Aula Prática de Biologia - Técnica de Esfregaço Sanguíneo e Identificação Celular

INSTITUTO FEDERAL Mato Grosso Centro de Referência de Jaciara SERVIÇO PÚBLICO FEDERAL INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE MATO GROSSO CAMPUS SÃO VICENTE CENTRO DE REFERÊNCIA DE JACIARA CURSO SUPERIOR DE LICENCIATURA EM CIÊNCIAS DA NATUREZA COM HABILITAÇÃO EM BIOLOGIA 2º Aula Prática Sangue OBJETIVOS Realizar a técnica de esfregaço de sangue para visualizar e identificar os tipos de células presentes INDUMENTÁRIA Durante as aulas práticas o aluno deverá utilizar jaleco de manga comprida luvas de procedimento adquiridas pelo aluno calças compridas e sapato fechado MATERIAIS Duas caixas de lâminas Pipetas com álcool 70 Corante azul de metileno ou Corante panótico rápido Cuba de plástico para coloração de lâminas ou Becker 100 mL Microscópio óptico Óleo de imersão para lâmina Luvas PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Técnica de esfregaço de sangue O método de preparação para demonstrar melhor os tipos celulares do sangue periférico é o esfregaço de sangue Uma gota de sangue é colocada diretamente sobre uma lâmina de vidro e espalhada em uma camada fina pela sua superfície Isso é obtido espalhandose a gota de sangue com a borda de uma lâmina histológica ao longo de outra lâmina com o objetivo de produzir uma monocamada de células TÉCNICA DE ESFREGAÇO DE SANGUE 1 Apoiar a lâmina de microscopia já com a identificação do paciente sobre uma superfície limpa Certificarse de que a lâmina tem boa qualidade e não está suja ou possui vestígios de gordura o que pode prejudicar o teste 2 Obtémse a amostra de sangue por punção da polpa do dedo com uma lanceta previamente desinfetada A colher de sangue será feita levandose em consideração que a gota de sangue extraída deve ser encostada na lâmina invertida que só toca na gota emergente evitando assim o contato com a pele 3 Colocar uma pequena gota de sangue próxima a uma das extremidades da lâmina 4 Com o auxílio de outra lâmina colocar a gota de sangue em contato com sua borda Para isso a lâmina extensora deve fazer um movimento para trás tocando a gota com o dorso em um ângulo de 45 Figura 1 5 O sangue da gota irá se espalhar pela borda da lâmina extensora por capilaridade 6 A lâmina deve então deslizar suave e uniformemente sobre a outra em direção oposta a extremidade em que está a gota de sangue O sangue será puxado pela lâmina 7 Depois de completamente estendido o sangue forma uma película sobre a lâmina de vidro 8 Devese deixar que o esfregaço seque sem nenhuma interferência 9 Seguir para o passo de coloração É necessário esfregar uma lâmina sobre a outra rapidamente antes que o sangue seque ou coagule Uma pressão excessiva ou qualquer movimento de parada durante esse processo pode comprometer o esfregaço É importante lembrar também que a espessura da película é determinada em grande parte pelo ângulo formado entre as lâminas no momento da extensão da gota de sangue Ângulos maiores que 45 por exemplo produzem extensões espessas e curtas dificultando posteriormente a visualização das células COLORAÇÃO DE ESFREGAÇO DE SANGUE COM PANÓTICO RÁPIDO 13062023