Estudo Dirigido Biotecnologia e Bioinformatica - RTPCR, qPCR e Bibliotecas

Estudo Dirigido BIOTECNOLOGIA E BIOINFORMÁTICA Alcantara Prof Beatriz Junqueira 1 Assinale a alternativa correta RTPCR referese a Reverse Transcriptase e é feita a partir de RNA O q de qPCR referese a quantitativo já que essa técnica permite a quantificação do DNA presente na amostra analisada A técnica de RTPCR referese ao tempo em que a reação é lida que ocorre simultaneamente ou seja em tempo real A RTPCR é feita com sondas específicas lidas por emissão de fluorescência e a qPCR é realizada com o uso de uma enzima denominada Reverse Transcriptase que permite a quantificação do material genético A técnica de RTPCR parte de uma fita de DNA e a transforma em RNA chamado de cRNA o RNA complementar ao molde presente na amostra O PCR quantitativo em tempo real precisa quantificar a amplificação de DNA em gel de eletroforese apenas após o fim da reação 2 A diferença entre uma biblioteca genômica e uma biblioteca de cDNA é que A genômica é feita a partir de mRNA e a de cDNA é feita utilizando somente íntrons A genômica possui apenas os éxons e a de cDNA possui apenas os íntrons A genômica é feita a partir da sequência de aminoácidos das proteínas de um organismo ou seja possui apenas a informação expressa deste organismo enquanto que a de cDNA é feita com informação expressa e não expressa de um organismo Ambas são feitas a partir dos genes expressos de um organismo porém a de cDNA contém genes mais curtos daí a sigla cDNA DNA curto A genômica é feita a partir de porções inteiras do genoma enquanto a de cDNA é feita a partir dos genes expressos 3 PUCSP Em um experimento de Engenharia Genética alguns pesquisadores introduziram em células bacterianas uma sequência de DNA ativo responsável pela produção de insulina humana A síntese desse hormônio proteico no interior das bactérias é Possível pois excetuandose a referida sequência de DNA as bactérias apresentam os componentes necessários à síntese de proteínas Possível se além do referido gene forem introduzidos ribossomas componentes celulares ausentes em bactérias Impossível pois o RNA mensageiro correspondente à insulina não seria transcrito Impossível pois as bactérias não apresentam enzimas capazes de promover as ligações peptídicas encontradas na insulina Impossível pois o DNA bacteriano seria destruído pelo DNA humano e as células perderiam a atividade Estudo Dirigido BIOTECNOLOGIA E BIOINFORMÁTICA Alcantara Prof Beatriz Junqueira 4 Segundo a Organização das Nações Unidas ONU biotecnologia significa qualquer aplicação tecnológica que utilize sistemas biológicos organismos vivos ou seus derivados para fabricar ou modificar produtos ou processos para utilização específica A biotecnologia pode ser aplicada nas mais diferentes áreas como na biotecnologia vegetal Um exemplo da sua aplicação se dá na criação de plantas resistentes a pragas o que consequentemente acarreta na diminuição do uso de agrotóxicos tema atualmente muito discutido Marque a alternativa que apresenta a denominação da tecnologia que permite a criação de plantas resistentes Transgênese Transcrição Transformação Clonagem de RNA Transcrição reversa 5 A respeito dos vetores utilizados na engenharia genética avalie as afirmações a seguir I Os plasmídeos bacterianos são utilizados como vetores de clonagem do gene de interesse para a transformação genética em plantas II Os plasmídeos são dependentes do DNA cromossômico para replicação sendo frequentemente manipulados no processo de transformação gênica III Para ser um bom vetor de clonagem um plasmídeo deve possuir origem de replicação sítios de clivagem para endonucleases de restrição e um gene que codifique resistência a um antibiótico É correto o que se afirma em Apenas I Apenas I e II Apenas I e III Todas as afirmativas 6 A biotecnologia abrange diferentes áreas do conhecimento incluindo a ciência básica biologia molecular e microbiologia a ciência aplicada técnicas imunológicas e também as tecnologias diversas informática de sistemas robótica e controle de processos Dentre essas áreas o DNA recombinante aparece diretamente associado ao melhoramento genético de organismos Essas técnicas de melhoramento consistem na inserção de porções do DNA de interesse de uma espécie em outra Tendo em vista os princípios básicos Estudo Dirigido BIOTECNOLOGIA E BIOINFORMÁTICA Alcantara Prof Beatriz Junqueira de biotecnologia relacionados ao DNA recombinante sobre os protocolos comumente utilizados podese afirmar corretamente que As enzimas de restrição são utilizadas para cortar a molécula de DNA As enzimas de restrição reconhecem o fragmento de DNA inserido na célulaalvo O uso de plasmídeos diminui a eficiência das técnicas de melhoramento genético Os plasmídeos são enzimas que unem as moléculas de DNA A enzima DNAligase insere o DNA de interesse na célula alvo 7 A diferença entre uma biblioteca genômica e uma biblioteca de cDNA é que A genômica é feita a partir da sequência de aminoácidos das proteínas de um organismo ou seja possui apenas a informação expressa deste organismo enquanto que a de cDNA é feita com a informação expressa e não expressa de um organismo A genômica possui apenas exons e a de cDNA apenas íntrons A genômica é feita a partir de porções inteiras do genoma enquanto a de cDNA é feita a partir dos genes expressos A genômica é feita a partir de mRNA e a de cDNA é feita utilizando somente íntrons Ambas são feitas a partir dos genes expressos de um organismo porém a de cDNA contém genes mais curtos daí a sigla cDNA DNA curto 8 PUCSP Em um experimento de Engenharia Genética alguns pesquisadores introduziram em células bacterianas uma sequência de DNA ativo responsável pela produção de insulina humana A síntese desse hormônio proteico no interior das bactérias é 10 Possível pois excetuandose a referida sequência de DNA as bactérias apresentam os componentes necessários à síntese de proteínas Possível se além do referido gene forem introduzidos ribossomos componentes celulares ausentes em bactérias Impossível pois o RNA mensageiro correspondente à insulina não seria transcrito Impossível pois as bactérias não apresentam enzimas capazes de promover as ligações peptídicas encontradas na insulina Impossível pois o DNA bacteriano seria destruído pelo DNA humano e as células perderiam a atividade 9 A tecnologia do DNA recombinante permitiu a criação do milho BT resistente ao ataque de determinados tipos de insetos Considerando que foi introduzido um gene da bactéria Bacillus thuringiensis que promove na planta a produção Estudo Dirigido BIOTECNOLOGIA E BIOINFORMÁTICA Alcantara Prof Beatriz Junqueira de uma proteína tóxica aos insetos mas inofensiva aos mamíferos é correto afirmar que o milho BT é resultado da técnica de Clonagem Gênica Transgênese Terapia Gênica Eletroforese Cruzamento Interespecífic 10 Assinale a alternativa correta RTPCR referese a Reverse Transcripase e é feita a partir de RNA O q de qPCR refere0se a quantitativo já que essa técnica permite a quantificação do DNA presente na amostra analisada A técnica de RTPCR referese ao tempo em que a reação é lida que ocorre simultaneamente ou seja em tempo real A RTPCR é feita com sondas específicas lidas por emissão de fluorescência e a qPCR é realizada com o uso de uma enzima denominada Reverse Transcriptase que permite a quantificação do material genético A técnica de RTPCR parte de uma fita de DNA e a transforma em RNA chamado de cRNA o RNA complementar ao molde presente na amostra 11 Concurso UEPA 2017 Biomédico Hemoterapia O PCR em tempo real qPCR é um método de biologia molecular que pode ser utilizado para medir o aumento na quantidade de DNA a medida que o DNA é amplificado Sobre essa técnica é correto afirmar que embora a PCR em tempo real seja extremamente precisa ela não pode ser aplicada a estudos de carga viral em amostras biológicas a possibilidade de detecção em tempo real se deve à utilização de sondas ligadas à fluoróforos responsável pela emissão de fluorescência não podem ser utilizadas para detecção de vírus que possuem RNA como material genético uma vez que as sondas e primers se ligam especificamente em moléculas de DNA apesar de ser uma técnica avançada ainda não permite ao usuário a detecção de diferentes agentes virais em uma única reação de PCR em tempo real não é necessário realizar a termociclagem porém o instrumento precisa estar capacitado para registrar os resultados de cada ciclo de amplificação na PCR em tempo real 12 Os alimentos transgênicos resultam de um processo de modificação molecular por meio das técnicas de engenharia genética A obtenção de plantas transgênicas passa por três etapas obtenção do gene que deve ser incorporado em um vetor para se processar a transformação introdução do gene na planta receptora e regeneração da célula em uma nova planta por meio da cultura de tecidos Estudo Dirigido BIOTECNOLOGIA E BIOINFORMÁTICA Alcantara Prof Beatriz Junqueira A respeito dos vetores utilizados na engenharia genética avalie as afirmações a seguir I Os plasmídeos bacterianos são utilizados como vetores de clonagem do gene de interesse para a transformação genética em plantas II Os plasmídeos são dependentes do DNA cromossômico para replicação sendo frequentemente manipulados no processo de transformação gênica III Para ser um bom vetor de clonagem um plasmídeo deve possuir origem de replicação sítios de clivagem para endonucleases de restrição e um gene que codifique resistência a um antibiótico É correto o que se afirma em 10 a Apenas I b Apenas I e II c Apenas I e III d Apenas II e III e I II e III 13 Explique detalhadamente os processos da Reação em Cadeia da Polimerase por transcriptase reversa RTqPCR 14 Explique o que é um plasmídeo sua importância para a tecnologia do DNA recombinante e quais suas características que permitem essa técnica