Análise Microbiológica para Contagem de Microrganismos Aeróbios Mesófilos

Análise Microbiológica CONTAGEM PADRÃO DE MICRORGANISMOS AERÓBIOS MESÓFILOS ESTRITOS E FACULTATIVOS VIÁVEIS 1OBJETIVO Realizar a contagem padrão de microrganismos aeróbios mesófilos estritos e facultativos viáveis em amostras de presunto 2 INTRODUÇÃO Microrganismos mesófilos são aqueles que crescem bem entre 20 e 45ºC e que tem como temperatura ótima de crescimento a faixa de 30 a 40ºC A presença de microrganismos mesófilos em alimentos quando em grande número pode ser indicativo de deficiente qualidade higiênica da matériaprima por aplicação de processo tecnológico inadequado manipulação higiênica incorreta ou manutenção em condições impróprias Considerando que entre os microrganismos mesófilos se encontra a maioria dos patógenos de importância sua presença no alimento pode indicar risco grave à saúde pública 3 APLICAÇÃO Aplicase a amostras de matériasprimas águas e alimentos em geral 4 PRINCÍPIO Baseiase na semeadura em ágar padrão para contagem seguida de incubação em temperatura 36ºC 1ºC por 48 horas 4 MATERIAIS 41 Equipamentos vidrarias e meios de cultura Câmara climática regulada a 35 1ºC Pipeta bacteriológica de 1 mL com graduação decimal Placas de Petri estéreis vazias 36 Pinça bisturi ou faca garfo colher estéreis Produtos em geral Placas que contenham entre 25 e 250 colônias Amostras de água Placas que contenham entre 30 e 300 colônias Erlenmeyer com 225 mL de solução salina peptonada 01 estéril 6 unid Agar Padrão para Contagem PCA estéril 10 frascos contendo 75 mL Tubos contendo 9 mL de solução salina peptonada a 01 25 7 TÉCNICA 1 Pesar 25 gramas ou pipetar 25 mL da amostra 2 Adicionar a unidade analítica a 225 mL de solução salina peptonada 01 e homogeneizar por aproximadamente 60 segundos no stomacher esta é a diluição 101 3 A partir da diluição inicial 101 efetuar as demais diluições desejadas em solução salina peptonada 01 4 Semear 1 mL de cada diluição selecionada em placas de Petri estéreis vazias 5 Adicionar cerca de 15 a 20 mL de ágar PCA fundido e mantido em banho maria a 46ºC48ºC 6 Homogeneizar adequadamente o ágar com o inoculo submetendo a placa a duas séries alternadas de cinco movimentos de vaivem e cinco movimentos rotatórios Deixar solidificar em superfície plana 7 Incubar as placas invertidas a 36ºC 1C por 48 horas 8 Leitura Segundo o tipo de amostra em análise realizar a leitura selecionando as placas de acordo com o seguinte critério contando todas as colônias presentes 8 INTERPRETAÇÃO CÁLCULO E EXPRESSÃO DE RESULTADOS A partir dos dados obtidos calcular o número de microrganismos presentes na amostra em análise seguindo as instruções UFC g ou mL nocolônias diluição Figura 1 Esquema para contagem padrão em placas de aeróbios mesófilos Obs O procedimento para a pesquisa de termófilos e psicrotrófilos é o mesmo descrito para mesófilos variando o tempo e a temperatura de incubação a Psicrotrófilos2 a 8ºC10 dias b Termófilos55 1º C48 horas 10 BIBLIOGRAFIA CONSULTADA SILVA N JUNQUEIRA V C A SILVEIRA N F A Manual de métodos de análise microbiológica de alimentos 2 ed São Paulo Varela 2001 295p