ser realizado o experimento da precipitação Reagentes Ovoalbumina 10 Sulfato de amônio concentrado solução concentrada de sais salina que vai proporcionar a precipitação das proteínas Água para padrão negativo Equipamentos Pera de borracha Pipeta Becker 2 Responda as Perguntas a Explique os conceitos de Salting out Salting in e camada de solvatação Salting in Dáse pela solubilização do precipitado elevandose a concentração de sais no meio e aumentando a interação proteínaágua causando aumento da solubilidade Salting out Corresponde a precipitação da proteína através da adição de sais com alta força iônica que se ligam a água havendo predominância da interação proteína proteína Em altas concentrações de sal ocorre a remoção de hidratação solvatação o que leva a predominância da interação proteínaproteína Camada de Solvatação E uma película formada a partir da absorção ou fixação das partículas do dispergente na superfície das partículas do disperso Essa fixação ou absorção existente é devido à uma grande afinidade entre as partículas do dispergente e do disperso b Qual o princípio bioquímico do experimento Quando adicionamos sais neutros a uma solução ocorre um aumento da força iônica aumento da concentração de íons do sistema Assim quando adicionamos pequenas salting in ou grandes salting out quantidades de sias a uma solução contendo proteínas as cargas passam a interagir com moléculas proteicas aumentando ou diminuindo a interação entre elas c Explique os resultados encontrados durante o experimento Ao adicionar o sulfato de amônio ocorre a precipitação das proteínas formando um líquido leitoso solução sem água Na solução com água não ocorre precipitação da proteína uma vez que a água interfere na questão das cargas A utilização de sais concentrados causa a precipitação de proteínas Ao utilizar sias em concentrações maiores ocorre o salting out e em concentrações menos o salting in como visto anteriormente O salting out é um processo importante para a separação de proteínas uma vez que a concentração de sal necessária para precipitação é diferente para cada proteína Dessa maneira esse experimento é de grande importância para bioquímica REAÇÃO DE BENEDICT IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados Tubo da glicose Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de glicose Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 7 O graus houve uma modificação porém não é uma reação de uma cor vermelho tijolo mas essa modificação para a cor esverdeada indica que houve de fato uma redução dos íons Houve uma reação do cobre E nesse caso não a formação do óxido cuproso já foi reduzido ao máximo o cobre mas conseguimos perceber uma diferença entre a sacarose e a glicose Isso significa que a glicose geralmente a aldose é um agente redutor monossacarídeo e a frutose e a sacarose não é redutora Identificando esses principais açúcares redutores como a glicose que é nosso monômero e a sacarose Essa prática é importante afim de várias outras reações que ocorrem em relação aos carboidratos redutores que são utilizados em diversas reações na indústria e outros segmentos Tubo da sacarose Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de sacarose Homogeneizar Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve redução e nem reação entre os íons Significa que a sacarose não é um carboidrato redutor ou seja ele não tem hidroxila A carbonila que faz a reação com os íons cúpricos Tubo da água Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de água Homogeneizar Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve reação A cor que está no tubo é do reativo de Benedict azul Não houve mudança de cor Materiais utilizados Glicose 1 Solução de sacarose 1 Equipamentos Pera de borracha Pipeta Becker Banho maria temperatura 70 graus por 5 minutos 2 Responda as Perguntas a Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento Os açúcares redutores são alguns carboidratos que apresentam estrutura que é uma hidroxila em um dos carbonos que é o c1l E essa hidroxila ela consegue reagir com diversos íons principalmente metálicos E a reação se baseia nessa ligação onde a carbonila vai se ligar a um reativo que é chamado reativo de Benedict Esse reativo contém íons cúpricos que ao reagir com essa carbonila ela forma um composto chamado de óxido cuproso O reagente tem uma cor azul bem intensa e pronunciada A reação positiva dessa junção entre a carbonila do açúcar redutor com o íon cuproso desse reativo formam um composto vermelho tijolo que é uma coloração bem diferenciada desse reativo A Partir dessa reação conseguimos identificar quais são os principais açúcares redutores A reação não ocorre após a imediata colocação do material É necessária uma reação a quente onde vamos utilizar o banho maria para realizar a reação b Qual o conceito de açúcares redutores Um açúcar redutor é qualquer açúcar que em solução básica apresenta um grupo carbonílico livre aldeído derivado de uma aldose Sua capacidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído ou cetona livre Todo monossacarídeo alguns dissacarídeos e oligossacarídeos As cetonas precisam entrar em equilíbrio dinâmico e se tornarem aldeídos antes de poderem atuar como açucares redutores Os açucares mais comuns que consumimos galactose glicose e frutose são açucares redutores c Explique os resultados encontrados no experimento Tubo de glicose Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus houve uma modificação porém não é uma reação de uma cor vermelho tijolo mas essa modificação para a cor esverdeada indica que houve de fato uma redução dos íons Houve uma reação do cobre E nesse caso não a formação do óxido cuproso já foi reduzido ao máximo o cobre mas conseguimos perceber uma diferença entre a sacarose e a glicose Isso significa que a glicose geralmente a aldose é um agente redutor monossacarídeo e a frutose e a sacarose não é redutora Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve redução e nem reação entre os íons Significa que a sacarose não é um carboidrato redutor ou seja ele não tem hidroxila A carbonila que faz a reação com os íons cúpricos Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve reação A cor que está no tubo é do reativo de Benedict azul Não houve mudança de cor d Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica O reagente de Benedict é usado geralmente no lugar da solução de Fehling para detectar excesso de açúcar na urina e detectar uma possível diabete O teste pode ser feito num tubo de ensaio adicionandose 10ml do reagente de Benedict em 100ml da primeira urina da manhã mais concentrada e depois com a ajuda do bico de Bunsen levando a mistura a ebulição Após a fervura verificase uma alteração na cor original do reagente uma cor esverdeada indica a presença de pouco açúcar e uma cor alaranjada indica altos Índices de açúcar REFERÊNCIAS Andrade Katia Kellen da Silva Duarte Helena Simões SOLUBILIZAÇÃO E PRECIPITAÇÃO DE PROTEÍNAS PELO MÉTODO SALTING IN E SALTING OUT XI jornada de ensino pesquisa e extensão JEPEX 2011 UFRPE Recife 17 a 21 de outubro Juliana Precipitação por sais de metais pesados e por ácidos fortes LABORATÓRIO DIDÁTICO DE BIOQUIMICA UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAIBA UFPB 01 de agosto de 2017 Motta T Valter 2009 Bioquímica Clínica para Laboratório Princípios e Interpretações Rio de Janeiro MED BOOK Edito 01mra cientifica LTDA Pp 91 93 NELSON DL COX MM Lehninger Princípios de Bioquímica 3ª edição São Paulo 2002 OLIVEIRA RO MARIA LCS MERÇON F E AGUIAR MRMP Preparo e Emprego do Reagente de Benedict na Análise de Açúcares uma Proposta para o Ensino e Química orgânica Química Nova na Escola N 23 P 4142 2006 SANTOS Ana SILVA Bárbara RIBEIRO Débora et al Bioquímica Prática Protocolos para análise de biomoléculas e exercícios complementares Repositório UFMA 2013 Disponível em httpwwwrepositorioufmabr8080jspuibitstream14451Livro20de20Bioqui mica20Pratica pdf Acesso em 16 out 2023 UNINASSAU CURSO DE FARMÁCIA ITAMARA COSTA SANTOS RELATÓRIO DE AULAS PRÁTICAS BIOQUÍMICA HUMANA 2023 ATIVIDADE CATALITICA DA AMILASE SALIVAR 1 Descreva os procedimentos realizados durante a aula explicando as estapas e quais materiais utilizados Materiais utilizados Reagentes utilizados 3 tubos de ensaio Amido 3 Pipetas Saliva Béquer Lugol Proveta HCL Estante para pipetas Água destilada h20 PROCEDIMENTO Identificamos os tubos de ensaio assim como as suas respectivas pipetas 1 2 3 cada tudo de ensaio adicionamos 5m de água destilada Tubo 1 5ml de água destilada H20 10ml de solução de amido1ml de HCLObs O tubo de ensaio nº 1 permaneceu em repouso na estante sua tonalidade ficou turva Tubo 2 5mL de água destilada H20 10ml de solução de amido 1ml de HCL Obs O tubo de ensaio nº 2 foi submetido a uma temperatura de 100º por 10 minutos e após refrigerado por 5 minutos À sua tonalidade translucida Tubo 3 5ml de água destilada H20 10ml de solução de amido 1ml de HCL Obs O tubo de ensaio nº 3 foi submetido a uma temperatura de 100º por 20 minutos e após descansou foi resfriado em temperatura ambiente na estante A sua tonalidade translucida Após os tubos de ensaios estarem todos adicionados a estante adicionamos 1 gota do reagente LUGOL em cada tudo Logo observamos a presença de amido no tubo 1 tubo 2 a presença do amido estava numa menor quantidade e o tubo 3 ouve uma sutil presença do amido 2 Responda as perguntas AQual a composição do amido É um polissacarídeo natural formado pela união de moléculas de glicose com ligação glico sídica do tipo alfa A fórmula ge ral do amido é C6H10O5 O amido é composto pelas moléculas de glicose que pode ser encontrada na natureza ele é formado por dois polissacarídeos amilose e amilopectina que são constituídos de moléculas de αglicose mas são ligeiramente diferentes O amido é a principal fonte de armazenamento de energia nas plantas e por isso está presente em raízes frutos tubérculos e sementes B Qual o objetivo do uso de HCl aquecimento e resfriamento no procedimento da hidrólise química do amido A reação com ácido clorídrico favorece a hidrólise do amido Idealmente essa reação é dada por um curto período de aquecimento seguda por um resfriamento com uso de gelo C Descreva a sequência de transformações operadas pela amilase na molécula da amilose Com a mastigação há liberação da amilase presente na saliva Ela catalisará a hidrolise nasligações glicosídicas da amilose resultando em maltose glicose e amilopectina e das ligaçõesda amilopectina resultando em dextrina mistura de polissacarídeos D Explique os resultados obditos durante o ensaio bioquímico O tubo 1 em repouso observou uma tonalidade turva já o tubo 2 submetido a uma alteração de temperatura sua tonalidade ficou translucida e o tubo 3 teve uma presença sutil de amido sua tonalidade translucida REAÇÃO DE SELIWANOFF REAÇÃO PARA DISTINÇÃO ENTRE ALDOSES E CETOSES 1 Descreva os procedimentos realizados durante a aula explicando as estapas e quais materiais utilizados Identificar os tubos de ensaio como Glicose Tubo 1 Frutose ou mel de abelha Tubo 2 e água Tubo3 Pipetar para o primeiro tubo 1mL de glicose ao segundo 1mL de frutose ou mel de abelha e ao terceiro1mL de água destilada que vai servir como um controle negativo com pipetas de 1mL Adicionar em todos os tubos de ensaio 15mL de ácido clorídrico Adicionar 05mL de reativo de Seliwanoff Materiais utilizados Ácido clorídrico Água destilada Reativo de Seliwanoff Tubos de ensaio Glicose aldose Pipetas Frutose cetose Pera de borracha 2 Responda as perguntas A Explique o princípio bioquímico do teste de Seliwanoff O Teste de Seliwanoff ocorre pela reação do ácido clorídrico em contato com os carboidratos que após a mistura provoca a desidratação dos carboidratos devido à hidrólise da ligação glicosídica B Explique qual o objetivo de utilizar um tubo apenas com água destilada É uma solução controle negativo C Porque é necessário aplicar fervura e ácido clorídrio HCL durante o teste de Seliwanoff A função do HCL na teste de Seliwanoff é a de desidratar os carboidratos para que esse processo ocorra é preciso que haja energia no meio e essa energia vem da fervura Ao desidratar os carboidratos o HCL forma furfurais e assume a coloração vermelha O HCL é um acido produzido no estomago dos animais a sua função é a de clivar enzinas inativas para a digestão das proteínas no estomago e também agir na digestão das proteínas Além disso é um reagente importante para algumas reações feitas em laboratórios já que ela pode ser sintetizada em laboratório D Explique os resultados obtidos durante o ensaio bioquímico quanto a presença de aldose e cetoses A reação do reagente com aldose sacarose forma hidroximetilfurfural já a reação do reagente com cetose frutose forma o furfural A reação com a cetose é bem mais rápida e intensa ims a formação de furfural é mais fácil do que a formação do hidroximetilfurfural A análise através dos experimentos e visto que a glicose e a frutose trazem a representação de um produto de cetose e um de aldose onde a glicose representa uma aldose e a frutose uma cetose causando a reação pelo reativo de Seliwanoff PRECIPITAÇÃO POR ÁCIDOS FORTES E METAIS PESADOS 1Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando asetapas e quais materiais utilizados E como matéria prima a ovoalbumina 10 A precipitação é imediata Tubo para reação com o ácido tricloroacético 20 Adicionar 2 ml de albumina 10 no tubo Adicionar 1 ml de ácido tricloroacético e observar pois a precipitação é imediataForma um líquido leitoso branco indicando a precipitação e formação d e algunsgrumos da proteína Antes conseguimos visualizar o concentrado da solução e apósa precipitação ele fica todo turvo indicando que houve a precipitação da proteína peloácido Tubo para reação com o metal pesado acetato de chumbo Adicionar 2 ml de albumina 10 no tubo Adicionar 5 gotas de acetato de chumbo eobservar Verificamos que também houve uma precipitação Porém conseguimos termais visibilidade e perceber que no tubo do ácido teve uma precipitação mais intensapois o ácido forte tem a capacidade de quebrar as ligações peptídicas da proteína mais do que o chumbo Temos um material mais leitoso no ácido do que no metal pesado De toda forma também temos essa percepção em relação a solução inicial e as soluções precipitadas Com essa prática é possível perceber que além modificação do ponto elétrico do meio de cargas iônicas de tudo isso que a gente tem nas proteínas um ponto que é importante para a precipitação são alguns tipos de elementos químicos que conseguem cativar quebrar as estruturas da proteína fazendo esse processo de precipitação que a gente também pode fazer com o ácido e com o metal pesado Materiais utilizados Pera de borracha Pipeta Becker Ácido tricloroacético 20 Acetato de chumbo 10 Ovoalbumina 10 2 Responda as Perguntas a Porque a ovoalbunina precipita na presença de ácidos fortes e metais pesados Foi possivel perceber nesta prática que além modificação do ponto elétrico do meio de cargas iônicas de tudo isso que a gente tem nas proteínas um ponto que é importante para a precipitação são alguns tipos de elementos químicos que conseguem cativar quebrar as estruturas da proteína fazendo esse processo de precipitação que a gente também pode fazer com o ácido e com o metal pesado b Explique por que a ovoalbumina tornase insolúvel após a precipitação A ovoalbumina foi desnaturada por isso ela precipitou As proteínas podem ser desnaturadas de acordo com as condições de pH e temperatura no meio quando essas variáveis se alteram demais a proteína tende a perder a sua conformação e a sua função c Explique os resultados encontrados no experimento Forma um líquido leitoso branco indicando a precipitação e formação de alguns grumos da proteína Antes conseguimos visualizar o concentrado da solução e apósa precipitação ele fica todo turvo indicando que houve a precipitação da proteína pelo ácido Verificamos que também houve uma precipitação Porém conseguimos ter mais visibilidade e perceber que no tubo do ácido teve uma precipitação mais intensa pois o ácido forte tem a capacidade de quebrar as ligações peptídicas da proteína mais do que o chumbo Temos um material mais leitoso no ácido do que no metal pesado De toda forma também temos essa percepção em relação a solução inicial e as soluções precipitadas PRECIPITAÇÃO FRACIONADA POR SOLUÇÕES SALINAS CONCENTRADAS 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados A precipitação de proteínas pode ocorrer com grandes ou pequenas quantidades de sais aumentando ou diminuindo a interação entre as proteínas Com o aumento do sal a interação proteínaproteína é maior e com a diminuição do sal a interação proteínaágua é maior Na aula observamos dois tubos um com água sulfato de amônio e ovoalbumina e um sem água com sulfato de amônio e ovoalbumina para ser realizado o experimento da precipitação Reagentes Ovoalbumina 10 Sulfato de amônio concentrado solução concentrada de sais salina que vai proporcionar a precipitação das proteínas Água para padrão negativo Equipamentos Pera de borracha Pipeta Becker 2 Responda as Perguntas a Explique os conceitos de Salting out Salting in e camada de solvatação Salting in Dáse pela solubilização do precipitado elevandose a concentração de sais no meio e aumentando a interação proteínaágua causando aumento da solubilidade Salting out Corresponde a precipitação da proteína através da adição de sais com alta força iônica que se ligam a água havendo predominância da interação proteína proteína Em altas concentrações de sal ocorre a remoção de hidratação solvatação o que leva a predominância da interação proteínaproteína Camada de Solvatação E uma película formada a partir da absorção ou fixação das partículas do dispergente na superfície das partículas do disperso Essa fixação ou absorção existente é devido à uma grande afinidade entre as partículas do dispergente e do disperso b Qual o princípio bioquímico do experimento Quando adicionamos sais neutros a uma solução ocorre um aumento da força iônica aumento da concentração de íons do sistema Assim quando adicionamos pequenas salting in ou grandes salting out quantidades de sias a uma solução contendo proteínas as cargas passam a interagir com moléculas proteicas aumentando ou diminuindo a interação entre elas c Explique os resultados encontrados durante o experimento Ao adicionar o sulfato de amônio ocorre a precipitação das proteínas formando um líquido leitoso solução sem água Na solução com água não ocorre precipitação da proteína uma vez que a água interfere na questão das cargas A utilização de sais concentrados causa a precipitação de proteínas Ao utilizar sias em concentrações maiores ocorre o salting out e em concentrações menos o salting in como visto anteriormente O salting out é um processo importante para a separação de proteínas uma vez que a concentração de sal necessária para precipitação é diferente para cada proteína Dessa maneira esse experimento é de grande importância para bioquímica REAÇÃO DE BENEDICT IDENTIFICAÇÃO DE AÇÚCARES REDUTORES 1 Descreva os procedimentos realizado durante a aula explicando as etapas e quais materiais utilizados Tubo da glicose Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de glicose Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 7 O graus houve uma modificação porém não é uma reação de uma cor vermelho tijolo mas essa modificação para a cor esverdeada indica que houve de fato uma redução dos íons Houve uma reação do cobre E nesse caso não a formação do óxido cuproso já foi reduzido ao máximo o cobre mas conseguimos perceber uma diferença entre a sacarose e a glicose Isso significa que a glicose geralmente a aldose é um agente redutor monossacarídeo e a frutose e a sacarose não é redutora Identificando esses principais açúcares redutores como a glicose que é nosso monômero e a sacarose Essa prática é importante afim de várias outras reações que ocorrem em relação aos carboidratos redutores que são utilizados em diversas reações na indústria e outros segmentos Tubo da sacarose Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de sacarose Homogeneizar Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve redução e nem reação entre os íons Significa que a sacarose não é um carboidrato redutor ou seja ele não tem hidroxila A carbonila que faz a reação com os íons cúpricos Tubo da água Adicionar 5 ml do reativo de Benedict Adicionar 5 ml de água Homogeneizar Não teve reação É necessário levar ao banho maria para perceber a reação de positividade ou não Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve reação A cor que está no tubo é do reativo de Benedict azul Não houve mudança de cor Materiais utilizados Glicose 1 Solução de sacarose 1 Equipamentos Pera de borracha Pipeta Becker Banho maria temperatura 70 graus por 5 minutos 2 Responda as Perguntas a Explique o princípio da técnica bioquímica do experimento Os açúcares redutores são alguns carboidratos que apresentam estrutura que é uma hidroxila em um dos carbonos que é o c1l E essa hidroxila ela consegue reagir com diversos íons principalmente metálicos E a reação se baseia nessa ligação onde a carbonila vai se ligar a um reativo que é chamado reativo de Benedict Esse reativo contém íons cúpricos que ao reagir com essa carbonila ela forma um composto chamado de óxido cuproso O reagente tem uma cor azul bem intensa e pronunciada A reação positiva dessa junção entre a carbonila do açúcar redutor com o íon cuproso desse reativo formam um composto vermelho tijolo que é uma coloração bem diferenciada desse reativo A Partir dessa reação conseguimos identificar quais são os principais açúcares redutores A reação não ocorre após a imediata colocação do material É necessária uma reação a quente onde vamos utilizar o banho maria para realizar a reação b Qual o conceito de açúcares redutores Um açúcar redutor é qualquer açúcar que em solução básica apresenta um grupo carbonílico livre aldeído derivado de uma aldose Sua capacidade de redução se dá pela presença de um grupo aldeído ou cetona livre Todo monossacarídeo alguns dissacarídeos e oligossacarídeos As cetonas precisam entrar em equilíbrio dinâmico e se tornarem aldeídos antes de poderem atuar como açucares redutores Os açucares mais comuns que consumimos galactose glicose e frutose são açucares redutores c Explique os resultados encontrados no experimento Tubo de glicose Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus houve uma modificação porém não é uma reação de uma cor vermelho tijolo mas essa modificação para a cor esverdeada indica que houve de fato uma redução dos íons Houve uma reação do cobre E nesse caso não a formação do óxido cuproso já foi reduzido ao máximo o cobre mas conseguimos perceber uma diferença entre a sacarose e a glicose Isso significa que a glicose geralmente a aldose é um agente redutor monossacarídeo e a frutose e a sacarose não é redutora Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve redução e nem reação entre os íons Significa que a sacarose não é um carboidrato redutor ou seja ele não tem hidroxila A carbonila que faz a reação com os íons cúpricos Mesmo após o banho maria por 5 minutos em temperatura a 70 graus não houve reação A cor que está no tubo é do reativo de Benedict azul Não houve mudança de cor d Explique como o experimento pode ser aplicado nas atividades na área clínica O reagente de Benedict é usado geralmente no lugar da solução de Fehling para detectar excesso de açúcar na urina e detectar uma possível diabete O teste pode ser feito num tubo de ensaio adicionandose 10ml do reagente de Benedict em 100ml da primeira urina da manhã mais concentrada e depois com a ajuda do bico de Bunsen levando a mistura a ebulição Após a fervura verificase uma alteração na cor original do reagente uma cor esverdeada indica a presença de pouco açúcar e uma cor alaranjada indica altos Índices de açúcar REFERÊNCIAS Andrade Katia Kellen da Silva Duarte Helena Simões SOLUBILIZAÇÃO E PRECIPITAÇÃO DE PROTEÍNAS PELO MÉTODO SALTING IN E SALTING OUT XI jornada de ensino pesquisa e extensão JEPEX 2011 UFRPE Recife 17 a 21 de outubro Juliana Precipitação por sais de metais pesados e por ácidos fortes LABORATÓRIO DIDÁTICO DE BIOQUIMICA UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARAIBA UFPB 01 de agosto de 2017 Motta T Valter 2009 Bioquímica Clínica para Laboratório Princípios e Interpretações Rio de Janeiro MED BOOK Edito 01mra cientifica LTDA Pp 9193 NELSON DL COX MM Lehninger Princípios de Bioquímica 3ª edição São Paulo 2002 OLIVEIRA RO MARIA LCS MERÇON F E AGUIAR MRMP Preparo e Emprego do Reagente de Benedict na Análise de Açúcares uma Proposta para o Ensino e Química orgânica Química Nova na Escola N 23 P 4142 2006 SANTOS Ana SILVA Bárbara RIBEIRO Débora et al Bioquímica Prática Protocolos para análise de biomoléculas e exercícios complementares Repositório UFMA 2013 Disponível em httpwwwrepositorioufmabr8080jspuibitstream14451Livro20de 20Bioquimica20Pratica pdf Acesso em 16 out 2023