Criar um Projeto de Pesquisa

Instruções do exercício FORMATAÇÃO E FERRAMENTAS O projeto final deve ser enviado em PDF na norma ABNT através do BB Apenas um dos integrantes deve anexar o arquivo no BB ORIENTAÇÕES 1 Escolha do Tema Defina o Foco Escolha seu tema em biologia molecular ou biotecnologia Relevância Certifiquese de que o tema escolhido seja relevante e tenha potencial de impacto na saúde 2 Pesquisa e Revisão Bibliográfica Fontes Confiáveis Utilize artigos científicos livros e publicações de revistas especializadas Análise Crítica Avalie as tecnologias existentes e identifique lacunas que seu projeto pode preencher 3 Estrutura do Projeto Formato ABNT Siga as normas da ABNT para a formatação do texto Seções do Projeto Ambos devem ser entregues em pdf Texto 15 ponto e Apresentação 15 ponto Texto Capa Inclua o título do projeto nomes dos integrantes instituição e data Sumário Liste todas as seções do projeto com suas respectivas páginas Introdução Apresente o tema a importância do projeto e os objetivos Objetivo Defina claramente o que o projeto pretende alcançar Justificativa Explique a relevância do projeto e os benefícios esperados Material e Métodos Descreva os materiais utilizados e os métodos de pesquisa e experimentação Discussão e Desenvolvimento Detalhe o desenvolvimento do projeto incluindo desafios e soluções encontradas UNIVERSIDADE CIDADE DE SÃO PAULO UNICID CURSO DE BACHARELADO EM BIOMEDICINA INSIRA AQUI OS NOMES EVOLUÇÃO DOS MÉTODOS DIAGNÓSTICOS PARA DETECÇÃO DO HPV AVANÇOS E LIMITAÇÕES INSIRA AQUI A CIDADE 2024 INSIRA AQUI OS NOMES EVOLUÇÃO DOS MÉTODOS DIAGNÓSTICOS PARA DETECÇÃO DO HPV AVANÇOS E LIMITAÇÕES Trabalho apresentado ao curso de Bacharelado em Biomedicina da Universidade Cidade de São Paulo UNICID como requisito na obtenção de nota para aprovação na disciplina de xxxxxxxxx Professor a xxxxxxxxxxx INSIRA AQUI A CIDADE 2024 RESUMO A detecção precoce do Papilomavírus Humano HPV é importante para prevenir a progressão de lesões précancerosas e cânceres associados Este trabalho revisa os avanços recentes e as limitações dos métodos diagnósticos utilizados para identificar o HPV A análise abrange tecnologias condicionais como a ocorrência em cadeia da polimerase PCR captura híbrida e sequenciamento de nova geração NGS além das inovações emergentes como biossensores e dispositivos pointofcare Apesar dos avanços inovadores ainda existem desafios relacionados à sensibilidade especificidade custo e infraestrutura necessária para a implementação desses métodos O objetivo é fornecer uma visão abrangente sobre o estado atual dos métodos de diagnóstico do HPV e sugestões futuras para melhorar a eficácia e acessibilidade dos testes Palavraschave HPV Diagnóstico PCR Sequenciamento ABSTRACT Early detection of Human Papillomavirus HPV is important to prevent the progression of precancerous lesions and associated cancers This work reviews recent advances and limitations of diagnostic methods used to identify HPV The analysis covers conditional technologies such as polymerase chain reaction PCR hybrid capture and nextgeneration sequencing NGS as well as emerging innovations such as biosensors and pointofcare devices Despite innovative advances there are still challenges related to sensitivity specificity cost and infrastructure required to implement these methods The goal is to provide a comprehensive overview of the current state of HPV diagnostic methods and future suggestions for improving the effectiveness and accessibility of testing Keywords HPV Diagnosis PCR Sequencing SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO 05 12 Objetivos 06 121 Objetivo geral 06 122 Objetivos específicos 06 13 Justificativa 06 2 MATERIAIS E MÉTODOS 07 3 REVISÃO BIBLIOGRÁFICA 08 31 Epidemiologia 09 32 Programa de rastreamento do câncer de colo do útero 10 REFERÊNCIAS 12 Instruções do exercício FORMATAÇÃO E FERRAMENTAS O projeto final deve ser enviado em PDF na norma ABNT através do BB Apenas um dos integrantes deve anexar o arquivo no BB ORIENTAÇÕES 1 Escolha do Tema Defina o Foco Escolha seu tema em biologia molecular ou biotecnologia Relevância Certifiquese de que o tema escolhido seja relevante e tenha potencial de impacto na saúde 2 Pesquisa e Revisão Bibliográfica Fontes Confiáveis Utilize artigos científicos livros e publicações de revistas especializadas Análise Crítica Avalie as tecnologias existentes e identifique lacunas que seu projeto pode preencher 3 Estrutura do Projeto Formato ABNT Siga as normas da ABNT para a formatação do texto Seções do Projeto Ambos devem ser entregues em pdf Texto 15 ponto e Apresentação 15 ponto Texto Capa Inclua o título do projeto nomes dos integrantes instituição e data Sumário Liste todas as seções do projeto com suas respectivas páginas Introdução Apresente o tema a importância do projeto e os objetivos Objetivo Defina claramente o que o projeto pretende alcançar Justificativa Explique a relevância do projeto e os benefícios esperados Material e Métodos Descreva os materiais utilizados e os métodos de pesquisa e experimentação Discussão e Desenvolvimento Detalhe o desenvolvimento do projeto incluindo desafios e soluções encontradas 6 1 INTRODUÇÃO O Vírus do Papiloma Humano HPV é uma família de vírus que pode causar infecções em várias partes do corpo incluindo a pele e as mucosas Entre os tipos de HPV alguns são conhecidos por serem oncogênicos ou seja estão associados ao desenvolvimento de câncer principalmente o câncer cervical A infecção pelo HPV é uma das infecções sexualmente transmissíveis mais comuns em todo o mundo INCA 2020 A patologia cervical referese a alterações no colo do útero que podem variar desde lesões précancerosas até câncer invasivo As lesões precursoras do câncer cervical incluem a neoplasia intraepitelial cervical NIC que é classificada em graus I II e III conforme a severidade das alterações celulares O câncer de colo uterino constitui a quarta neoplasia mais prevalente em mulheres no mundo sendo a quarta causa de óbito por câncer em mulheres no Brasil INCA 2016 Conceição et al 2024 explicam que nos últimos anos os métodos de detecção do HPV evoluíram significativamente com o desenvolvimento de técnicas moleculares cada vez mais sensíveis e específicas A ocorrência em cadeia da polimerase PCR tornouse um padrão ouro permitindo a identificação precisa de diferentes subtipos virais As tecnologias como o sequenciamento de nova geração NGS proporcionam uma análise mais detalhada do genoma viral e suas variantes Apesar dos avanços os métodos diagnósticos atuais ainda enfrentam dificuldades específicas A PCR por exemplo é altamente sensível mas pode detectar a presença de DNA viral em infecções latentes sem indicar atividade viral ou risco de progressão para câncer Para além os métodos moleculares muitas vezes não distinguem entre infecções transitórias e persistentes que estão mais associadas ao desenvolvimento de lesões malignas Lima et al 2023 7 12 Objetivos 122 Objetivo geral Revisar e analisar os avanços e limitações dos métodos diagnósticos utilizados para a detecção do Papilomavírus Humano HPV destacando as tecnologias emergentes e discutindo suas implicações para a detecção precoce e manejo de infecções com foco na aplicabilidade em diferentes contextos clínicos e ambientais 123 Objetivos específicos Identificar e descrever os principais métodos diagnósticos atuais utilizados na detecção do HPV como PCR captura híbrida e sequenciamento de nova geração NGS Analisar os avanços tecnológicos recentes como o desenvolvimento de biossensores e dispositivos pointofcare que têm potencial para melhorar o rastreamento e diagnóstico precoce do HPV Discutir as limitações e desafios associados a cada método diagnóstico incluindo questões de sensibilidade especificidade custo e necessidade de infraestrutura Avaliar a aplicabilidade desses métodos em diferentes cenários populacionais com ênfase em regiões de poucos recursos e impacto na saúde pública 13 Justificativa Justificase a realização do presente trabalho por meio de uma revisão abrangente sobre os avanços e limitações dos métodos diagnósticos do HPV para compreender como essas tecnologias podem ser aprimoradas e disseminadas contribuindo para uma detecção mais eficiente e acessível em diferentes contextos populacionais 8 2 MATERIAIS E MÉTODOS A presente pesquisa será uma revisão de literatura onde segundo Brizola e Fantin 2016 a revisão da literatura é a compilação e a replicação de ideias de vários autores sobre um determinado tema que foram coletadas por meio da leitura e da pesquisa realizada pelo pesquisador A documentação feita pelo pesquisador sobre a pesquisa que é conveniente fazer é chamada de revisão da literatura neste sentido Na revisão de literatura o escritor necessita conhecer o método e saber que este está diretamente relacionado ao objeto central da pesquisa onde este método tem ressonância com a linha teóricofilosófica que embasará a investigação Trentini Paim 2001 Nesse sentido para a realização da pesquisa será utilizado as plataformas de busca de dados Google Scholar SciELO e Portal CAPES O mesmo contará com os seguintes critérios conforme exposto na tabela 1 abaixo TABELA 1 Critérios de inclusão e exclusão da pesquisa CRITÉRIOS DE INCLUSÃO CRITÉRIOS DE EXCLUSÃO Trabalhos com até 10 anos de publicação 20142024 Trabalhos com mais de 10 anos de publicação anterior a 2014 Palavraschave HPV Biotecnologia Avanços Desafios Quaisquer outras palavraschave que não estejam alinhadas com os critérios de inclusão Trabalhos concluídos Trabalhos em desenvolvimento Fonte O autor 2024 Após realizar a coleta de dados seguindo esses critérios pretendese analisar os dados coletados no mês de outubronovembro de 2024 fazendo uma tabulação dos achados perante a revisão de literatura 9 3 REVISÃO BIBLIOGRÁFICA O Vírus do Papiloma Humano HPV é um grupo de vírus pertencentes à família Papillomaviridae Eles são pequenos vírus de ácido desoxirribonucleico DNA não envelopados que infectam as células epiteliais da pele e das mucosas causando uma variedade de lesões e infecções Esses vírus são altamente específicos para cada espécie os HPVs infectam apenas humanos Palefsky 2022 A estrutura deste vírus é fundamental para sua capacidade de infectar células hospedeiras e se replicar O genoma do HPV possui proteínas importantes na patogênese e replicação viral As proteínas L late proteins estão relacionadas à estrutura viral e as proteínas E early proteins desempenham um papel importante na regulação do código genético viral e à transformação celular Palefsky 2022 O vírus é composto por um capsídeo protéico formado por proteínas L1 e L2 que envolvem o material genético de DNA de fita dupla circular Conway Meyers 2009 A proteína L1 é a principal componente do capsídeo e forma os pentâmeros que constituem as faces do icosaedro Ela é importante na estabilidade do capsídeo e na ligação do vírus a receptores na superfície das células hospedeiras A proteína L2 está localizada dentro do capsídeo e tem um papel menos claro mas acreditase que esteja envolvida na entrada do vírus na célula hospedeira Conway Meyers 2009 As proteínas E1 e E2 são expressas precocemente auxiliando no estabelecimento de 20 a 100 cópias do material viral por meio das células basais do hospedeiro Lima et al 2023 Smith et al 2007 Essas 2 proteínas formam um complexo com a célula do hospedeiro e recrutam polimerases e proteínas acessórias necessárias para facilitar a replicação Lima et al 2023 Diferentes tipos de HPV possuem tropismo a diferentes tecidos do corpo humano sendo assim associados a diferentes patologias Palefsky 2022 Alguns tipos de HPV tem predileção ao epitélio cutâneo e se manifestam clinicamente através de lesões verrucosas Hadi et al 2023 Os tipos de HPV 10 associados a lesões verrucosas cutâneas incluem o tipo 1 2 3 4 7 e 10 Jain et al 2023 São diversos os tipos de HPV com predileção pelo epitélio ano genital Locais comuns para esta infecção incluem pênis escroto região perineal canal anal introito vaginal vulva e cérvice Mais de 40 subtipos de HPV podem infectar o trato genital Palefsky 2022 31 Epidemiologia Globalmente o HPV é a infecção sexualmente transmissível IST mais comum Em países ocidentais o pico de incidência tipicamente se encontra entre 1525 anos de idade assim como a maioria das ISTs Sendo a prevalência maior em mulheres em idade reprodutiva Palefsky 2022 Estimase que pelo menos 80 dos indivíduos sexualmente ativos vão ser expostos ao HPV ao menos uma vez durante a vida Centers For Disease Control And Prevention 2012 No entanto a maioria das infecções pelo HPV incluindo aquelas causadas por genótipos oncogênicos tem resolução espontânea em 12 meses Palefsky 2022 Dados preliminares do estudo POPBrasil resultados e ações para o enfrentamento da infecção pelo HPV realizado em 26 capitais e no Distrito Federal demonstraram a presença do vírus em 546 dos participantes A idade média dos entrevistados foi de 206 anos A maioria informou estar em uma relação afetiva estável 419 namorando 331 casados ou morando com oa parceiroa O restante estava sem relacionamento Pilz et al 2020 O câncer de colo do útero é a quarta neoplasia maligna mais frequente em mulheres com incidência mundial estimada de 595414 casos novos e mortalidade de 311365 mulheres em 2018 Bray et al 2024 É responsável por 75 de todas as mortes por câncer em mulheres sendo cerca de 85 dos casos de câncer de colo uterino diagnosticados em países em desenvolvimento Segundo o Instituto Nacional de Câncer o câncer de colo uterino é a quarta neoplasia mais frequente em mulheres com estimativa de 1548 casos para cada 100 mil mulheres No Brasil o câncer de colo uterino foi responsável 11 por 5448 óbitos em mulheres no ano de 2018 com estimativa de 488 mortes para cada 100 mil mulheres Febrasgo 2021 INCA 2020 32 Programa de rastreamento do câncer de colo do útero Embora o câncer do colo do útero seja o quarto câncer mais incidente entre mulheres no mundo as taxas de mortalidade estão reduzindo especialmente em países de alta renda Bosch 2003 Melhorias no rastreamento no diagnóstico e no tratamento são apontadas como as razões para esse declínio Em países de baixa e média renda como o Brasil as taxas de incidência desse tumor variam substancialmente entre as regiões devido às diferenças de acesso ao sistema de saúde Sankaranarayanan 2008 Nas últimas décadas no Brasil as taxas de incidência e mortalidade por câncer do colo do útero apresentaram discreta redução mas cerca de 80 dos casos ainda são diagnosticados em estádios avançados Isso indica baixa eficiência do rastreamento ainda que muitos recursos sejam aplicados O rastreamento é uma ação de saúde complexa O principal determinante para o seu sucesso é a cobertura da populaçãoalvo A busca ativa sistemática das mulheres sob risco é apontada como a melhor estratégia para atingir alta cobertura INCA 2020 Atualmente no Brasil o rastreamento do câncer do colo do útero deve ser realizado pelo exame citológico As recomendações são de iniciar o rastreamento aos 25 anos em mulheres gestantes ou não gestantes que já iniciarem atividade sexual Após dois exames negativos realizados com intervalo de um ano os próximos devem ser realizados a cada 3 anos Febrasgo 2021 INCA 2016 O rastreamento pode ser interrompido aos 64 anos em mulheres com pelo menos dois exames negativos consecutivos nos últimos cinco anos e sem antecedentes de patologia cervical INCA 2020 Para a coleta ideal do exame a paciente deve ser orientada sobre ausência de sangramento duchas e medicamentos intravaginais bem como abstinência sexual nas 72 horas que antecedem a coleta Em puérperas recomendase aguardar 6 a 8 semanas após o parto para o exame INCA 2016 12 A coleta preconizada no sistema público de saúde do Brasil SUS é a coleta dupla ecto e endocérvice O método constitui na exposição do colo uterino pelo espéculo de Collins e na remoção delicada dos conteúdos vaginal e cervical excessivos com algodão Procedese então à esfoliação do material ectocervical com espátula de Ayre em rotação de 360 graus e à introdução da escova endocervical a 15 cm com movimentos de vai e vem e rotação O material é colocado em fina camada sobre uma lâmina de vidro identificada e imediatamente fixado com spray ou em frasco com álcool a 70 FEBRASGO 2021 Pode ser realizada também a coleta em base líquida na qual a forma de coleta é a mesma porém a espátula de Ayre é de plástico e os materiais da espátula e da escova cytobrush não são colocados sobre a lâmina mas agitados em frasco com líquido conservante FEBRASGO 2021 Atualmente outra maneira de rastreio encontrase disponível o teste para HPVDNA Este teste é indicado para rastreamento do câncer de colo uterino em mulheres acima de 25 anos de idade bem como para esclarecimento das lesões atípicas e de baixo grau e no seguimento após tratamento de lesões de alto grau Essas são as indicações atuais para o teste de DNAHPV nos países que dispõem desse recurso No Brasil o teste não se encontra disponível na rede pública mas sim na rede privada FEBRASGO 2021 13 REFERÊNCIAS BRAY Freddie et al Global cancer statistics 2022 GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries CA a cancer journal for clinicians v 74 n 3 p 229263 2024 BRIZOLA Jairo FANTIN Nádia Revisão da literatura e revisão sistemática da literatura Revista de Educação do Vale do ArinosRELVA v 3 n 2 2016 CONCEIÇÃO Humberto Novais et al Desafios e avanços no combate ao papilomavírus humano estratégias de prevenção e tratamento Brazilian Journal of Implantology and Health Sciences v 6 n 5 p 8392 2024 CONWAY MJ MEYERS C Replication and assembly of human papillomaviruses Journal of Dental Research v 88 n 4 p 307317 abr 2009 FEDERAÇÃO BRASILEIRA DAS ASSOCIAÇÕES DE GINECOLOGIA E OBSTETRÍCIA FEBRASGO Câncer do colo do útero São Paulo FEBRASGO 2021 FEDERAÇÃO BRASILEIRA DAS ASSOCIAÇÕES DE GINECOLOGIA E OBSTETRÍCIA FEBRASGO Câncer da vulva e vagina São Paulo FEBRASGO 2020 HADI A et al Human Papillomavirus Its Characteristics Pathogenesis Transmission Immunity and its Role in Cervical Cancer A Mini Review J Water Res v 1 p 6572 2023 INSTITUTO NACIONAL DE CANCER INCA Coordenação de Prevenção e Vigilância Divisão de Detecção Precoce e Apoio à Organização de Rede Diretrizes brasileiras para o rastreamento do câncer do colo do útero 2a ed rev atual Rio de Janeiro INCA 2016 INSTITUTO NACIONAL DE CANCER INCA Estimativa 2020 incidência de câncer no Brasil Rio de Janeiro INCA 2020 14 JAIN Meenu et al Epidemiology molecular pathogenesis immuno pathogenesis immune escape mechanisms and vaccine evaluation for HPV associated carcinogenesis Pathogens v 12 n 12 p 1380 2023 LIMA Hyale Melo et al Rastreio de Câncer de Colo de Útero pelo DNA do HPV Brazilian Journal of Health Review v 6 n 2 p 58975908 2023 PALEFSKY J M Human papillomavirus infections epidemiology and disease associations UpToDate 2022 SANKARANARAYANAN Rengaswamy et al Cervical cancer screening and therapeutic perspectives Medical Principles and Practice v 17 n 5 p 351 364 2008 SMITH J et al Human papillomavirus type 31 uses a caveolin 1 and dynamin 2mediated entry pathway for infection of human keratinocytes Journal of Virology vol 81 p 99229931 2007 TRENTINI M PAIM L Pesquisa em Enfermagem Uma modalidade convergenteassistencial Florianópolis Editora da UFSC 2001