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AVALIAÇÃO DO PRODUTO BlueN DA CORTEVA NA FIXAÇÃO DE NITROGÊNIO EM SOLO AUTOCLAVADO SEM Bradyrhizobium Introdução A fixação biológica de nitrogênio FBN é um processo fundamental para a sustentabilidade da agricultura pois reduz a dependência de fertilizantes nitrogenados sintéticos que possuem alto custo econômico e impactos ambientais negativos O uso intensivo desses fertilizantes está associado à emissão de gases de efeito estufa como o óxido nitroso N2O e à contaminação do solo e dos recursos hídricos Hungria Vargas 2000 EMBRAPA 2022 Nesse contexto bioinoculantes têm ganhado relevância como soluções sustentáveis para o fornecimento de nitrogênio destacandose o BlueN desenvolvido pela Corteva Agriscience O BlueN é um biofertilizante foliar composto pela estirpe exclusiva Methylobacterium symbioticum SB23 uma bactéria que coloniza a filosfera das plantas e promove a fixação de nitrogênio atmosférico Cortava 2024 A presente pesquisa avalia a eficácia do BlueN na fixação biológica de nitrogênio em condições controladas utilizando solo autoclavado sem Bradyrhizobium permitindo a análise isolada da sua ação Justificativa A seleção de um solo autoclavado permite a eliminação da microbiota nativa garantindo que os efeitos observados sejam exclusivamente atribuídos ao Methylobacterium symbioticum SB23 presente no BlueN Este estudo busca responder se o produto é capaz de atuar de forma independente na fixação de nitrogênio sem a presença de Bradyrhizobium tradicionalmente necessário para leguminosas Moreira Siqueira 2006 Além disso o uso de bioinoculantes como o BlueN pode representar uma estratégia para melhorar a fertilidade dos solos e reduzir a dependência de fertilizantes sintéticos contribuindo para sistemas agrícolas mais resilientes e sustentáveis no Brasil EMBRAPA 2022 Objetivos Objetivo Geral Avaliar a capacidade do produto BlueN em fixar nitrogênio atmosférico em condições de solo autoclavado sem Bradyrhizobium Objetivos Específicos Verificar a colonização da filósfera pelo Methylobacterium symbioticum SB23 Analisar a absorção de nitrogênio pelas plantas ao longo do ciclo Comparar o crescimento e desenvolvimento das plantas tratadas com BlueN com um controle sem aplicação Avaliar a influência de fatores ambientais controlados na eficácia do bioinoculante Referencial Teórico A fixação biológica de nitrogênio é um processo desempenhado por microrganismos que convertem o nitrogênio atmosférico N2 em formas assimiláveis pelas plantas como amônia e nitrato Os Bradyrhizobium são amplamente estudados por sua relação simbótica com leguminosas Hungria Vargas 2000 mas o Methylobacterium symbioticum SB23 presente no BlueN atua de forma diferente colonizando a filósfera e promovendo a fixação diretamente nas folhas Corteva 2024 A aplicação do BlueN é realizada via foliar devendo ocorrer durante o crescimento ativo da planta sob temperaturas entre 10 e 30C para maximizar a penetração da bactéria nos tecidos vegetais O pH da calda deve ser mantido entre 5 e 8 evitando interferências na viabilidade do microrganismo Corteva 2024 Estudos apontam que a inoculação biológica pode reduzir em até 30 a necessidade de fertilizantes nitrogenados trazendo benefícios ambientais e econômicos Santos Oliveira 2021 Dessa forma avaliar a eficácia do BlueN é essencial para validar seu uso como estratégia de manejo sustentável Metodologia O presente experimento será conduzido em ambiente controlado garantindo condições homogêneas para minimizar a influência de variáveis externas como variações climáticas ação de microrganismos ambientais e disponibilidade irregular de nutrientes Esse controle rigoroso é essencial para a obtenção de resultados fidedignos e cientificamente válidos permitindo avaliar com precisão a eficácia do produto biológico BlueN na fixação biológica de nitrogênio e seus efeitos sobre o crescimento e nutrição da cultura estudada Para garantir um meio de cultivo livre de interferências microbiológicas que possam comprometer os resultados o solo a ser utilizado será previamente autoclavado a altas temperaturas e sob pressão controlada Esse processo de esterilização é indispensável pois elimina microrganismos nativos que poderiam competir com a bactéria presente no BlueN ou influenciar a dinâmica do nitrogênio no solo comprometendo a análise dos efeitos exclusivos do produto testado Além disso a autoclavagem assegura que os nutrientes disponíveis sejam controlados permitindo um acompanhamento mais preciso da absorção de nitrogênio pela cultura O experimento será realizado utilizando bandejas padronizadas preenchidas com o solo autoclavado Essas bandejas serão organizadas em um delineamento experimental estatisticamente robusto possibilitando análises comparativas confiáveis entre os tratamentos Para a escolha da cultura a ser avaliada serão consideradas plantas de alta relevância agrícola e econômica como milho Zea mays L ou soja Glycine max L ambas amplamente cultivadas em sistemas produtivos que demandam elevada disponibilidade de nitrogênio para maximizar a produtividade A semeadura das sementes será realizada de maneira padronizada utilizando sementes certificadas e previamente tratadas para garantir uniformidade na germinação e emergência das plântulas Essa etapa é fundamental para evitar discrepâncias no desenvolvimento inicial da cultura que poderiam afetar a interpretação dos resultados do experimento As sementes serão distribuídas de maneira equidistante nas bandejas respeitando espaçamentos adequados para evitar competição por recursos A aplicação do produto biológico BlueN será realizada por meio de pulverização foliar seguindo estritamente as recomendações do fabricante quanto à dose volume de calda e estádio fenológico ideal para aplicação A pulverização será realizada utilizando um pulverizador de precisão garantindo uma distribuição homogênea do produto nas folhas e evitando desperdícios ou variações na dosagem aplicada Esse método de aplicação é de extrema relevância pois a absorção do BlueN pelas folhas e sua posterior fixação biológica de nitrogênio ocorrem de maneira direta sem depender da atividade microbiológica do solo Para avaliar a eficiência da colonização bacteriana e os impactos do BlueN na nutrição das plantas serão realizadas coletas semanais de amostras de solo tecido vegetal e raízes A coleta das amostras será conduzida com extremo rigor metodológico para evitar contaminações cruzadas e garantir a confiabilidade das análises As amostras serão submetidas a diferentes procedimentos laboratoriais conforme descrito a seguir Análise da colonização bacteriana Será realizada por meio de técnicas microbiológicas e moleculares A presença e multiplicação da bactéria do BlueN nas folhas e raízes serão avaliadas por meio de cultivo em meios seletivos específicos bem como pela extração de DNA e quantificação via PCR quantitativo qPCR Essa abordagem molecular permitirá detectar e quantificar com alta precisão a população bacteriana presente nas plantas tratadas confirmando sua viabilidade e capacidade de estabelecerse nos tecidos vegetais Determinação dos teores de nitrogênio na planta e no solo A avaliação do impacto do BlueN sobre a nutrição nitrogenada da cultura será realizada por meio de análises químicas padronizadas Os teores de nitrogênio total nas folhas e raízes serão determinados pelo método de Kjeldahl uma técnica amplamente utilizada para quantificação desse nutriente em materiais vegetais Além disso o nitrogênio inorgânico disponível no solo será avaliado por espectrofotometria permitindo identificar possíveis alterações na dinâmica desse elemento devido à fixação biológica promovida pelo produto Análises morfofisiológicas da planta Para complementar as análises químicas serão realizadas medições de parâmetros agronômicos essenciais como altura das plantas diâmetro do caule número de folhas área foliar e biomassa seca Essas variáveis permitirão avaliar de forma integrada o efeito do BlueN sobre o crescimento e o desenvolvimento da cultura ao longo do ciclo experimental Os resultados obtidos nas diferentes análises serão comparados a um grupo controle composto por plantas cultivadas sob as mesmas condições mas sem a aplicação do BlueN Essa comparação direta entre os tratamentos permitirá uma avaliação precisa do impacto do produto na eficiência de absorção de nitrogênio e no desenvolvimento da cultura A interpretação estatística dos dados será conduzida com base em testes de significância apropriados Inicialmente os dados serão submetidos à análise de normalidade e homogeneidade de variâncias para determinar a escolha do teste estatístico mais adequado Caso os pressupostos paramétricos sejam atendidos será realizada análise de variância ANOVA seguida pelo teste de comparações múltiplas de Tukey a um nível de significância de 5 p 005 Para dados que não atendam aos pressupostos paramétricos serão empregados testes não paramétricos como o teste de KruskalWallis garantindo maior confiabilidade na interpretação dos resultados Além das análises diretas do crescimento e nutrição das plantas também será realizado um monitoramento contínuo das condições ambientais do experimento incluindo temperatura umidade relativa do ar e intensidade luminosa Esses fatores podem influenciar a absorção de nitrogênio e a atividade microbiana sendo fundamental seu controle para garantir a reprodutibilidade dos resultados Dessa forma a presente metodologia foi estruturada para fornecer uma avaliação detalhada e rigorosa da eficiência do BlueN na fixação biológica de nitrogênio contribuindo para um melhor entendimento sobre seu potencial como ferramenta biotecnológica para otimizar a nutrição nitrogenada de culturas agrícolas de importância global Resultados e Discussões Esperase que o produto biológico BlueN demonstre uma capacidade significativa de fixação biológica de nitrogênio FBN mesmo na ausência de bactérias simbióticas do gênero Bradyrhizobium tradicionalmente associadas à fixação de nitrogênio em leguminosas Isso reforçaria sua eficácia como uma alternativa viável para a melhoria da disponibilidade de nitrogênio nas plantas reduzindo a dependência da adubação nitrogenada convencional e promovendo um manejo agrícola mais sustentável e economicamente eficiente Caso os resultados confirmem essa expectativa o BlueN poderá ser considerado uma ferramenta promissora para o aumento da produtividade agrícola sem os impactos ambientais negativos associados ao uso excessivo de fertilizantes sintéticos Além disso esperase que a aplicação do BlueN resulte em efeitos positivos no crescimento e desenvolvimento vegetal refletindose em parâmetros agronômicos como maior biomassa seca maior altura de plantas incremento no diâmetro do caule e aumento na área foliar Esses fatores são indicativos de uma nutrição nitrogenada mais eficiente uma vez que o nitrogênio desempenha papel essencial na síntese de proteínas enzimas e clorofila sendo um dos principais elementos limitantes do crescimento vegetal Estudos prévios como o de Santos Oliveira 2021 já apontaram que a suplementação com fixadores biológicos de nitrogênio pode melhorar a eficiência no uso desse nutriente favorecendo processos metabólicos essenciais para o desenvolvimento das culturas agrícolas Outro resultado esperado é uma melhoria na eficiência fotossintética das plantas tratadas com BlueN O nitrogênio é um componente fundamental da clorofila a molécula responsável pela absorção de luz no processo fotossintético Dessa forma plantas que recebem maior aporte de nitrogênio apresentam em geral uma taxa fotossintética mais elevada o que pode resultar em maior acúmulo de biomassa e maior produtividade final A confirmação desse efeito no presente estudo reforçaria a importância do BlueN como uma ferramenta biotecnológica voltada para a otimização da eficiência do uso de nitrogênio em sistemas agrícolas A discussão dos resultados considerará diversos fatores ambientais e edáficos que podem influenciar a eficiência da fixação biológica de nitrogênio e a absorção desse nutriente pelas plantas Elementos como temperatura disponibilidade hídrica e pH do solo serão cuidadosamente analisados pois são variáveis que afetam diretamente a atividade microbiana e a assimilação de nitrogênio pelas plantas Temperatura A atividade das bactérias fixadoras de nitrogênio é influenciada pela temperatura do ambiente Altas temperaturas podem aumentar a taxa metabólica da bactéria presente no BlueN mas em contrapartida temperaturas extremas podem comprometer sua viabilidade e eficiência Portanto a temperatura do ambiente durante o experimento será considerada na interpretação dos resultados Disponibilidade hídrica A fixação biológica de nitrogênio e a absorção desse nutriente pelas plantas dependem diretamente da disponibilidade de água no solo A falta de umidade pode reduzir a eficiência dos processos bioquímicos envolvidos na fixação e no transporte de nitrogênio enquanto um excesso de água pode levar à lixiviação do nutriente Assim os resultados obtidos serão analisados levando em conta a umidade do substrato durante o experimento pH do solo O pH do solo influencia a solubilidade e a disponibilidade dos nutrientes para as plantas Solos excessivamente ácidos ou alcalinos podem afetar a atividade microbiana e a absorção de nitrogênio A literatura científica indica que a fixação biológica de nitrogênio é mais eficiente em faixas de pH próximas da neutralidade Portanto qualquer variação significativa nesse parâmetro será levada em consideração na análise dos dados obtidos Os resultados deste estudo serão comparados com aqueles já descritos na literatura científica nacional e internacional Serão analisadas pesquisas anteriores que avaliaram o impacto de biofertilizantes e fixadores biológicos de nitrogênio em diferentes culturas agrícolas permitindo situar os achados experimentais dentro do conhecimento já consolidado na área A comparação dos dados obtidos com estudos prévios ajudará a identificar potenciais vantagens e limitações do BlueN em relação a outras estratégias de manejo da fertilização nitrogenada Por fim esperase que este estudo contribua para um melhor entendimento sobre o papel do BlueN na fixação biológica de nitrogênio e seus efeitos sobre o desenvolvimento vegetal Caso os resultados sejam positivos poderão subsidiar recomendações técnicas para o uso do produto em diferentes contextos agrícolas fomentando práticas mais sustentáveis de manejo da fertilização nitrogenada e reduzindo a dependência de insumos químicos em larga escala Conclusão Este estudo desempenha um papel fundamental na validação do BlueN como uma ferramenta biotecnológica inovadora para a fixação biológica de nitrogênio FBN contribuindo para a redução da dependência de fertilizantes sintéticos e promovendo um manejo agrícola mais sustentável Ao avaliar a eficiência do produto na absorção e assimilação de nitrogênio pelas plantas esperase fornecer subsídios científicos que embasem sua adoção em larga escala beneficiando produtores e reduzindo impactos ambientais associados ao uso excessivo de insumos químicos Além disso os resultados obtidos poderão ampliar o conhecimento sobre os mecanismos de ação do BlueN identificando suas vantagens e limitações em diferentes condições edafoclimáticas A validação do produto em condições controladas possibilitará um melhor entendimento de seu potencial de aplicação em sistemas agrícolas brasileiros contribuindo para a construção de estratégias mais eficientes de manejo da fertilização nitrogenada Dessa forma este estudo poderá servir como base para futuras pesquisas e recomendações técnicas incentivando práticas agrícolas que conciliem alta produtividade com sustentabilidade auxiliando na transição para modelos de produção mais eficientes e ambientalmente responsáveis no Brasil Referências Corteva Agriscience 2024 Rótulo do Produto BlueN Disponível em wwwcortevapt EMBRAPA 2022 Fixadores biológicos de nitrogênio avanços e desafios na agricultura brasileira Hungria M Vargas M A T 2000 Enriquecimento biológico do solo com microrganismos benéficos Rev Bras Ciência do Solo 244 905915 Moreira F M S Siqueira J O 2006 Microbiologia e Bioquímica do Solo Lavras Editora UFLA Santos M A Oliveira J R 2021 Inoculação biológica e produtividade agrícola Rev Agric Sustentável 182 123134

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nitrogênio em condições controladas utilizando solo autoclavado sem Bradyrhizobium permitindo a análise isolada da sua ação Justificativa A seleção de um solo autoclavado permite a eliminação da microbiota nativa garantindo que os efeitos observados sejam exclusivamente atribuídos ao Methylobacterium symbioticum SB23 presente no BlueN Este estudo busca responder se o produto é capaz de atuar de forma independente na fixação de nitrogênio sem a presença de Bradyrhizobium tradicionalmente necessário para leguminosas Moreira Siqueira 2006 Além disso o uso de bioinoculantes como o BlueN pode representar uma estratégia para melhorar a fertilidade dos solos e reduzir a dependência de fertilizantes sintéticos contribuindo para sistemas agrícolas mais resilientes e sustentáveis no Brasil EMBRAPA 2022 Objetivos Objetivo Geral Avaliar a capacidade do produto BlueN em fixar nitrogênio atmosférico em condições de solo autoclavado sem Bradyrhizobium Objetivos Específicos Verificar a colonização da filósfera pelo Methylobacterium symbioticum SB23 Analisar a absorção de nitrogênio pelas plantas ao longo do ciclo Comparar o crescimento e desenvolvimento das plantas tratadas com BlueN com um controle sem aplicação Avaliar a influência de fatores ambientais controlados na eficácia do bioinoculante Referencial Teórico A fixação biológica de nitrogênio é um processo desempenhado por microrganismos que convertem o nitrogênio atmosférico N2 em formas assimiláveis pelas plantas como amônia e nitrato Os Bradyrhizobium são amplamente estudados por sua relação simbótica com leguminosas Hungria Vargas 2000 mas o Methylobacterium symbioticum SB23 presente no BlueN atua de forma diferente colonizando a filósfera e promovendo a fixação diretamente nas folhas Corteva 2024 A aplicação do BlueN é realizada via foliar devendo ocorrer durante o crescimento ativo da planta sob temperaturas entre 10 e 30C para maximizar a penetração da bactéria nos tecidos vegetais O pH da calda deve ser mantido entre 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o solo a ser utilizado será previamente autoclavado a altas temperaturas e sob pressão controlada Esse processo de esterilização é indispensável pois elimina microrganismos nativos que poderiam competir com a bactéria presente no BlueN ou influenciar a dinâmica do nitrogênio no solo comprometendo a análise dos efeitos exclusivos do produto testado Além disso a autoclavagem assegura que os nutrientes disponíveis sejam controlados permitindo um acompanhamento mais preciso da absorção de nitrogênio pela cultura O experimento será realizado utilizando bandejas padronizadas preenchidas com o solo autoclavado Essas bandejas serão organizadas em um delineamento experimental estatisticamente robusto possibilitando análises comparativas confiáveis entre os tratamentos Para a escolha da cultura a ser avaliada serão consideradas plantas de alta relevância agrícola e econômica como milho Zea mays L ou soja Glycine max L ambas amplamente cultivadas em sistemas produtivos que demandam elevada 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absorção do BlueN pelas folhas e sua posterior fixação biológica de nitrogênio ocorrem de maneira direta sem depender da atividade microbiológica do solo Para avaliar a eficiência da colonização bacteriana e os impactos do BlueN na nutrição das plantas serão realizadas coletas semanais de amostras de solo tecido vegetal e raízes A coleta das amostras será conduzida com extremo rigor metodológico para evitar contaminações cruzadas e garantir a confiabilidade das análises As amostras serão submetidas a diferentes procedimentos laboratoriais conforme descrito a seguir Análise da colonização bacteriana Será realizada por meio de técnicas microbiológicas e moleculares A presença e multiplicação da bactéria do BlueN nas folhas e raízes serão avaliadas por meio de cultivo em meios seletivos específicos bem como pela extração de DNA e quantificação via PCR quantitativo qPCR Essa abordagem molecular permitirá detectar e quantificar com alta precisão a população bacteriana presente nas plantas tratadas confirmando sua viabilidade e capacidade de estabelecerse nos tecidos vegetais Determinação dos teores de nitrogênio na planta e no solo A avaliação do impacto do BlueN sobre a nutrição nitrogenada da cultura será realizada por meio de análises químicas padronizadas Os teores de nitrogênio total nas folhas e raízes serão determinados pelo método de Kjeldahl uma técnica amplamente utilizada para quantificação desse nutriente em materiais vegetais Além disso o nitrogênio inorgânico disponível no solo será avaliado por espectrofotometria permitindo identificar possíveis alterações na dinâmica desse elemento devido à fixação biológica promovida pelo produto Análises morfofisiológicas da planta Para complementar as análises químicas serão realizadas medições de parâmetros agronômicos essenciais como altura das plantas diâmetro do caule número de folhas área foliar e biomassa seca Essas variáveis permitirão avaliar de forma integrada o efeito do BlueN sobre o crescimento e o desenvolvimento da cultura ao longo do ciclo experimental Os resultados obtidos nas diferentes análises serão comparados a um grupo controle composto por plantas cultivadas sob as mesmas condições mas sem a aplicação do BlueN Essa comparação direta entre os tratamentos permitirá uma avaliação precisa do impacto do produto na eficiência de absorção de nitrogênio e no desenvolvimento da cultura A interpretação estatística dos dados será conduzida com base em testes de significância apropriados Inicialmente os dados serão submetidos à análise de normalidade e homogeneidade de variâncias para determinar a escolha do teste estatístico mais adequado Caso os pressupostos paramétricos sejam atendidos será realizada análise de variância ANOVA seguida pelo teste de comparações múltiplas de Tukey a um nível de significância de 5 p 005 Para dados que não atendam aos pressupostos paramétricos serão empregados testes não paramétricos como o teste de KruskalWallis garantindo maior confiabilidade na interpretação dos resultados Além das análises diretas do crescimento e nutrição das plantas também será realizado um monitoramento contínuo das condições ambientais do experimento incluindo temperatura umidade relativa do ar e intensidade luminosa Esses fatores podem influenciar a absorção de nitrogênio e a atividade microbiana sendo fundamental seu controle para garantir a reprodutibilidade dos resultados Dessa forma a presente metodologia foi estruturada para fornecer uma avaliação detalhada e rigorosa da eficiência do BlueN na fixação biológica de nitrogênio contribuindo para um melhor entendimento sobre seu potencial como ferramenta biotecnológica para otimizar a nutrição nitrogenada de culturas agrícolas de importância global Resultados e Discussões Esperase que o produto biológico BlueN demonstre uma capacidade significativa de fixação biológica de nitrogênio FBN mesmo na ausência de bactérias simbióticas do gênero Bradyrhizobium tradicionalmente associadas à fixação de 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adoção em larga escala beneficiando produtores e reduzindo impactos ambientais associados ao uso excessivo de insumos químicos Além disso os resultados obtidos poderão ampliar o conhecimento sobre os mecanismos de ação do BlueN identificando suas vantagens e limitações em diferentes condições edafoclimáticas A validação do produto em condições controladas possibilitará um melhor entendimento de seu potencial de aplicação em sistemas agrícolas brasileiros contribuindo para a construção de estratégias mais eficientes de manejo da fertilização nitrogenada Dessa forma este estudo poderá servir como base para futuras pesquisas e recomendações técnicas incentivando práticas agrícolas que conciliem alta produtividade com sustentabilidade auxiliando na transição para modelos de produção mais eficientes e ambientalmente responsáveis no Brasil Referências Corteva Agriscience 2024 Rótulo do Produto BlueN Disponível em wwwcortevapt EMBRAPA 2022 Fixadores biológicos de nitrogênio avanços e desafios 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