Relatório de Aula Prática: Contagem de Bactérias Totais e Pesquisa de Coliformes

3 cm INSTITUTOFEDERAL DE EDUCAÇÃOCIÊNCIA E TECNOLOGIA DE SANTA CATARINA CURSO TÉNICO EM Fonte ArialouTimes12 maiúsculasemnegrito BELTRANO DE TAL FULANO DE TAL Fonte12 semnegrito Fonte12 semnegrito 3cm S u b t í tu lo e s p e c í f ic o f o n te 1 4 n e g r i to R ELATÓRIO DE AULA PRÁTICA EM LABORATÓRIO CONTAGEM DE BACTÉRIAS TOTAIS E PESQUISA DECOLIFORMES COLIFORMES FECAIS E ESCHERICHIA COLI EM ALIMENTOS Fonte 14 maiúscula em negrito Fonte 12 sem negrito Cidade Mês ano 2cm 2 cm R ELATÓRIO DEAULAPRÁTICAEMLABORATÓRIO Fonte 12maiúsculaemnegrito Fonte12 maiúsculaemnegrito 2linhas embranco espaçode15do títuloaosubtítulo I DENTIFICAÇÃO Fonte12emnegrito T ítulo subtítulo dorelatório Discentes alunos Docentes professores Unidade Curricular disciplina envolvidasna elaboração do relatório Curso Curso Técnico de Nível Médio em Agroindústria Modalidade Integrado Período 09032014 data da realização do experimento Objetivo Constatar número de bactérias em alimento esanidadedoalimento iniciar com verbo noinfinitivo R e c u o d e p a rá g ra fo 1 2 5 c m 2 linhas em branco espaço de 15 I NTRODUÇÃO A presença de bactérias em alimentos é algo recorrente A carne crua vendida ao público é portadora de bactérias e fungos pois tratase de um meio nutritivo favorávelaodesenvolvimentodealgunsmicrorganismostaiscomocoliformescoliformesfecaiseEscherichiaColiSILVA2003Esse último comumente provoca no ser humano infecção urinária podendo causar também várias outrasinfecções como abscesso no fígado pneumonia meningite artrite colecistite PINHEIRO 2014 O consumo de carne e o número de bactérias prejudiciais àsaúdequepodemnelaestarpresentesvemestimulandomuitaspesquisasexperimentos etrabalhos Nesta práticaexperimentaldecidiuseutilizarumbifedecarnedevacacomprado em um mercado local o qual foi analisado em dois estados diferentes cru e grelhado análise imediata A utilização desse alimento proveniente de fonte não conhecida proporcionou legitimidade a experiênciafazendo com queseverificase na prática o aprendidona teoria Ainda para o experimento levouse em conta dados constantes em Vera 2003 que as bactérias na sua maioria morrem ao serem submetidas a altastemperaturas durante um considerável período de tempo no ar que respiramosexistem naturalmente inúmeros esporos e microrganismos em suspensãoo agarnutritivo é um meio ideal ao desenvolvimento de colônias a partir de microrganismosbactérias e fungos nele presentes ufc unidades fundadoras de colôniasoscoliformessãofermentadoresrápidosqueliberamdassuasreaçõesdefermentação CO 2 e H 2 O BJETIVO Fonte12maiúsculasem negrito Constatar os níveis de bactérias em um mesmo tipo de alimento submetido a diferentes estados de preparaçãoe conservação OBJETIVOS ESPECÍFICOS Detectar presença ou ausência de bactérias coliformes Determinar o número de bactérias coliformes se existentes Verificar apresença e quantidadedeEscherichia Coli Apontar a condição de sanidade do produto com o resultado da verificação por bactérias MATERIAIS E MÉTODOS MATERIAIS UTILIZADOS Foram utilizados osseguintesmateriais para a prática realizada Autoclave Balança Balões de Erlenmeyer Bisturi ContadordeUFC Estufa Frigideira FrigoríficoHomogeneizador Lamparina Micropipetas volumétricas Placas de petri Placas de aquecimento Tubos de ensaio Varetas PRODUTOS UTILIZADOS Foram utilizados os seguintes produtos na prática realizada Bife de carnebovina200g Diluente Soro fisiológico Reagente ErlichKovacs 1 l de agar nutritivo 100 ml deVerdebrilhante a concentração normal 100 ml de Verdebrilhante a concentração dupla 100 ml de água de peptona Água de peptonaÁgua destilada Álcool Algodão A partir das proporçõesconfiguradaspelo fabricante diluise o soluto meios emágua destilada aferver PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL Utilizouse a autoclave para esterilizar o material da experiência o que foirealizadopelasalunasOmaterialquenãofoiimediatamenteutilizadoficou conservado num frigorífico a fim deevitar a sua contaminação Para procederseo experimentopreparouseasuspensão pesandocerca de 1 gdacarnequefoiintroduzidanumbalãodeErlenmeyerDepoisforamadicionados 90 ml de diluente soro fisiológico ao balão até a balança marcar umvalor próximode100 gdeformaaobter umaconcentraçãode110 1 g de alimento 10 ml de diluente e agitouse a suspensão obtida Logo após em cada um de 5 tubos de ensaio foram colocados 9 ml de diluente utilizando a micropipeta Posteriormente transferiuse 1 ml da suspensãopara um primeiro tubo o qual foi identificado como 102 o correspondente à suadiluição Depois este foiagitado no homogeneizador durante alguns segundos Omesmoprocedimentofoirepetidoparaosoutrostubosatécompletaremseas diluições necessárias Quanto à verificação da presença de coliforme na carne bovina usada com o auxílio da micropipeta foram inoculados num tubo de ensaio 10 ml da suspensãocorrespondente a1 g de alimento com10 mldemeio de Verde Brilhante a concentração dupla sendo a inoculação seguidamente incubada a 37ºC durante 48 horas Quanto àpesquisadecoliformes fecais foraminoculadas algumas gotasentre 05 e 1 ml do meio de Verdebrilhante anteriormente inoculado após obter oresultadopositivocom9mldemeioVerdebrilhanteemconcentração normal Depois incubouse o tubo de ensaio a 445ºC durante 48 horas No tocante à pesquisa de Escherichia Coli procedeuse a inoculação de algumas gotas entre 05 e 1 ml do mesmo meio de Verdebrilhante positivo obtidoatravés do procedimento 7 correspondente à suspensão 110 com 9ml de água depeptonaO tubo de ensaio juntamente com o do procedimento 71 foi incubado àmesma temperatura eduranteo mesmo intervalodetempo 445ºC48horas Após a incubação foram adicionadas 5 a 6 gotas doreagente ErlichmanitaKovacs no tubo de ensaio RESULTADOS E DISCUSSÃO Foram alcançados os seguintes resultados nas pesquisas com a carne crua e com a carnegrelhada Na carne grelhada análise imediata não ocorreu alteração do meio Verde brilhante a concentração dupla o que significa que não estavam presentes em 1 mlda suspensão coliformes e consequentemente também não estavam presentescoliformes fecais nem Escherichia Coli Na carne crua todos os resultados foram positivos Nos tubos de ensaio deVerdebrilhanteconcentraçãonormaleduplausadosfoipossívelobservaraformaçãodegásnotubointerioreaturvaçãodomeiodevidoàpresença de culturas Pela tabela abaixo constatase que de fato a carne grelhada a que foi analisadaimediatamentecontémumnúmerodebactériasmuitoreduzidoemrelação ao da carne crua uma vez que ao ser submetida a elevadas temperaturas a maioria das bactérias morre persistindo apenas alguns esporos Contudo se forconsumida imediatamente estes não terão tempo de se desenvolver minimizandoassimos riscos que os potenciais patogênicos presentesnosalimentos portam CARNE ANALISADA GRELHADA CRUA BACTÉRIA POR GRAMA 2750 147000 PERCENTAGEM 187 10000 Tabela 1 Número debactérias na carne analisada Os resultados da carnecrua foram previsíveis visto que é normal a presença de carga microbianame carne crua Quanto à sanidade do produto este não foi considerado inapropriado para o consumo por tersido submetidoaaltatemperaturapor tempo suficientepara eliminar as bactérias presentesprocedimento recomendado aoconsumodeste tipo de alimento CONCLUSÃO Uma vezqueapenasforamencontradoscoliformescoliformesfecaise Escherichia Coli na carne crua concluímos que todos os coliformes que sejamsubmetidos a temperaturas muito elevadas são eliminados e visto que eles nãoproduzemesporos não podemsubsistir para mais tarde em condições ideaisvoltarem a sereproduzir Portanto a partir do que foi verificado no experimento pode se dizer que é mais seguro consumir carne logo após ser preparada pois eventuais esporos nelapresentesououtrosmicrorganismosdoambientenãotêmtempodese desenvolver que a carne deve ser submetida a temperaturas altas durante um intervalodetempoconsideráveldemodoquetodososmicrorganismosnelespresentes sejam eliminados devese evitar o consumo de carnes mal passadas pois a carnecrua possui umaelevadacarga microbiana R EFERÊNCIAS Fonte 12 espaçamento simples alinhamento à esquerda Fonte 12 espaçamento simples alinhamento à esquerda PINHEIRO Pedro Bactéria Escherichia Coli E Coli MD Saúde São Paulo 14 jun 2011Disponível em httpwwwmdsaudecom201106bacteriaescherichia colihtml Acesso em 17fev 2014 SILVA Carlos Magalhães Estudo Bacteriológicoem Experimentos São Paulo Terramar 2003 VERA Sonia Garcia O Caminhodos Coliformes 2 ed Curitiba Valares 2003