Procedimento para a Preparação de Curva Padrão de Glicose

K ABSORBÂNCIA C CONC GLICOSE 65 10611 Procedimento Preparar uma solução padrão de glicose com concentração igual a 05 mgmL Preparar a curva padrão colocando em uma série de tubos quantidades crescentes da solução padrão de glicose Preparar o tubo branco que contém todos os reagentes exceto a glicose Adicionar 04 mL da solução alcalina de ácido 35 dinitrosalicílico DNS em cada tubo e agitar para misturar as soluções Colocar os tubos simultaneamente em água em ebulição durante exatamente 5 minutos Retirar simultaneamente todos os tubos e esfiar sob jato de água Adicionar 10 ml de água destilada e agitar Fazer a leitura da absorvância e da transmitância contra o branco utilizando o comprimento de onda 550 nanômetros TABELA Tubos Padrão de Água DNS Água 550nm x B 1 50 005 mL 350 35mL 040mL E 10mL T 024 A 0007 2 10 100 030 B 028 0121 3 100 015 250 025 U 042 0192 4 200 020 L 056 0270 5 20 250 015 I 070 0400 6 30 300 010 Ç 084 0460 7 035 50 005 Á 070 0300 8 400 000 400 040 O 110 0478 B 000 000 5 100 0548 Construir a curva padrão em papel milimetrado colocando a concentração de glicose em MICROMOL DE GLICOSE na abscissa e a ABSORBÂNCIA na ordenada Calcular a inclinação da curva padrão K para cada ponto utilizando a equação de LambertBeer AKC onde A é a absorbância e C a concentração de glicose em micromol Calcular a inclinação média da curva padrão somatória de cada inclinação dividido pelo número de pontos