Resenha Fisiologia 2022 2

Revista Brasileira de Prescrição e Fisiologia do Exercício ISSN 19819900 versão eletrônica Periódico do Instituto Brasileiro de Pesquisa e Ensino em Fisiologia do Exercício wwwibpfexcombr wwwrbpfe xcombr EFEITOS DO EXERCÍCIO DE RESISTIDO SOBRE A HOMEOSTASE DA GLICOSE E ATIVAÇÃO DA mTOR EM RATOS TRATADOS POR DEXAMETASONA RESUMO Introdução Os glicocorticoides GC são utilizados como antiinflamatórios e antiinflamatórios mas o seu uso prolongado pode causar distúrbios metabólicos como hiperglicemia resistência à insulina e diminuição da síntese de proteínas No entanto o exercício resistido ER tem sido uma alternativa importante na prevenção e tratamento desses distúrbios metabólicos Objetivo Investigar o efeito de uma única sessão de ER sobre a homeostase da glicose e a proteína mTOR de ratos tratados com glicocorticoide Materiais e métodos Ratos Wistar machos foram divididos aleatoriamente nos grupos controle CO Dexametasona Sedentário DEX e Dexametasona Exercicio resistido DEXER Os grupos DEX e DEXER receberam dexametasona por 7 dias 20mgkgdia O protocolo de ER foi baseado em cinco séries de 10 repetições com intensidade de 60 de uma repetição máxima 1RM realizado no aparelho de agachamento Foram aferidos o peso corporal a glicemia teste de tolerância à insulina TTI e expressão proteica da Aktfosforiladatotal e da AMPKfosforiladatotal Resultados A glicose apresentouse elevada e o TTI reduzido no grupo DEX porém uma única sessão de ER reduziu a glicose e melhorou a tolerância à insulina Já a razão da expressão proteica da Aktfosforiladatotal e da AMPKfosforiladatotal não apresentou diferença entre os grupos No entanto em relação à razão mTORfosforiladatotal houve um aumento no DEXER comparado apenas ao grupo CO Conclusão Uma única sessão de ER mesmo na presença da altas doses de dexametasona melhorou a homeostase da glicose e aumentou a razão mTORfosforiladatotal que está envolvida na síntese de proteínas no músculo esquelético Revista Brasileira de Prescrição e Fisiologia do Exercício ISSN 19819900 versão eletrônica Periódico do Instituto Brasileiro de Pesquisa e Ensino em Fisiologia do Exercício wwwibpfexcombr wwwrbpfe xcombr Foram transferidos ao biotério Setorial Laboratório de Farmacologia Cardiovascular LAFACDFSUFS Os animais foram mantidos em gaiolas de polietileno cinco animais por caixa com dieta a alimentação ad libitum em um ciclo de claroescuro de 12 horas e temperatura na faixa de 23 2ºC durante todo o experimento O protocolo experimental desta pesquisa foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa Animal da Universidade Federal de Sergipe e sobre o protocolo 752015 seguindo a Declaração de Helsinki e os Princípios Éticos na Experimentação Animal do Colégio Brasileiro de Experimentação Animal COBEA Grupo experimental Os ratos foram pesados e distribuídos aleatoriamente em três grupos de oito animais 1 grupo controle CO sedentário e querecebeu injeção diária de solução salina 2 mlkgdia ip ao longo de 7 dias 2 Dexametasona DEX sedentário e que recebeu ao longo de 7 dias injeções diárias de DEX 2 mlkgdia ip dissolvido em solução salina e 3 Dexametasona exercício resistido DEX ER recebendo injeções diárias de DEX 2 mlkgdia ip dissolvido em solução salina e que realizaram o exercício resistido durante a semana Esta dosagem de dexametasona 2 mgkg utilizada foi baseada em um estudo publicado anteriormente Perry e colaboradores 2003 A dexametasona ou solução salina com controle foram injetados entre às 14h e 15h durante os 7 dias de tratamento Protocolos de exercício resistido O ER foi realizado no aparelho de agachamento segundo modelo de Tamaki Tamaki e colaboradores 1992 com pequenas modificações Mota e colaboradores 2015 Os animais do grupo DEXER após 3 dias de adaptação para 5mindia sem carga de trabalho para minimizar o estresse causado pela exposição dos animais ao exercício Costa Rosa 2004 foram exercitados através de 5 séries de 10 repetições com intervalos de repouso de 60s e intensidade de 60 de carga estabelecida através de teste de uma repetição máxima 1RM realizado 48 horas antes do teste de 1RM American College of Sports Medicine 2009 Os animais do grupo CO e DEX foram submetidos aos mesmos procedimentos do protocolo de treinamento que os animais do grupo DEXRE mas sem a realização do movimento de extensão e flexão das patas visto que estes permaneciam suspensos na posição de repouso Os parâmetros de estimulação elétrica foram realizados conforme descrito por Baruana e colaboradores 2005 Os animais foram estimulados a executar as séries através de aplicação de estímulos elétricos 20 V 03 de intervalo utilizando eletrodos autoadesivos da marca ValuTrode Modelo CF3200 Axelgaard Fallbrook CA EUA colocados na coxa e conectados a um eletrostimulador BIOSET Physiotrans four Modelo 3050 Rio Claro São Paulo Foram utilizados estes parâmetros haja vista que induzem alterações na concentração de catecolaminas plasmáticas nem modificações na morfologia da medula adrenal o que possibilita a aplicação de longa duração sem risco de alterações teóricas Baruana e colaboradores 2005 Monitoramento do peso corporal O peso dos animais de todos os grupos foi acompanhado diariamente onde foi utilizado uma balança de precisão da marca Bioprecise Modelo B3000 sendo que a primeira determinação dos Grupos tratados com dexametasona DEX e DEXER foi realizada antes da primeira dose Isso foi adotado com os animais do grupo CO Avaliação da sensibilidade à insulina No oitavo dia após a indução da resistência à insulina foi realizado o teste de sensibilidade à insulina Os animais dos grupos CO DEX e DEXER permaneceram sob restrição alimentar durante 6 horas e foram submetidos a punção comal Considerada a primeira coleta de sangue que representa o tempo zero foram utilizadas fitas reagentes ACCUCHEK Advantage II Roche São PauloSP Brasil e o glicosímetro ACCUCHEK Advantage II Roche São PauloSP Brasil de acordo com as especificações do fabricante Após isso os animais receberam 075UIkg de insulina humana regular Humulin Revista Brasileira de Prescrição e Fisiologia do Exercício ISSN 19819900 versão eletrônica Periódico do Instituto Brasileiro de Pesquisa e Ensino em Fisiologia do Exercício wwwibpfexcombr wwwrbpfe xcombr R 100Uml Ce liofarm intraperitoneal e as amostras de sangue foram coletadas através da extremidade da cauda dos animais nos tempos 30 60 e 120 minutos para determinação da glucose Western Blot As amostras de tecido do músculo esquelético plantar foram homogeneizadas em tampão RIPA e centrifugadas a 10000g por 15 min a 4ºC O sobrenadante foi retirado e armazenado congelado 80ºC para uso posterior Para a análise da expressão proteica da AMPK total AMPK fosforilada AKT total AKT fosforilado mTOR total e mTOR fosforilado 45µg de proteína das amostras foram aplicadas nas canaletas de um gel de poliacrilamida 10 e posteriormente as proteínas do gel foram transferidas para a membrana de nitrocelulose Foi feito o bloqueio da membrana com leite em pó 5 diluído em PBSTween 03 e posteriormente a membrana foi incubada com anticorpos das proteínas de interesse AMPK total Millipore AMPK fosforilada Thr172 Millipore Akt total Santa Cruz Biotechnology Akt fosforilada Ser473 Santa Cruz Biotechnology mTOR total Cell Signaling Technology mTOR fosforilado Cell Signaling Technology Em seguida a membrana foi incubada com anticorpo secundário e logo após esse processo a membrana foi revelada por detecção quimioluminescente Amersham Biosciences do Brasil Ltda Figura 3 A Sinais representativos de Western Blot e gráficos de barras mostrando a razão B Razão AktfosforiladaAkt total C Razão AMPK fosforiladaAMPK total D mTOR fosforiladamTOR total Homeostase da glicose em animais tratado com DEXA após uma única sessão de RE o tratamento com dexametasona aumentou a glicemia de jejum nos animais do grupo DEX comparado aos animais do grupo CO no entanto após uma única sessão de RE a glicemia de jejum foi reduzida mostrando os efeitos agudos do exercício resistedido Figura 2A Além disso no teste de sensibilidade à insulina no grupo DEX os animais apresentaram maior glicemia no tempo 30 60 e 120 em relação ao grupo CO Figura 2B p005 o que representa uma menor tolerância à insulina Já os animais do grupo DEXER apresentaram uma redução na resposta glicêmica em comparação ao grupo DEX no tempo 30 60 e 120 o que representa uma melhora na sensibilidade à insulina Figura 2B p005 Figura 2 A Glicemia em jejum B O teste de tolerância à glicose oral teste de tolerância à insulina ITT e dados da área sob a curva AUC para glicose ITT Os valores são expressos como média SEM Para a análise dos dados foi usada ANOVA de uma via seguida pelo pósteste de Bonferroni para o ITT e o teste t não pareado de Student foi usado para a AUC p 005 p 001 p 0001 vs CTR p 001 p 0001 vs DEX RE Revistas Brasileiras de Prescrição e Fisiologia do Exercício ISSN 19819900 versão eletrônica Periódico do Instituto Brasileiro de Pesquisa e Ensino em Fisiologia do Exercício wwwibpefexcombr wwwrbpfexcombr Revistas Brasileiras de Prescrição e Fisiologia do Exercício ISSN 19819900 versão eletrônica Periódico do Instituto Brasileiro de Pesquisa e Ensino em Fisiologia do Exercício wwwibpefexcombr wwwrbpfexcombr RESENHA CRÍTICA Glicocorticóides possuem vasta ação anti inflamatória sistêmica entretanto tanto em doses únicas quanto crônicas ofertam efeitos colaterais pois desencadeiam alterações metabólicas como hiperinsulinemia dislipidemia resistência à insulina dentre outros Os efeitos citados anteriormente podem ser ainda mais potencializados quando somados a alterações metabólicas pré existentes Quanto às alterações relacionadas a via de captação de glicose e liberação de insulina podem ser explicadas a partir das suas células alvo bem como o pâncreas Para o músculo captar a glicose a partir do GLUT4 é preciso que haja uma série de cascatas fisiológicas e interações específicas bem como a sinalização e interação A insulina é um hormônio anabólico sendo assim tem potente ação para síntese Entretanto ao utilizar glicorticóides o poder da insulina é diminuído A partir dessa premissa o treinamento de musculação é muito indicado e referenciado na literatura cujo objetivo é melhorar a sinalização de insulina e captação de glicose pelo músculo esquelético preservando assim a homeostase corporal metabólica Além disso sabese que o músculo é visto atualmente como um órgão endócrino sendo assim sua atuação preserva a si próprio e os mecanismos metabólicos corporais Uma das vias importantes utilizadas durante o treinamento de musculação é a via Akt e mTor Importante ressaltar que o treinamento de musculação quando aplicado em um formato crônico traz benefícios significativos aos seus praticantes entretanto ainda há uma lacuna na literatura se o presente tipo de treinamento consegue amenizar ou atenuar as consequências de um tratamento crônico de glicocorticoides com apenas uma sessão Esse foi o objetivo do presente estudo A amostra foi composta por ratos com três meses de vida e pesos entre 300g e 350g Durante o experimento os animais foram mantidos em gaiolas alternando a luz em clara e escura a cada 12 horas A temperatura foi mantida em torno de 23º Os ratos foram encaminhados a três grupos Grupo Controle Grupo Dexametasona e Grupo Dexametasona Exercício O único grupo que realizou os exercícios foi esse O Protocolo do exercício foi realizado na máquina de agachamento e aplicado apenas no grupo Dexametasona Exercício Os animais foram submetidos a três dias de adaptação ao exercício sendo efetuado sem carga cujo tempo de 5 minutos Após o momento de adaptação foram aplicadas 5 séries de 10 repetições com intervalos de 60 de pausa passiva com peso de 60 a partir do teste de 1 repetição máxima Esse teste foi realizado 48 horas antes do protocolo ser executado Para análise foram inseridos eletrodos nos animais tanto do grupo que fez exercício Dexametasonona Exercício como do grupo Dexametasona O peso dos animais de todos os grupos ou seja dos três grupos foi aferido diariamente através de uma balança de precisão Para os grupos de Dexametasona Dexametasona Exercício e Dexametasona a aferição foi feita antes da primeira dose Para avaliar a sensibilidade à insulina foi realizado um teste para análise de sensibilidade Animais dos três grupos foram submetidos a jejum de 6 horas e feita punção caudal Para análise da expressão proteica foi utilizado um gel específico A análise de dados foi feita através do ANOVA Utilizado o teste TStudent para duas amostras pareadas As conclusões do estudo demonstram que uma única sessão ofereceu benefícios e efeitos positivos para as variáveis analisadas Sendo assim é importante incorporar a prática de exercícios tanto para efeitos metabólicos como antropométricos pois um está diretamente complementando o outro Tendo em vista que nos dias atuais o comportamento sedentário está em alta as consequências geradas pelo mesmo estão sendo cada vez mais aumentadas Antes de desenvolvermos diabetes por exemplo entramos em quadro de resistência a insulina Antes de se desenvolver dislipidemias entramos em quadros de hiperinsulinemia e assim por diante Sendo assim a prática de exercícios físicos orientada por Profissionais de Educação Física e aplicadas frequentemente são de suma importante para controle e prevenção de tais doenças e alterações