Processamento do Tecido

Processamento do tecido\nUma vez que o tecido foi fixado, ele deve ser processado de uma forma em que se possa fazer finas secções microscópicas. O processamento usual é feito com a parafina:\nTecidos embebidos na parafina (que tem uma densidade semelhante ao do tecido) podem ser seccionados em cortes de 3 a 10 microns, normalmente 6-8 microns. As principais etapas deste processo são a desidratação, a diafanização e a impregnação:\nTecidos úmidos fixados (em soluções aquosas), não podem ser diretamente infiltrados com parafina. Em primeiro lugar, a água dos tecidos deve ser removida por desidratação. Isto é normalmente feito com uma série de ciclos, de 70% para 95% e para 100%. Às vezes, o primeiro passo é uma mistura de formal e álcool\nOutros agentes fixadores podem ser utilizados, mas têm grandes desvantagens. Rectona é muito rápida, mas apresenta isso de nublado, pois é seguro apenas para os pequenos tecidos processados manualmente. Dioxano pode ser utilizado sem clareador, mas tem gases tóxicos:\nO próximo passo é chamado de diafanização e consiste na remoção do desidratante com uma substância que vai ser miscível com o meio de impregnação (parafina).\nO agente diafanizador mais comum é o xilol. Tolueno funciona bem, e é mais tolerante a pequenas quantidades de água que restaram nos tecidos, mas é 3 vezes mais caro do que o xilol\nCloroformio costuma-se utilizado, mas é um perigo para a saúde, e é lento\nSalicilato de Metal raramente é usado, porque é caro, embora tenha um cheiro mais agradável\nFinalmente, o tecido é infiltrado com o agente impregnante, parafinas\nOs referidos processos são quase sempre automatizados para os grandes volumes de rotina de tecidos processados\nAutomação consiste de um instrumento que move os tecidos através dos diferentes agentes em um tempo pré-estabelecido (Histotécnico.)\n\nHistotécnico\nAlternativas para a impregnação com a parafina incluem várias substâncias que permitem finas secções. Essas substâncias são o metacrilato de metil, metacrilato de glicol, araldite e Epon.\nO Metacrilato de metila penetra profundamente e, portanto, é bom para a impregnação do osso não descalcificado. Metacrilato de Glicol tem uma ampla utilização, uma vez que é mais fácil de trabalhar com ele:\nAraldite tem o mesmo papel do metacrilato de Glicol, mas exige um processo mais complexo de impregnação. Epon é usada rotineiramente para microscopia eletrônica, onde finas secções são necessárias.