Interpretação de Eletroforese em Gel: Identificação de Gene de Resistência a Antibióticos

1 2 3 CN 4 5 6 CN 7 8 9 CN 10 PPM 11 12 CN 13 14 15 16 CN CP PPM Pergunta A eletroforese em gel é um método que permite a análise de fragmentos de DNA e o princípio dessa técnica é separar as moléculas com base no tamanho e na carga elétrica A figura a seguir apresenta uma corrida de eletroforese e representa a investigação de bactérias contendo o gene de resistência e antibióticos carbapenêmicos de 300pb pares de base Observe o resultado da eletroforese em gel de agarose 053 com brometo de etídio 10 µgml sob luz ultravioleta INTERPRETE e DISCUTA quais são as amostras em que o gene de resistência foi identificado e a função do CN controle negativo CP controle positivo e PPM padrão de peso molecular 100pb Figura 1 1 a 16 amostras CN controle negativo CP controle positivo e PPM padrão de peso molecular 100pb R Com a figura apresentada é possível observar e identificar quais amostras onde o gene de resistência a antibióticos foi detectado usando como base o padrão de migração dos fragmentos de DNA A análise é feita tendo em consideração a posição em que os fragmentos se encontram no gel de agarose que é influenciada pelo tamanho e carga elétrica das moléculas O CN controle negativo é uma amostra que é utilizada para verificar a existência de contaminação ou interferência na análise portanto é esperado que o controle negativo não apresente o gene de resistência servindo assim de referência para confirmar que a detecção do gene nas outras amostras não é um resultado de contaminação O CP controle positivo é uma amostra que já é conhecida e possui o gene de resistência a antibióticos carbapenêmicos de 300pb então essa amostra é utilizada como uma referência para confirmar o funcionamento adequado da técnica de eletroforese e também para servir de comparação com as outras amostras O PPM padrão de peso molecular é uma amostra que possui fragmentos de DNA de tamanhos diferentes e conhecidos Esse padrão é usado como uma régua de tamanho servindo de comparação para determinar uma estimativa do tamanho dos fragmentos presentes nas outras amostras Com base na figura é possível identificar as amostras em que o gene de resistência foi detectado observando a presença de um fragmento de tamanho de 300pb aproximadamente na mesma posição em que se encontra o controle positivo Esse fragmento indica que as bactérias que estão presentes nessas amostras têm o gene de resistência a antibióticos carbapenêmicos