Relatorio de Aula Pratica Contagem de Bacterias e Pesquisa de Coliformes em Alimentos

3cm INSTITUTOFEDERALDEEDUCAÇÃOCIÊNCIAETECNOLOGIAD E SANTACATARINA CURSOTÉNICOEM FonteArialouTimes12 maiúsculasemnegrito BELTRANODE TALFULANODETAL 3cm RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIOCONTAGEM DE BACTÉRIAS TOTAIS E PESQUISA DECOLIFORMESCOLIFORMESFECAISEESCHERICHIACOLIEM ALIMENTOS Fonte14maiúsculaemnegrito Fonte S u b t í tu lo e s p e c Fonte 2cm 2cm RELATÓRIODEAULAPRÁTICAEMLABORATÓRIO Fonte12maiúsculaemnegrito 1 IDENTIFICAÇÃO Títulosubtítulodorelatório Discentesalunos Docentesprofessores UnidadeCurriculardisciplinaenvolvidasnaelaboraçãodorelatório CursoCursoTécnicodeNívelMédioemAgroindústriaModalidadeIntegrado Período09032014datadarealizaçãodoexperimento ObjetivoConstatarnúmerodebactériasemalimentoesanidadedoalimentoiniciar comverbonoinfinitivo 2 INTRODUÇÃO Apresençade bactériasemalimentosé algo recorrenteAcarne crua vendidaao público é portadora de bactérias e fungos pois tratase de um meio nutritivofavorávelaodesenvolvimentodealgunsmicrorganismostaiscomocoliformes coliformesfecaiseEscherichiaColiSILVA2003Esseú l t i m o c o m u m e n t e provoca no ser humano infecção urinária podendo causar também várias outrasinfecções como abscesso no fígado pneumonia meningite artrite colecistite PINHEIRO 2014 O consumo de carne e o número de bactérias prejudiciais àsaúdequepodemnelaestarpresentesvemestimulandomuitaspesquisasexperi mentosetrabalhos Nestapráticaexperimentaldecidiu seutilizarumbifedecarnedevacacomprado em um mercado local o qual foi Fonte12 2linhas embranco Font 2 linhas em branco R e c u o d e p a rá g ra fo analisado em dois estados diferentes crue grelhado análise imediata A utilização desse alimento proveniente de fonte nãoconhecidaproporcionoulegitimidadeaexperiênciafazendocomques everificase naprática oaprendidona teoria Ainda para o experimento levouse em conta dados constantes em Vera2003 que as bactérias na sua maioria morrem ao serem submetidas a altastemperaturas durante um considerável período de tempo no ar que respiramosexistem naturalmente inúmeros esporos e microrganismos em suspensãoo agarnutritivo é um meio ideal ao desenvolvimento de colônias a partir de microrganismosbactérias e fungos nele presentes ufc unidades fundadoras de colôniasoscoliformessãofermentadoresrápidosqueliberamdassuasreaçõesdef ermentação CO2eH2 21 OBJETIVO Fonte12maiúsculasem negrito Constatar os níveis de bactérias em um mesmo tipo de alimento submetido adiferentesestadosdepreparaçãoeconservação 22 OBJETIVOSESPECÍFICOS Detectarpresençaouausência debactériascoliformes Determinaron ú m e r o debactériascoliformes seexistentes VerificarapresençaequantidadedeEscherichiaColi Apontara condiçãode sanidaded o p r o d u t o comor e s u l t a d o d a v e r i f i c a ç ã o porbactérias 3 MATERIAISEMÉTODOS 31 MATERIAISUTILIZADOS Foramutilizadososseguintesmateriaisparaapráticarealizada Autoclav eBalança Balões de ErlenmeyerBisturi ContadordeUFC Estufa FrigideiraFrigorí ficoHomogeneiz adorLamparina Micropipetasvolumétricas Placasdepetri Placas de aquecimentoTubos de ensaioVaretas 32 PRODUTOSUTILIZADOS Foram utilizados os seguintes produtos na prática realizadaBife decarnebovina200g Diluente SorofisiológicoReagenteE r l i c h K o v a c s 1 l deagarnutritivo 100mldeVerde brilhanteaconcentraçãonormal100 ml de Verde brilhante a concentração dupla100 ml de água de peptona Água de peptonaÁgua destilada ÁlcoolAl godão Apartirdasproporçõesconfiguradaspelofabricantediluiseosoluto meiosemáguadestiladaaferver 33 PROCEDIMENTOEXPERIMENTAL Utilizouse a autoclave paraesterilizar o material da experiência o que foirealizadopelasalunas Omaterialquenãofoiimediatamenteutilizadoficouconservadonumfrigoríficoafimdee vitarasua contaminação Paraprocederseo experimentopreparouseasuspensão pesandocerca de 1gdacarnequefoiintroduzidanumbalãodeErlenmeyerDepoisforamadicionados 90 ml de diluente soro fisiológico ao balão até a balança marcar umvalor próximode100 gdeformaaobter umaconcentraçãode110 1g d e alimento 10mldediluenteeagitousea s u s p e n s ã o obtida Logo após em cada um de 5 tubos de ensaio foram colocados 9 ml dediluente utilizando a micropipeta Posteriormente transferiuse 1 ml da suspensãopara um primeiro tubo o qual foi identificado como 102 o correspondente à suadiluição Depois este foiagitado no homogeneizador durante alguns segundos Omesmoprocedimentofoirepetidoparaosoutrostubosatécompletarem seasdiluiçõesnecessárias Quanto à verificação da presença de coliforme na carne bovina usada com oauxílio da micropipeta foram inoculados num tubo de ensaio 10 ml da suspensãocorrespondentea 1 g d e a l i m e n t o c o m 1 0 m l d e m e i o d e V e r d e B r i l h a n t e a concentração dupla sendo a inoculação seguidamente incubada a 37ºC durante 48horas Quantoàpesquisadecoliformes fecais foraminoculadas algumas gotasentre 05 e 1 ml do meio de Verdebrilhante anteriormente inoculado após obter oresultadopositivocom9mldemeioVerde brilhanteemconcentraçãon o r m a l Depoisincubouseotubo deensaioa 445ºCdurante48 horas No tocante à pesquisa de Escherichia Coli procedeuse a inoculação dealgumas gotas entre 05 e 1 ml do mesmo meio de Verdebrilhante positivo obtidoatravés do procedimento 7 correspondente à suspensão 110 com 9ml de água depeptonaO tubo de ensaio juntamente com o do procedimento 71 foi incubado àmesmatemperaturaeduranteomesmointervalodetempo445ºC48hora sApósai n c u b a ç ã o f o r a m a d i c i o n a d a s 5 a 6 g o t a s d o r e a g e n t e E r l i c h m a n i t a K o v a c s n o tubode ensaio 4 RESULTADOSEDISCUSSÃO Foram alcançados os seguintes resultados nas pesquisas com a carne crua ecomacarnegrelhada Nacarnegrelhadaanálise imediata não ocorreu alteração do meio Verde brilhante a concentração dupla o que significa que não estavam presentes em 1 mlda suspensão coliformes e consequentemente também não estavam presentescoliformesfecaisnemEscherichiaColi Nacarne crua todos os resultados foram positivos Nostubos de ensaio deVerde brilhanteconcentraçãonormaleduplausadosfoipossívelobservaraformaçãodeg ásnotubointerioreaturvaçãodomeiodevidoàpresençad e culturas Pela tabela abaixo constatase que de fato a carne grelhada a que foianalisadaimediatamentecontémumnúmerodebactériasmuitoreduzidoemrel ação ao da carne cruau m a v e z q u e a o s e r s u b m e t i d a a e l e v a d a s t e m p e r a t u r a s a maioria das bactérias morre persistindo apenas alguns esporos Contudo se forconsumida imediatamente estes não terão tempo de se desenvolver minimizandoassimosriscos que ospotenciaispatogênicos presentesnosalimentosportam CARNEANALISADA GRELHADA CRUA BACTÉRIAPORGRAMA 2750 147000 PERCENTAGEM 187 10000 Tabela1N ú m e r o debactériasnacarneanalisada Osresultadosdacarnecrua foramprevisíveisvistoqueénormalapresençade cargamicrobianamecarnecrua Quantoàsanidadedoprodutoestenãofoiconsideradoinapropriadoparaoc onsumoportersidosubmetidoaaltatemperaturaportemposuficientepara eliminarasbactériaspresentesprocedimentorecomendadoaoconsumodes tetipode alimento 5 CONCLUSÃO UmavezqueapenasforamencontradoscoliformescoliformesfecaiseEscheric hia Coli na carne crua concluímos quetodos os coliformes que sejamsubmetidos a temperaturas muito elevadas são eliminados e visto que eles nãoproduzemesporos não podemsubsistir para mais tarde em condições ideaisvoltaremasereproduzir Portanto a partir do que foi verificado no experimento pode se dizer que émais seguro consumir carne logo após ser preparada pois eventuais esporos nelapresentesououtrosmicrorganismosdoambientenãotêmtempodesedesenvolve r que a carne deve ser submetida a temperaturas altas durante umintervalodetempoconsideráveldemodoquetodososmicrorganismosnelespre sentes sejame l i m i n a d o s d e v e s e e v i t a r o c o n s u m o d e c a r n e s m a l p a s s a d a s poisacarnecrua possui umaelevadacargamicrobiana 6 REFERÊNCIAS PINHEIRO PedroBactéria Escherichia Coli E ColiMD Saúde São Paulo 14jun2011Disponívelemhttpwwwmdsaudecom201106bacteriaescherichia colihtmlAcessoem17fev2014 SILVACarlosMagalhãesEstudoBacteriológicoemExperimentosSãoPaul oTerramar 2003 VERASoniaGarciaOCaminhodosColiformes2edCuritibaValares2003 Fonte12e s p a ç a m e n t o simples alinhamentoà e s q u e r d a INSTITUTO FEDERAL DE EDUCAÇÃO CIÊNCIA E TECNOLOGIA DE SANTA CATARINA CURSO TÉNICO EM BELTRANO DE TAL FULANO DE TAL RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIO Inoculação de Microrganismos Cidade Novembro 2022 RELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIO 1 IDENTIFICAÇÃO Título Inoculação de Microrganismos Discentes alunos Docentes professores Unidade Curricular Microbiologia Curso Curso Técnico de Nível Médio em Agroindústria Modalidade Integrado Período DATA DO EXPERIMENTO Objetivo Constatar a presença de microrganismos 2 INTRODUÇÃO Vivemos em um mundo repleto de microrganismos eles estão suspensos no ar que respiramos mas a maioria desses organismos morrem ao serem submetidos a altas temperaturas VERA 2003 No que toca aos fungos e bactérias podemos dizer que possuem uma importância vital para os ambientes naturais importância essa ligada a ciclagem de nutrientes Segundo Odum 2004 sua importância é absolutamente vital para que os nutrientes não fiquem encerrados em corpos mortos com isso eles mantem as condições de vida na Terra sustentáveis Na natureza os fungos são os principais decompositores Segundo Grandi 2007 os fungos são tão necessários quanto os produtores pois devolvem ao solo tudo o que dele foi retirado um dia Diversas colônias destes microrganismos estão localizadas na nossa epiderme elas possuem funcionalidades distintas e algumas contribuem para manter nossa pele saudável Segundo Dréno et al 2016 a pele é colonizada por diferentes espécies de estafilococos incluindo o S aureus e o S epidermidis O tecido epitelial é o maior órgão do corpo humano responsável principalmente pela nossa proteção pois estabelece barreiras protetoras que mantêm a superfície da pele íntegra e resistente a uma série de agentes infecciosos MELLO 2020 A composição da microbiota da pele varia de indivíduo para indivíduo dependendo do local do corpo idade e se é um indivíduo saudável HALL et al 2018 Segundo Mello 2020 o microbioma da pele humana é o conjunto genômico de todos os microrganismos como bactérias fungos vírus e outros parasitas que habitam a pele de indivíduos sadios criando uma interface de comunicação entre o corpo humano e o meio ambiente Nesta prática experimental decidiuse utilizar amostras retiradas da epiderme humana como orelha ponta dos dedos adorno unhas e língua e de um alimento A utilização desse alimento proveniente de fonte não conhecida proporcionou legitimidade a experiência fazendo com que se verificasse na prática o que foi estudado na teoria Para tal utilizouse os conhecimentos de Vera 2003 O ágar nutritivo é um meio ideal ao desenvolvimento de colônias a partir de microrganismos bactérias e fungos nele presentes ufc unidades fundadoras de colônias 21 OBJETIVO Constatar a presença de microrganismos 22 OBJETIVOS ESPECÍFICOS Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra retirada da orelha humana Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra retirada da língua humana Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra retirada do adorno Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra retirada da pontas dos dedos de um humano Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra retirada da unha humana Detectar presença ou ausência de microrganismos em amostra de alimento 3 MATERIAIS E MÉTODOS 31 MATERIAIS UTILIZADOS Foram utilizados os seguintes materiais para a prática realizada Ágar nutritivo Álcool Lamparina Placas de petri Swab 32 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL O álcool foi utilizado para esterilizar a bancada e a parte externa das placas de petri para que não ocorresse contaminação Passando o swab na epiderme da orelha de um humano coletouse a primeira amostra o mesmo swab foi passado na placa de petri que já estava com o ágar nutritivo pronto utilizando a técnica do esfregaço Com a mesma técnica foi utilizado outro swab para coletar material da língua e feito o esfregaço na placa de petri com ágar O swab foi utilizado para coletar material do adorno o mesmo foi passado na placa de petri que foi fechada logo em seguida Para retirar amostras das pontas dos dedos e das unhas foi utilizado dois swabs um para cada amostra passados na região das amostras e o material coletado foi transferido para duas placas de petri distintas por meio da técnica de esfregaço Por último a técnica de esfregaço foi utilizada para retirar amostra do alimento da mesma forma o swab foi passado na amostra e a mesma transferida para a placa de petri As placas ficaram fechadas em colocar ambiente ou estufa por nº dias 4 RESULTADOS E DISCUSSÃO Foram alcançados os seguintes resultados A placa contendo a amostra retirada da orelha apresentou uma colônia de cor clara próximo ao branco com odor de cloro e nº de UFC indeterminado Já a placa com a amostra retirada da língua apresentou colônias grandes e pequenas com coloração amarelada e nº de UFC aproximadamente 146 A amostra do adorno apresentou colônias de coloração branca e tamanhos variados nº de UFC indeterminado e odo de cloro A amostra retirada da ponta dos dedos apresentou pequenas colônias esbranquiçadas com nº de UFC indeterminado e odor adocicado A amostra retirada das unhas também apresentava coloração esbranquiçada porém com colônias de tamanhos variados pequenas médias e grandes com nº de UFC indeterminado e odor clorídrico Já a amostra retirada do alimento apresentou colônias de tamanhos variados entre pequenas e grandes coloração amarelada e esbranquiçada e odor pútrido 5 CONCLUSÃO Com base nos resultados apresentados dentro dos objetivos esperados podemos concluir que havia presença de microrganismos em todas as amostras As amostras tiveram características em comum demostrando que as amostras retiradas da epiderme externa orelha adorno ponta dos dedos e unha apresentam microrganismos iguais ou semelhantes por se tratarem de áreas com condições semelhantes como pH por exemplo É interessante comparar que apenas a amostra de alimento apresentou odor pútrido isto ocorre devido a presença de microrganismos decompositores que são responsáveis pela apodrecimento e decomposição dos alimentos devemos enxergar esse processo como algo natural do ciclo ecológico pois ele permite que os nutrientes voltem para a terra 6 REFERÊNCIAS DRÉNO B et al Microbiome in healthy skin update for dermatologists Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology v 30 n 12 p 20382047 2016 Disponível em httpswwwncbinlmnihgovpmcarticlesPMC6084363 Acesso em 23112022 as 1535 GRANDI R A P Fungos In RAVEN P H EVERT R F EICHHORN S E Biologia Vegetal 7 ed Rio de Janeiro Guanabara Koogan SA 2007 MELLO C N PRODUÇÃO DE TOXINAS POR Staphylococcus sp ISOLADAS DE AMOSTRAS DE PELE UMA REVISÃO BIBLIOGRÁFICA Porto Alegre 2020 ODUM E P Fundamentos de Ecologia Trad Antônio Manuel de Azevedo Gomes 7º Ed Lisboa Fundação Calouste Gsulbenkian 2004 928 p VERA S G O Caminho dos Coliformes 2 ed Curitiba Valares 2003