Relatório de Antibiograma Pseudomonas aeruginosa - Análise de Sensibilidade a Antibióticos

Relatório antibiograma Normas ABNT Resultados e discussão pode ser adicionados juntos não precisa colocar materiais preciso de objetivo geral e específico Descrição do protocolo realizado em aula Por imersão pegar a bactéria pseudomonas dita propriamente pelo professor e preparada possivelmente pela técnica do laboratório previamente inoculada e os poucos realizar um novo inoculo em meio de cultura TBS a bactéria estava em meio líquido até que ela fique com turbidez similar ao tubo 05 de escala de mac farland Após o preparo da amostra com o auxílio do swab realizar a semeadura na placa de muller hinton solida de maneira homogenia em toda a placa mergulhamos somente uma vez o swab e deixamos 10 seg para absorver bactérias o suficiente com uma pinca adicionamos o disco com diversos antibióticos na placa e inoculamos a 37 º C por 18 hrs Após a inoculação avaliamos uma placa que estava já preparada pela técnica do laboratório avaliamos a resistência e sensibilidade com o auxílio de uma régua HN TSB TSB escala Ma rland 05 9062017 DME Lab Micro UMC DIAGNÓSTICOS MICROBIOLÓGICOS ESPECIALIZADOS POLISENSIDISC 15 APRESENTAÇÃO Caixa contendo 25 unidades de Polisensidisc cada unidade composta de 15 antimicrobianos específicos para cada série PRINCIPIO Sistema Polisensidisc composto de um modulo circular contendo em seu anel externo 10 antimicrobianos e anel interno 05 antimicrobianos totalizando 15 antimicrobianos para cada série POLISENSIDISC DME SÉRIE GRAM NEGATIVO Halos de inibição em mm Antibacteriano Potência Código Resistente Intermediário Sensivel Amicacina AMI 30 14 1516 17 AmoxicilinaAcido Clavulânico AMC 30 13 1417 18 Ampicilina AMP 10 13 1416 17 Aztreonam ATM 30 17 1820 21 Cefazolina parenteral para Enterobacteriaceae CFZ 30 19 2022 23 Cefazolina oral para Enterobacteriaceae 14 15 Cefepime CPM 30 18 25 Cefoxitina CFO 30 14 1517 18 Cefotaxima CAZ 30 17 1820 21 Ceftriaxona CRO 30 19 2022 23 CIP 05 15 1620 21 Ciprofloxacina Para Enterobacteriaceae 20 2130 31 Para Salmonella spp extraintestinal incluindo S typb e S paratyphi AC Cloranfenicol CLO 30 12 1317 18 Gentamicina GEN 10 12 1314 15 Meropenem para Enterobacteriaceae MPM 10 19 2022 23 Meropenem para Pseudomonas aeruginosa 15 1618 19 Meropenem para Acinetobacter spp 14 1517 18 Meropenem para Burkholderia cepacia 15 1619 20 Sulfazotrim SUT 25 10 1115 16 Tetraciclina TET 30 11 1214 15 Cefepime 30 μg CPM 30 SDD Dose Dependente Susceptível 19 mm 24 mm CONSERVAÇÃO Manter ao abrigo da luz conservar de 15ºC a 20ºC Obs Os mídias deverão ser abertos no momento do uso TRANSPORTE A embalagem do Polisensidisc permanece intacta por até 10 dias em temperatura de até 37ºC Lote e Validade Vide caixa Referências Bibliograficas Referencias CLSI 2017 Av Antonio Cavasana 3 D Unicurubau CEP 16013385 AraçatubaSP Telefax 18 36218670 36218836 comercialdmeindbr wwwdmeindbr CNPJ 65013120000179 Resp Técnico Antonio C De Fendi CRBM 1005 Registro MS 10401600019 scala Ma rland 05 906201 TSB FERNANDA JOYCE SOLANGE AB HW AMC 30 CHL 30 OBT 30 CIP 30 FST 30 NI 30 ATM 30 CLO 50 DR 30 CAZ 30 CAZ 30 W 30 SR 30 FOX 30 NOV 30 NOV 15 T Content of test tubes and petri dish FACULDADE PÓSGRADUAÇÃO EM NOME RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA ANTIBIOGRAMA CIDADE 2023 2 SUMÁRIO 1 INTRODUÇÃO3 2 JUSTIFICATIVA5 3 OBJETIVOS GERAIS E ESPECÍFICOS5 31 Objetivo Geral5 32 Objetivos Específicos5 4 MATERIAIS E MÉTODOS6 5 RESULTADOS7 6 DISCUSSÃO7 7 CONCLUSÃO8 8 LISTA DE FIGURAS10 9 REFERÊNCIAS13 2 3 1 INTRODUÇÃO A resistência bacteriana aos antibióticos é uma problemática emergente que desafia a medicina contemporânea influenciando tanto o tratamento de doenças infecciosas como a saúde pública em sua totalidade MACEDO CANUTO DUARTE 2018 A bactéria Pseudomonas aeruginosa é emblemática desse desafio pois é notoriamente capaz de desenvolver resistência a múltiplos antibióticos PAZZARZA et al 2019 A detecção eficaz e o monitoramento constante da resistência bacteriana são cruciais para a eleição do tratamento antibiótico mais apropriado e para a prevenção da disseminação da resistência A metodologia do antibiograma é um instrumento amplamente empregado para avaliar a sensibilidade de bactérias frente a uma diversidade de antibióticos MACEDO CANUTO DUARTE 2018 Tal técnica envolve o cultivo da bactéria em um meio apropriado e a aplicação de discos impregnados com diferentes antibióticos A observação das zonas de inibição em torno de cada disco após a incubação provê uma indicação precisa da susceptibilidade da bactéria aos respectivos antibióticos O teste de antibiograma é um recurso indispensável para laboratórios de microbiologia clínica visto que gera informações fundamentais para a condução terapêutica e estudos epidemiológicos Dados obtidos através do antibiograma podem orientar políticas de saúde pública e protocolos terapêuticos contribuindo para uma resposta mais eficaz ao desafio global da resistência antimicrobiana Os antibióticos desempenham um papel crucial no tratamento de infecções bacterianas contudo o uso imprudente desses fármacos pode acarretar na seleção de bactérias resistentes fenômeno conhecido como resistência antimicrobiana ARBAB et al 2023 A resistência mediada por β lactamase por exemplo é uma forma comum de resistência antimicrobiana 3 4 observada em Pseudomonas aeruginosa e em outras bactérias MORTARI et al 2008 A Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria Gramnegativa amplamente encontrada no meio ambiente e capaz de colonizar o trato humano especialmente em indivíduos com sistema imunológico debilitado PAZZARZA et al 2019 Esta bactéria pode causar uma variedade de infecções que vão desde infecções do trato urinário e pneumonia até infecções de feridas A resistência da Pseudomonas aeruginosa a antibióticos é um motivo de preocupação crescente principalmente devido à sua capacidade de desenvolver resistência a diversos medicamentos MELLO 2014 Isso torna o tratamento de infecções causadas por Pseudomonas aeruginosa um desafio cada vez maior realçando a importância de monitoramento constante da resistência aos antibióticos A resistência da Pseudomonas aeruginosa é frequentemente propiciada por enzimas βlactamase que têm a capacidade de inativar uma grande parte dos antibióticos βlactâmicos MORTARI et al 2008 Isso inclui penicilinas cefalosporinas e carbapenemas que são algumas das classes mais utilizadas de antibióticos no tratamento de infecções bacterianas A Pseudomonas aeruginosa também possui a habilidade de adquirir resistência a antibióticos por meio de mutações espontâneas e transferência horizontal de genes o que pode levar à emergência de linhagens multirresistentes MELLO 2014 A identificação de tais linhagens é de suma importância para a escolha adequada de terapias antimicrobianas e para a contenção da disseminação de bactérias resistentes Dentro desse cenário o antibiograma emerge como uma ferramenta vital para a vigilância da resistência bacteriana Ele permite a detecção rápida e precisa de bactérias resistentes e fornece informações inestimáveis para a seleção do tratamento antimicrobiano mais eficaz MACEDO CANUTO DUARTE 2018 Adicionalmente ao monitorar as tendências da resistência 4 5 bacteriana ao longo do tempo os antibiogramas podem auxiliar na identificação de novos padrões de resistência e na avaliação da efetividade das estratégias de controle de infecção Finalmente a realização de um antibiograma em um ambiente educacional proporciona aos estudantes das ciências biomédicas uma experiência valiosa no domínio de técnicas de microbiologia clínica Isso auxilia na preparação dos futuros profissionais de saúde para enfrentar os desafios da resistência bacteriana e para aplicar de maneira correta os princípios do uso racional de antibióticos 2 JUSTIFICATIVA Em meio ao cenário atual onde a resistência bacteriana se apresenta como um dilema cada vez mais evidente na medicina contemporânea a relevância do antibiograma tornase inquestionável A bactéria Pseudomonas foi selecionada para esta aula prática em função de sua destacada capacidade de desenvolver resistência a múltiplos antibióticos fazendo dela um modelo ideal para este estudo 3 OBJETIVOS GERAIS E ESPECÍFICOS 31 Objetivo Geral Adquirir conhecimento e habilidade prática na execução da técnica do antibiograma facilitando a compreensão do fenômeno de resistência bacteriana aos antibióticos 32 Objetivos Específicos 5 6 1 Inocular e promover o crescimento da bactéria Pseudomonas em meio de cultura TBS 2 Semear a bactéria cultivada na placa de agar MullerHinton 3 Posicionar discos impregnados com diversos antibióticos sobre a placa 4 Avaliar a resistência e a susceptibilidade da bactéria Pseudomonas frente aos diversos antibióticos após o período de incubação 4 MATERIAIS E MÉTODOS Os materiais utilizados para este experimento incluíram uma cepa de Pseudomonas aeruginosa meio de cultura TBS Trypticase Soy Broth uma placa de Petri um swab estéril um disco com vários antibióticos uma pinça estéril uma incubadora ajustada para 37C e uma régua para medir a zona de inibição 1 Primeiramente a cepa de Pseudomonas aeruginosa foi cultivada no meio de cultura TBS até que a turbidez da cultura fosse semelhante ao tubo 05 da escala de McFarland indicando um crescimento bacteriano adequado 2 Após o crescimento a bactéria foi coletada utilizando o swab estéril e inoculada de forma uniforme na placa de Petri contendo o meio de cultura Muller Hinton 3 Em seguida um disco contendo vários antibióticos foi cuidadosamente colocado na placa usando a pinça estéril O cuidado foi tomado para garantir que o disco estava em contato completo com o meio de cultura 4 A placa foi então colocada em uma incubadora ajustada para 37C e deixada para incubar por 18 horas 5 Após o período de incubação a placa foi removida da incubadora e a zona de inibição ao redor do disco antibiótico foi medida utilizando uma régua Esta medida foi usada para avaliar a 6 7 sensibilidade da Pseudomonas aeruginosa aos antibióticos presentes no disco 5 RESULTADOS No teste de antibiograma a Pseudomonas aeruginosa demonstrou sensibilidade a cada um dos antibióticos avaliados As áreas de inibição que variaram de 10mm a 32mm sugerem uma resposta sensível a todas as drogas testadas Os antibióticos AMO30 CRO30 e SUT25 foram eficazes contra a Pseudomonas aeruginosa com áreas de inibição registradas em 20mm 29mm e 25mm respectivamente Esses resultados são consistentes com pesquisas anteriores que evidenciam a efetividade desses medicamentos contra essa bactéria PAZZARZA et al 2019 Outro antibiótico o TET30 também se revelou eficiente com uma zona de inibição de 10mm Este é comumente usado para o tratamento de várias infecções e com base nos resultados é plausível considerálo como uma alternativa viável para o tratamento de infecções causadas pela Pseudomonas aeruginosa Por fim o antibiótico MPM10 destacouse como o mais efetivo no combate à Pseudomonas aeruginosa apresentando uma zona de inibição de 32mm Esse resultado é relevante uma vez que este medicamento tem sido sugerido como uma opção potencialmente eficaz contra bactérias multirresistentes MACEDO CANUTO DUARTE 2018 6 DISCUSSÃO Esses resultados ganham especial relevância quando consideramos o problema crescente da resistência antibiótica A Pseudomonas aeruginosa é notória por sua habilidade de desenvolver resistência a uma ampla gama de antibióticos incluindo βlactamases MORTARI et al 2008 No entanto os 7 8 resultados sugerem que ainda existem muitas alternativas de tratamento eficazes Importa ressaltar que embora os resultados sejam promissores eles são baseados em um único isolado de Pseudomonas aeruginosa A resistência aos antibióticos pode variar significativamente entre diferentes cepas e isolados da mesma espécie bacteriana Este fato sublinha a importância da realização de testes de sensibilidade a antibióticos em diferentes isolados e cepas para garantir a escolha do tratamento antibiótico mais eficaz para cada caso Isso é particularmente importante dada a variabilidade na resistência antibiótica entre diferentes isolados da mesma espécie Por fim é preciso salientar que embora estes resultados sejam animadores são necessárias mais pesquisas para confirmar a eficácia desses antibióticos em diferentes cepas de Pseudomonas aeruginosa e em condições clínicas variadas 7 CONCLUSÃO Os achados deste estudo oferecem insights valiosos sobre a eficácia de vários antibióticos contra a Pseudomonas aeruginosa uma bactéria notoriamente resistente a diversos tratamentos Através do método do antibiograma foi possível determinar que todos os antibióticos testados apresentaram alguma capacidade de inibir o crescimento desta bactéria o que é uma descoberta encorajadora Os antibióticos MPM10 TET30 AMO30 CRO30 e SUT25 mostraramse particularmente eficazes com as zonas de inibição exibindo um raio considerável sugerindo uma forte atividade antimicrobiana Apesar desses resultados promissores é crucial reconhecer que o estudo foi baseado em um único isolado de Pseudomonas aeruginosa Como a 8 9 resistência a antibióticos pode variar significativamente entre diferentes cepas e isolados da mesma espécie bacteriana a eficácia destes antibióticos pode não ser generalizável para todas as cepas de Pseudomonas aeruginosa Portanto é de extrema importância continuar a realizar testes de sensibilidade aos antibióticos em diversos isolados para obter uma visão mais completa e precisa A resistência aos antibióticos é um problema crescente na medicina moderna e o desenvolvimento de estratégias eficazes para combater bactérias resistentes como a Pseudomonas aeruginosa é fundamental Este estudo fornece dados úteis que podem contribuir para o desenvolvimento de tais estratégias destacando a eficácia de vários antibióticos contra esta bactéria em particular No entanto são necessárias pesquisas adicionais para confirmar esses resultados e explorar ainda mais as possibilidades de tratamento para infecções causadas pela Pseudomonas aeruginosa Por fim este estudo oferece uma contribuição importante para o campo do combate à resistência aos antibióticos fornecendo dados úteis sobre a eficácia de vários antibióticos contra a Pseudomonas aeruginosa No entanto é fundamental que pesquisas futuras continuem a explorar este assunto dada a importância da descoberta de novas estratégias de tratamento eficazes contra bactérias multirresistentes 9 10 8 LISTA DE FIGURAS Figura 1 Placa de Agar Fonte Autoria Própria Figura 2 Descrever 10 11 Figura 3 Descrever Fonte Autoria Própria Figura 4 Descrever Fonte Autoria Própria 11 12 Figura 5 Placa de Agar Colonizada Fonte Autoria Própria 12 13 9 REFERÊNCIAS ARBAB S et al Drug resistance and susceptibility testing of Gram negative bacterial isolates from healthy cattle with different β Lactam resistance Phenotypes from Shandong province China Brazilian Journal of Biology v 83 2023 IBRAHIM D JABBOUR JF KANJ S S Current choices of antibiotic treatment for Pseudomonas aeruginosa infections Current Opinion in Infectious Diseases v 33 n 6 p 464473 22 set 2020 MACEDO Jhenifer Sandra Minhano CANUTO Sostenes DUARTE Juliana Maria Amabile TESTE DE ANTIBIOGRAMA PELA TÉCNICA DE DIFUSÃO EM DISCOS NO CONTROLE DE ESPÉCIES BACTERIANAS EM CULTURAS PURAS Seminário Transdisciplinar da Saúde n 02 2018 MELLO Manuella Rodrigues de Souza Detecção da atividade da enzima carbapenemase em Enterobacteriaceae e Pseudomonas aeruginosa isoladas em clínicas veterinárias do Distrito Federal Brasil 2014 MORTARI Ana Paula et al Prevalência de Pseudomonas aeruginosa produtoras de β lactamases do tipo AMPC em isolados clínicos de Santa MariaRS Rev bras anal clin p 147149 2008 PAZZARZA Victor Manuel et al Pseudomonas aeruginosa patogenicidad y resistencia antimicrobiana en la infección urinaria Rev chil infectol Santiago v 36 n 2 p 180189 abr 2019 Disponible en httpwwwscieloclscielophpscriptsciarttextpidS0716 10182019000200180lngesnrmiso accedido en 16 mayo 2023 httpdxdoiorg104067S071610182019000200180 WANNIGAMA D L et al A rapid and simple method for routine determination of antibiotic sensitivity to biofilm populations of Pseudomonas 13 14 aeruginosa Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials v 19 n 1 13 mar 2020 14