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Roteiro de Atividade de Aprendizagem Atividade Prática Orientada APO Disciplina Micologia virologia e microbiologia clínica Temática Microrganismos patogênicos humanos Professor Maria Graciela Iecher Faria Nunes 1 Contextualização A microbiologia é a ciência que estuda os microrganismos estes podem ser eucariontes como os fungos procariontes como as bactérias ou acelulares como os vírus No decorrer das últimas décadas o desenvolvimento de fármacos eficientes no combate a infecções microbianas revolucionou o tratamento médico ocasionando a redução drástica da mortalidade causada por doenças microbianas Por outro lado a disseminação do uso de antibióticos lamentavelmente fez com que os microrganismos também desenvolvessem defesas relativas aos agentes com o consequente aparecimento de resistência SILVEIRA et al 2006 A resistência microbiana é um grave problema mundial estando associada ao aumento do tempo de internação dos custos do tratamento e das taxas de morbidade e mortalidade dos pacientes O uso indiscriminado e incorreto dos antimicrobianos na comunidade e no ambiente hospitalar é reconhecidamente um importante fator de risco para o aparecimento e a disseminação da resistência microbiana Nesse contexto inserese o Laboratório de Microbiologia que tem como objetivo não apenas apontar o responsável por um determinado estado infeccioso mas também indicar através do monitoramento de populações microbianas qual o perfil dos microrganismos que estão interagindo com o organismo humano possibilitando a indicação de tratamentos mais adequados BRASIL 2013 Esta atividade tem por objetivo conscientizar o acadêmico da área da saúde sobre a importância da logística da amostra dentro do laboratório de microbiologia clínica a importância do antibiograma e a liberação de um laudo através de casos clínicos e questões Referências BRASIL Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde Módulo 4 Procedimentos Laboratoriais da requisição do exame à análise microbiológica e laudo finalAgência Nacional de Vigilância Sanitária Brasília Anvisa 2013 Disponível em httpswwwsaudegogovbrimagesimagensmigradasuploadarquivos201702modulo 4procedimentoslaboratoriaisdarequisicaodoexameaanalisemicrobiologicaelaudofinalpdf Acesso em 20 de abril de 2023 SILVEIRA G P NOME F GESSER J C SÁ M M TERENZI H Estratégias utilizadas no combate a resistência bacteriana Química Nova Vol29 nº4 p844855 2006 2 Etapas e roteiro da atividade O resultado liberado pelo Setor de Microbiologia é consequência da qualidade da amostra recebida A coleta eou transporte inadequados podem ocasionar falhas no crescimento do microrganismo causador da infecção propiciando o desenvolvimento de microbiota normal ou 1 contaminantes induzindo a tratamentos inadequados A identificação correta do sítio de coleta possibilitará a análise adequada do crescimento microbiano na cultura 21 Com base no caso clínico abaixo responda as questões Paciente masculino 32 anos de idade dá entrada no hospital apresentando sintomas de infecção do trato urinário como dor ao urinar aumento da frequência urinária e dor na região lombar O paciente informa que já teve episódios semelhantes anteriormente e terminou um ciclo de antibiótico há 5 dias Foi coletada uma amostra de urina do paciente e enviada ao laboratório de microbiologia do hospital para análise O resultado da coloração de Gram da amostra mostrou a presença de bacilos Gram negativos Para identificação da bactéria foi realizado teste bioquímico utilizando os seguintes meios de cultura MacConkey ágar sangue e ágar cistinalactoseeletrolitosdeficientes CLED As analises bioquímicas indicaram que a bactéria isolada era da espécie Escherichia coli Para determinar a sensibilidade da E coli aos antibióticos foi realizado um antibiograma Os resultados mostraram que a bactéria era sensível aos seguintes antibióticos ceftriaxona amoxicilinaclavulanato e nitrofurantoína Com base nos resultados obtidos o paciente foi tratado com ceftriaxona por via intravenosa por 7 dias apresentando melhora significativa dos sintomas 22 Preencha a ficha abaixo utilizando os dados do caso clínico Hipótese Diagnóstica Dados clínicos descrever objetivamente os achados clínicos mais significativos lesões cutâneas ou de mucosas local e características do sítio de infecção etc Provável origem do processo infeccioso Comunitário Hospitalar Fez uso de antibiótico nos últimos 10 dias Quais Para urocultura informar Sintomático Assintomático Exames solicitados Exame a fresco Coloração de Gram Rotina bacteriológica Rotina para fungos Rotina para vírus Teste de sensibilidade solicitado Disco difusão Microdiluição em caldo Concentração Inibitória Mínima Etest Justificativa do envio para exame microbiológico Nome e identificação do profissional de saúde que colheu o material 23 Libere os laudos Microscopia cultura e antibiograma 2 3 Caso Clínico Um paciente de 45 anos de idade do sexo masculino apresentouse em uma clínica com queixa de dor abdominal náuseas e diarreia há três dias O médico solicitou uma amostra de fezes para cultura e identificação de patógenos entéricos O material foi colhido e enviado para o laboratório de microbiologia clínica Foi realizada a coloração de Gram evidenciando a presença de bacilos Gramnegativos Para confirmar a presença de Escherichia coli na amostra foram realizados testes bioquímicos Um perfil de antibiograma foi realizado para determinar a sensibilidade do patógeno aos antibióticos Os resultados mostraram que a cepa de E coli isolada era sensível a ampicilina cefotaxima ciprofloxacina e trimetoprimsulfametoxazol Com base nesses resultados o médico prescreveu ciprofloxacina para tratar a infecção do paciente Baseado no caso clínico é necessário a prescrição do antibiótico para o paciente Justifique sua resposta 3 4 Os fungos como causadores de infecção Caso clínico Paciente do sexo feminino de 30 anos apresentase na consulta ginecológica com queixa de coceira e ardência vulvovaginal além de corrimento branco e espesso A paciente informa que apresenta esses sintomas há uma semana É realizada a coleta de secreção vaginal e enviada ao laboratório de microbiologia No laboratório é realizado o exame microscópico do material coletado e identificada a presença de leveduras e filamentos miceliais É realizada a coloração de Gram na qual é observado a presença de células arredondadas Grampositivas compatíveis com Candida albicans Para confirmação da identificação da levedura são realizados testes bioquímicos como o teste de formação de tubo germinativo e teste de assimilação de açúcares Todos os resultados são compatíveis com Candida albicans Não é necessário realizar antibiograma para essa levedura uma vez que ela é naturalmente sensível aos antifúngicos mais comuns utilizados para o tratamento de candidíase vulvovaginal como o fluconazol e o clotrimazol Com base nos resultados é prescrito à paciente o tratamento com fluconazol por via oral ou clotrimazol tópico conforme orientação médica além de orientações quanto ao uso correto de antifúngicos e medidas para prevenção de candidíase vulvovaginal como evitar roupas apertadas manter a higiene íntima adequada e evitar o uso excessivo de produtos de higiene íntima 41 Analisando o caso clínico a sequência de identificação e a conduta do profissional responsável pelo diagnóstico estão corretas Justificar 4 42 Libere o laudo final 5 6 Roteiro de Atividade de Aprendizagem Atividade Prática Orientada APO Disciplina Micologia virologia e microbiologia clínica Temática Microrganismos patogênicos humanos Professor Maria Graciela Iecher Faria Nunes 1 Contextualização A microbiologia é a ciência que estuda os microrganismos estes podem ser eucariontes como os fungos procariontes como as bactérias ou acelulares como os vírus No decorrer das últimas décadas o desenvolvimento de fármacos eficientes no combate a infecções microbianas revolucionou o tratamento médico ocasionando a redução drástica da mortalidade causada por doenças microbianas Por outro lado a disseminação do uso de antibióticos lamentavelmente fez com que os microrganismos também desenvolvessem defesas relativas aos agentes com o consequente aparecimento de resistência SILVEIRA et al 2006 A resistência microbiana é um grave problema mundial estando associada ao aumento do tempo de internação dos custos do tratamento e das taxas de morbidade e mortalidade dos pacientes O uso indiscriminado e incorreto dos antimicrobianos na comunidade e no ambiente hospitalar é reconhecidamente um importante fator de risco para o aparecimento e a disseminação da resistência microbiana Nesse contexto inserese o Laboratório de Microbiologia que tem como objetivo não apenas apontar o responsável por um determinado estado infeccioso mas também indicar através do monitoramento de populações microbianas qual o perfil dos microrganismos que estão interagindo com o organismo humano possibilitando a indicação de tratamentos mais adequados BRASIL 2013 Esta atividade tem por objetivo conscientizar o acadêmico da área da saúde sobre a importância da logística da amostra dentro do laboratório de microbiologia clínica a importância do antibiograma e a liberação de um laudo através de casos clínicos e questões Referências BRASIL Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde Módulo 4 Procedimentos Laboratoriais da requisição do exame à análise microbiológica e laudo finalAgência Nacional de Vigilância Sanitária Brasília Anvisa 2013 Disponível em httpswwwsaudegogovbrimagesimagensmigradasuploadarquivos201702modulo 4procedimentoslaboratoriaisdarequisicaodoexameaanalisemicrobiologicaelaudofinalpdf Acesso em 20 de abril de 2023 SILVEIRA G P NOME F GESSER J C SÁ M M TERENZI H Estratégias utilizadas no combate a resistência bacteriana Química Nova Vol29 nº4 p844855 2006 2 Etapas e roteiro da atividade O resultado liberado pelo Setor de Microbiologia é consequência da qualidade da amostra recebida A coleta eou transporte inadequados podem ocasionar falhas no crescimento do microrganismo causador da infecção propiciando o desenvolvimento de microbiota normal ou 1 contaminantes induzindo a tratamentos inadequados A identificação correta do sítio de coleta possibilitará a análise adequada do crescimento microbiano na cultura 21 Com base no caso clínico abaixo responda as questões Paciente masculino 32 anos de idade dá entrada no hospital apresentando sintomas de infecção do trato urinário como dor ao urinar aumento da frequência urinária e dor na região lombar O paciente informa que já teve episódios semelhantes anteriormente e terminou um ciclo de antibiótico há 5 dias Foi coletada uma amostra de urina do paciente e enviada ao laboratório de microbiologia do hospital para análise O resultado da coloração de Gram da amostra mostrou a presença de bacilos Gram negativos Para identificação da bactéria foi realizado teste bioquímico utilizando os seguintes meios de cultura MacConkey ágar sangue e ágar cistinalactoseeletrolitosdeficientes CLED As analises bioquímicas indicaram que a bactéria isolada era da espécie Escherichia coli Para determinar a sensibilidade da E coli aos antibióticos foi realizado um antibiograma Os resultados mostraram que a bactéria era sensível aos seguintes antibióticos ceftriaxona amoxicilinaclavulanato e nitrofurantoína Com base nos resultados obtidos o paciente foi tratado com ceftriaxona por via intravenosa por 7 dias apresentando melhora significativa dos sintomas 22 Preencha a ficha abaixo utilizando os dados do caso clínico Hipótese Diagnóstica ITU complicada Dados clínicos descrever objetivamente os achados clínicos mais significativos lesões cutâneas ou de mucosas local e características do sítio de infecção etc Alteração do odor aspecto e cor da urina Provável origem do processo infeccioso X Comunitário Hospitalar Fez uso de antibiótico nos últimos 10 dias Quais Sim porém não foi especificado qual Para urocultura informar X Sintomático Assintomático Exames solicitados Exame a fresco X Coloração de Gram X Rotina bacteriológica Rotina para fungos Rotina para vírus Teste de sensibilidade solicitado X Disco difusão Microdiluição em caldo Concentração Inibitória Mínima Etest Justificativa do envio para exame microbiológico Suspeita de ITU complicada necessário antibiograma para definir tratamento Nome e identificação do profissional de saúde que colheu o material 2 23 Libere os laudos Microscopia cultura e antibiograma Microscopia presença de bacilos gram negativos na coloração de gram Cultura Em meio MacConkey colônias de aparencia seca e Lactose Em meio Ágar sangue colonias pequenas secas e com presença ou não de hemólise Em ágar CLED colônias médias de coloração amarela Antibiograma Ceftriaxona S Amoxicilinaclavulanato S Nitrofurantoína S 3 Caso Clínico Um paciente de 45 anos de idade do sexo masculino apresentouse em uma clínica com queixa de dor abdominal náuseas e diarreia há três dias O médico solicitou uma amostra de fezes para cultura e identificação de patógenos entéricos O material foi colhido e enviado para o laboratório de microbiologia clínica Foi realizada a coloração de Gram evidenciando a presença de bacilos Gramnegativos Para confirmar a presença de Escherichia coli na amostra foram realizados testes bioquímicos Um perfil de antibiograma foi realizado para determinar a sensibilidade do patógeno aos antibióticos Os resultados mostraram que a cepa de E coli isolada era sensível a ampicilina cefotaxima ciprofloxacina e trimetoprimsulfametoxazol Com base nesses resultados o médico prescreveu ciprofloxacina para tratar a infecção do paciente Baseado no caso clínico é necessário a prescrição do antibiótico para o paciente Justifique sua resposta É necessário prescrever o antibiótico para o paciente pois se trata de uma infecção bacteriana que foi confirmado através da coloração de gram e dos testes bioquímicos A conduta do médico foi correta prescrevendo um antibiótico no qual a bactéria causadora da infecção se mostrou sensível 4 Os fungos como causadores de infecção Caso clínico Paciente do sexo feminino de 30 anos apresentase na consulta ginecológica com queixa de coceira e ardência vulvovaginal além de corrimento branco e espesso A paciente informa que apresenta esses sintomas há uma semana É realizada a coleta de secreção vaginal e enviada ao laboratório de microbiologia No laboratório é realizado o exame microscópico do material 3 coletado e identificada a presença de leveduras e filamentos miceliais É realizada a coloração de Gram na qual é observado a presença de células arredondadas Grampositivas compatíveis com Candida albicans Para confirmação da identificação da levedura são realizados testes bioquímicos como o teste de formação de tubo germinativo e teste de assimilação de açúcares Todos os resultados são compatíveis com Candida albicans Não é necessário realizar antibiograma para essa levedura uma vez que ela é naturalmente sensível aos antifúngicos mais comuns utilizados para o tratamento de candidíase vulvovaginal como o fluconazol e o clotrimazol Com base nos resultados é prescrito à paciente o tratamento com fluconazol por via oral ou clotrimazol tópico conforme orientação médica além de orientações quanto ao uso correto de antifúngicos e medidas para prevenção de candidíase vulvovaginal como evitar roupas apertadas manter a higiene íntima adequada e evitar o uso excessivo de produtos de higiene íntima 41 Analisando o caso clínico a sequência de identificação e a conduta do profissional responsável pelo diagnóstico estão corretas Justificar A sequência está correta o exame microbiológico deve iniciar pelo exame a fresco e coloração de gram para depois prosseguir para o teste do tubo germinativo Como a cultura de fungos demora para crescer é necessário que já seja iniciado o tratamento com antifúngicos aos quais o microrganismo seja empiricamente sensível O ponto de atenção é que algumas cepas de Candida albicans já são resistentes ao fluconazol então se o quadro de candidiase persistir é ideal que se faça um antifungigrama para determinação da sensiilidade do fungo aos antifúngicos disponíveis no mercado 42 Libere o laudo final Presença de leveduras e filamentos miceliais no exame direto compatível com Candida spp Presença de leveduras na microscopia da coloração de gram compatível com Candida spp Teste de tubo germinativo positivo compatível com Candida albicans 4

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médico ocasionando a redução drástica da mortalidade causada por doenças microbianas Por outro lado a disseminação do uso de antibióticos lamentavelmente fez com que os microrganismos também desenvolvessem defesas relativas aos agentes com o consequente aparecimento de resistência SILVEIRA et al 2006 A resistência microbiana é um grave problema mundial estando associada ao aumento do tempo de internação dos custos do tratamento e das taxas de morbidade e mortalidade dos pacientes O uso indiscriminado e incorreto dos antimicrobianos na comunidade e no ambiente hospitalar é reconhecidamente um importante fator de risco para o aparecimento e a disseminação da resistência microbiana Nesse contexto inserese o Laboratório de Microbiologia que tem como objetivo não apenas apontar o responsável por um determinado estado infeccioso mas também indicar através do monitoramento de populações microbianas qual o perfil dos microrganismos que estão interagindo com o organismo humano possibilitando a indicação de tratamentos mais adequados BRASIL 2013 Esta atividade tem por objetivo conscientizar o acadêmico da área da saúde sobre a importância da logística da amostra dentro do laboratório de microbiologia clínica a importância do antibiograma e a liberação de um laudo através de casos clínicos e questões Referências BRASIL Agência Nacional de Vigilância Sanitária Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção Relacionada à Assistência à Saúde Módulo 4 Procedimentos Laboratoriais da requisição do exame à análise microbiológica e laudo finalAgência Nacional de Vigilância Sanitária Brasília Anvisa 2013 Disponível em httpswwwsaudegogovbrimagesimagensmigradasuploadarquivos201702modulo 4procedimentoslaboratoriaisdarequisicaodoexameaanalisemicrobiologicaelaudofinalpdf Acesso em 20 de abril de 2023 SILVEIRA G P NOME F GESSER J C SÁ M M TERENZI H Estratégias utilizadas no combate a resistência bacteriana Química Nova Vol29 nº4 p844855 2006 2 Etapas e roteiro da atividade O resultado liberado pelo Setor de Microbiologia é consequência da qualidade da amostra recebida A coleta eou transporte inadequados podem ocasionar falhas no crescimento do microrganismo causador da infecção propiciando o desenvolvimento de microbiota normal ou 1 contaminantes induzindo a tratamentos inadequados A identificação correta do sítio de coleta possibilitará a análise adequada do crescimento microbiano na cultura 21 Com base no caso clínico abaixo responda as questões Paciente masculino 32 anos de idade dá entrada no hospital apresentando sintomas de infecção do trato urinário como dor ao urinar aumento da frequência urinária e dor na região lombar O paciente informa que já teve episódios semelhantes anteriormente e terminou um ciclo de antibiótico há 5 dias Foi coletada uma amostra de urina do paciente e enviada ao laboratório de microbiologia do hospital para análise O resultado da coloração de Gram da amostra mostrou a presença de bacilos Gram negativos Para identificação da bactéria foi realizado teste bioquímico utilizando os seguintes meios de cultura MacConkey ágar sangue e ágar cistinalactoseeletrolitosdeficientes CLED As analises bioquímicas indicaram que a bactéria isolada era da espécie Escherichia coli Para determinar a sensibilidade da E coli aos antibióticos foi realizado um antibiograma Os resultados mostraram que a bactéria era sensível aos seguintes antibióticos ceftriaxona amoxicilinaclavulanato e nitrofurantoína Com base nos resultados obtidos o paciente foi tratado com ceftriaxona por via intravenosa por 7 dias apresentando melhora significativa dos sintomas 22 Preencha a ficha abaixo utilizando os dados do caso clínico Hipótese Diagnóstica ITU complicada Dados clínicos descrever objetivamente os achados clínicos mais significativos lesões cutâneas ou de mucosas local e características do sítio de infecção etc Alteração do odor aspecto e cor da urina Provável origem do processo infeccioso X Comunitário Hospitalar Fez uso de antibiótico nos últimos 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bioquímicos A conduta do médico foi correta prescrevendo um antibiótico no qual a bactéria causadora da infecção se mostrou sensível 4 Os fungos como causadores de infecção Caso clínico Paciente do sexo feminino de 30 anos apresentase na consulta ginecológica com queixa de coceira e ardência vulvovaginal além de corrimento branco e espesso A paciente informa que apresenta esses sintomas há uma semana É realizada a coleta de secreção vaginal e enviada ao laboratório de microbiologia No laboratório é realizado o exame microscópico do material 3 coletado e identificada a presença de leveduras e filamentos miceliais É realizada a coloração de Gram na qual é observado a presença de células arredondadas Grampositivas compatíveis com Candida albicans Para confirmação da identificação da levedura são realizados testes bioquímicos como o teste de formação de tubo germinativo e teste de assimilação de açúcares Todos os resultados são compatíveis com Candida albicans Não é necessário realizar antibiograma para essa levedura uma vez que ela é naturalmente sensível aos antifúngicos mais comuns utilizados para o tratamento de candidíase vulvovaginal como o fluconazol e o clotrimazol Com base nos resultados é prescrito à paciente o tratamento com fluconazol por via oral ou clotrimazol tópico conforme orientação médica além de orientações quanto ao uso correto de antifúngicos e medidas para prevenção de candidíase vulvovaginal como evitar roupas apertadas manter a higiene íntima adequada e evitar o uso excessivo de produtos de higiene íntima 41 Analisando o caso clínico a sequência de identificação e a conduta do profissional responsável pelo diagnóstico estão corretas Justificar A sequência está correta o exame microbiológico deve iniciar pelo exame a fresco e coloração de gram para depois prosseguir para o teste do tubo germinativo Como a cultura de fungos demora para crescer é necessário que já seja iniciado o tratamento com antifúngicos aos quais o microrganismo seja empiricamente sensível O ponto de atenção é que algumas cepas de Candida albicans já são resistentes ao fluconazol então se o quadro de candidiase persistir é ideal que se faça um antifungigrama para determinação da sensiilidade do fungo aos antifúngicos disponíveis no mercado 42 Libere o laudo final Presença de leveduras e filamentos miceliais no exame direto compatível com Candida spp Presença de leveduras na microscopia da coloração de gram compatível com Candida spp Teste de tubo germinativo positivo compatível com Candida albicans 4

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