Prova Biologia Molecular

1 Você tem cinco genes e gostaria de realizar até 3 reações multiplex Como você faria o arranjo dos genes e de reagentes considerando que todas usam a mesma quantidade de reação em suas reações individuais Reação de 25uL Buffer 5uL 10X MgCl2 1uL 50mM Taq 015uL 5U dNTP 05uL 10mM Primers 1uL 10pmol DNA 2uL Água O que faltar para 25uL O gene 1 tem 182pb com temperatura de anelamento de 53 graus celsius O gene 2 tem 325pb com temperatura de anelamento de 56 graus celsius O gene 3 tem 412 pb com temperatura de anelamento de 54graus celsius O gene 4 tem 440pb com temperatura de anelamento de 52 graus celsius O gene 5 tem 502pb com temperatura de anelamento de 57 graus celsius 2 Considerando as seguintes soluções para quais dos problemas que ocorrem em uma PCR cada uma é usada a Ajustar a temperatura de anelamento b Purificar o DNA ou utilizar diluições adequadas 3 Considerando o sequenciamento de Sanger classifique os eletroferoramas em satisfatórios ou não e quando não o que pode ter ocorrido a c d 4 Identifique as espécies do contig dos arquivos em anexo Seq1F e Seq2R 5 Qual a diferença entre as tipagens por MLST PFGE e MLVA