Replicacao do DNA Enzimas Propriedades e Fragmentos de Okazaki - Biologia Celular

ATIVIDADE 2 BILOGIA CELULAR E MOLECULAR II 1 Defina a replicação do DNA qual a enzima chave e qual unidade molecular para construção do DNA A replicação de DNA ocorre por meio de separação das fitas formando o DNA por ação de enzima como a helicase Em seguida tem se a determinação de origens de replicação que possibilitam a atuação das enzimas atuantes no processo e deste modo ocorre ligação ao DNA determinando as bolhas de replicação Ademais ocorre que o DNA circular inicia o processo em determinado ponto o qual tem se que as células eucarióticas se determinem como humanas promovendo a replicação de forma rápida Aliado a isso ocorre que o processo de replicagem se faz em dois sentidos da fita desse modo as helicases separam as cadeias Por meio disto fazse primordial a apresentação em forma de Y e as forquilhas de replicação e assim se utiliza de proteínas ligantes não possibilitando que as cadeias liguem novamente fazendo com que as bases livres se associem em associação de nucleotídeos Por razão de síntese da cadeia com início de porção de RNA aliado a isso temse a denominação de oligonucleotídeo iniciador que se faz por meio de primer 2 Quais as propriedades fundamentais das DNAs polimerases Há tipos de DNA polimerase sendo a DNA polimerase I que repara o DNA e proporciona filamentos de teor tardio há os DNA polimerase II os quais reparam o DNA e o DNA polimerase III se constituindo como principal meio de polimerase envolvida em detrimento de replicação Basicamente todas possuem atividades exonucleásica 3 5Realizando funções de limpeza e eliminado erros ao longo da fita de DNA 3 O que são fragmentos de Okazaki São pequenos fragmentos de DNA que se determinam como fita de DNA por razão de replicação que se chama de Fragmento de Okazaki possibilitando a denominação de polimerase de reparo por meio de ligação entre dessoxirribonucleotídeos que realizam complementação a região anterior do primer 4 Quais as principais enzimas envolvidas na replicação do DNA e suas respectivas funções Ocorre envolvimento de DNA primase DNA polimerase DNA helicase DNA ligase e topoisomerase A DNA primase atua sintetizando a porção de DNA que é o primer Já a DNA polimerase atua por replicação de adição de nova cadeia em bases Já a DNA helicase proporciona a descompactação de dupla hélice reconhecendo as origens de replicação As topoisomerases se definem em introdução de quebra transitória em cadeia e desenrolamento de fitas de DNA 5 Explique os tipos de reparos de DNA Há determinados tipos de reparos como excisão de base união de extremidade incompatibilidade e reparo de fita dupla Acerca do de excisão de bases temos que ocorrer remoção de até 29 nucleotídeos da fita danificada por meio de reconhecimento de fita de DNA distorcida por dímeros de timinatimina gerando luz ultravioleta por proteína XPA XPB e a XPC por meio de endonucleases clivandoas em diferentes locais Já por união de extremidade tem se que ocorre união de duas extremidades de DNA por quebra de fita E desse modo possibilitase que as proteínas diméricas de 80 e 90kda realizem reparos adicionais por meio de complexo de reparo com proteína quinase de DNA e DNA PK com XRCC4 por ligação de proteína p53 Na incompatibilidade tem se que ocorre ressíntese de exclusão com iniciação em possibilidade de quebra de DNA de 100 a 1000 nucleotídeos por meio de incompatibilidade E desse modo tem se que ocorre a MSH2 MSH3 MSH6 MLH1 e a PMS2 Por detrimento de ligação de bases incompatíveis e clivamento de DNA com base errônea possibilitando substituição por meio da polimerase na fita que foi danificada No reparo de fita dupla ocorre a utilização de proteínas de reparo ativando a BRCA1 em locais específicos que é fosforilado e se envolve em transcrição por reparo de DNA no que se acopla a transcrição utilizando a cromátide irmã para alinhamento de ponta quebradas nas quais ocorrem informações conforme proposto 6 O que é a Xeroderma pigmentosa e Sindrome de Cockayne Explique A xeroderma pigmentosa é uma doença que se caracteriza por grande deficiência a sensibilidade causada por radiação ultravioleta desse modo ocorre causa por deficiência em DNA E a Sindrome de Cockayne caracterizase por ser doença multissistemica definida por baixa estatura e sendo de aparência facial característica de envelhecimento que se deifne como prematuro e por razão de fotossensibilidade Ambas são associadas ao DNA REFERENCIAS LEHNINGER T M NELSON D L COX M M Princípios de Bioquímica 6ª Edição 2014 Ed Artmed WATSON J D et al Biologia molecular do gene 5 ed Porto Alegre Artmed 2006 WATSON J D DNA recombinante 3 ed São Paulo Artmed 2009 ATIVIDADE 1 BIOLOGIA CELULAR E MOLECULAR II Roberta Londrini Rossato RGM 11181100520 1 Defina nucleossomo e suas partes Qual a diferença entre nucleossomo e cromatossomo Os nucleossomos podem ser definidos como unidades básicas da estrutura do cromossomo eucariótico Descoberto em 1974 este complexo de DNAproteína tem sua organização estrutural denominada após isolamento do cromatina compactada pelo digestão com nucleases que digerem o DNA clivandoo entre as cores dos nucleossomos Cada partícula do núcleo do nucleossomo individual apresenta um complexo de 8 proteínas histonas mais especificamente 2 de cada molécula de cada histona H2A H2B H3 e H4 além de uma fita dupla de DNA com 147 nucleotídeos Já o cromatossomo se refere ao complexo do nucleossomos ligado a uma 5a histona denominado linker histona H5 Esta histona auxilia na compactação do cromatina sendo portanto fator essencial para a condensação tanto da cromatina quanto da repressão gênica 2 Estabeleça e defina as duas condições que podem ser encontradas a cromatina no núcleo celular A formação da cromatina pode ser caracterizada como uma estratégia natural utilizada para células eucarióticas com a finalidade de compactar fitas de DNA com cerca de 2 m de comprimento dentro do núcleo A cromatina consiste basicamente em DNA e proteínas carregadas positivamente chamadas histonas A cromatina apresenta ainda diferentes hierarquias de compactação do DNA no qual inicialmente observase DNA livre duplahélice depois a formação de fibras de 10 nm a 30 nm menas loops de fibras de cromatina e posteriormente os cromossomos Dessa forma a cromatina pode ser encontrada em duas condições relaxada fibra de 10nm ou compactada fibra de 30nm Sob condições fisiológicas vários fatores influenciam a formação da fibras de 30nm como a presença de linkers histonas e proteínas de ligação ao nucleossomo Além disso o cauda de histona H4 mostrouse essencial na compactação do cromatina uma vez que se liga a regiões ácidas formadas pelo dímero H2AHB do nucleossomos adjacentes unindoos e resultando em uma condensação estrutural relatada 3 O que é centrômero qual a importância do cinetócos e da proteína CENPA Posteriormente à replicação do DNA os dois cromátides irmãs que compõem cada cromossomo permanecem conectados uma à outra condensandose ainda mais para produzir cromossomos mitóticos à medida que o ciclo celular prossegue A presença do segunda sequência especializada em DNA denominada centrômero permite que uma cópia de cada cromossomo condensado e duplicado seja transportado para cada célulafilha no decurso da divisão celular Um complexo proteico denominado cinetócos de forma no centrômero e conecta o fuso mitótico aos cromossomos em replicação permitindo que eles se separem É importante destacar que a proteína CENPA é encarregada pela formação do centrômero de modo que a ausência deste molécula acarreta na perda do cromossomo completo e consequentemente a produção de células com alterados números de cromossomos 4 O que são telômeros sua importância para o DNA e qual a relação do telomerase com os telômeros e a saúde humana A única sequência especializada do DNA origina os telômeros isto é as extremidades dos cromossomos os quais contêm sequências repetitivas de nucleotídeos que replicam eficientemente as extremidades dos cromossomos Os telômeros também têm outra função sequências de DNA repetidas juntamente com regiões adjacentes a elas formam estruturas que impedem que as extremidades dos cromossomos sejam confundidos com moléculas de DNA quebrado que necessitam de reparos Os telômeros que formam os cromossomos humanos consistem em uma sequência curto de nucleotídeos repetidos milhares de vezes TTAGGG Contudo esta sequência fica cada vez menos ao longo do tempo Uma criança por exemplo contém milhares de repetições formando seus telômeros e quando adulto o número já é muito menor e o número de repetições é reduzido Tal encurtamento acontece porque a cada nova multiplicação as células não conseguem reconstruir o comprimento adequado dos telômeros Isso é um caos muito natural que ocorre lento e gradativamente com a idade Quando o comprimento é consideravelmente reduzido os genes ficam desprotegidos e as células não são capazes de se multiplicar com eficiência entrando em estado de senescência Cabe destacar que quando o indivíduo está nos estágios iniciais do desenvolvimento estes estruturas permanecem com o mesmo comprimento mesmo quando o taxa de proliferação celular é muito alta Isso acontece porque o célula recebe uma enzima denominada telomerase que restaure o tamanho dos telômeros ao fim de cada ciclo de multiplicações Porém após o desenvolvimento o telomerase não é mais produzida pela maioria dos tecidos maduros momento em que os telômeros passam a ter seu comprimento reduzido de forma gradual até atingir um ponto em que a célula não se multiplica mais envelhecimento celular Hoje em dia já se fazem relações sobre os telômeros e o qualidade de vida quanto melhor a qualidade de vida menor é a perda de telômeros ou seja quanto mais saudável é o dietao prática de exercícios e atenção à saúde mental menor é o encurtamento e maior o expectativa de vida ING3 AND ING4 IMMUNOEXPRESSION AND THEIR RELATION TO THE DEVELOPMENT OF BENIGN ODONTOGENIC LESIONS httpswwwscielobrjbdjaRynHMZKbdnN6hYZH4tvsbYfabstractlangen A família de genes Inhibitor of Growth ING é um grupo de genes supressores de tumor que desempenham papéis importantes no controle do ciclo celular senescência reparo de DNA proliferação celular e apoptose No entanto a inativação e downregulation dessas proteínas têm sido relatadas em algumas neoplasias O presente estudo teve como objetivo avaliar os perfis imuno histoquímicos das proteínas ING3 e ING4 em uma série de lesões odontogênicas epiteliais benignas Métodos A amostra foi composta por 20 espécimes de ceratocistos odontogênicos OKC 20 ameloblastomas AM e 15 tumores odontogênicos adenomatóides TOA A imunomarcação nuclear e citoplasmática de ING3 e ING4 foram avaliadas semiquantitativamente nas células epiteliais das lesões odontogênicas de acordo com a porcentagem de células imunomarcadas em cada caso Análises descritivas e estatísticas foram computadas e o valor de p foi fixado em 005 Resultados Não foram encontradas diferenças estatisticamente significativas na imunomarcação citoplasmática e nuclear de ING3 entre as lesões estudadas Em contraste os AOTs apresentaram maior marcação citoplasmática e nuclear de ING4 em comparação aos AMs valor p citoplasmático 001 valor p nuclear 0001 e OKCs p nuclearvalor 0007 Conclusão A regulação negativa das proteínas ING3 e ING4 pode desempenhar um papel importante na iniciação e progressão de lesões odontogênicas mais agressivas como AMs e OKCs Síntese Analisa a família de proteínas de IGN3 e de IGN 4 que possui imunomarcação nuclear e citoplasmática desse modo se avalia como o dowregulation dessas proteínas implica no reparo de DNA e também nos impactos de papeis importantes como ciclo celular REPARO DE DNA E CÂNCER NOME DO ALUNO PROFESSOR ARTIGO Brazilian Dental Journal 2021 324 7482 httpdxdoiorg10159001036440202104279 ING3 and ING4 immunoexpression and their relation to the development of benign odontogenic lesions Yailit del Carmen MartinezVargas Tiago João da SilvaFilho Denise Hélen Imaculada Pereira de Oliveira Rani Iani Costa Gonçalo Lélia Maria Guedes Queiroz Fig 1 Capa do artigo 1 REPARO DE DNA O estudo intitulado de Imunoexpressão de ING3 e ING4 e sua relação com o desenvolvimento de lesões odontogênicas benignas discorre sobre os genes ING Os quais são relacionados a reparo de DNA controle do ciclo celular senescência e apoptose Fig2 Reparo de DNA 2 Fig 3 Ciclo celular 3 MECANISMO DE INGS Por meio disso quando ocorre o dowregulation e tem se a formação de tumor lesão odontogênica benigna Desse modo fazse essencial que as INGS estejam ativadas Dowregulation é a diminuição ou inibição de gene ou ativizade enzimática Fig 4 Dowregulation 4 ELUCIDAÇÃO O estado de expressão do mRNA relacionado ao ING é frequentemente alterado no tecido neoplásico Isso ocorre para todos os membros da família de genes supressores de tumor ING incluindo ING3 e ING4 Assim determinou o papel das proteínas ING3 e ING4 no desenvolvimento de lesões odontogênicas epiteliais benignas bem como uma possível relação com o comportamento biológico Fig 5 Tipos de tecido 5 CONCLUSÃO SOBRE AS PROTEÍNAS ING3 E ING4 ING3 no crescimento e autorenovação em certas doenças como câncer A frequência de alterações observadas nos níveis de mRNA de ING3 e ING4 devese a perdas alélicas da região genômica e redução da estabilidade do mRNA O aumento da expressão citoplasmática de ING3 está relacionado a perdas de expressão nuclear em diversas neoplasias A redução da imunomarcação nuclear de ING3 está relacionada à progressão do melanoma humano e serve como um marcador prognóstico promissor e alvo terapêutico para essa malignidade A superexpressão de ING4 interrompe a distribuição do ciclo celular diminuindo o número de células na fase S O ING4 pode atuar na supressão tumoral sem afetar o ciclo celular ainda regulando a transcrição de genes envolvidos no controle de várias funções celulares ARTIGO ONCOLOGY LETTERS SPANDIDOS PUBLICATIONS Oncol Lett 2017 Mar 133 16311636 PMCID PMC5403501 Published online 2017 Jan 23 doi 103892ol20175632 PMID 28454301 Immunohistochemical profile of ING3 protein in normal and cancerous tissues WenFeng Gou XueFeng Yang DaoFu Shen Shuang Zhao HongZhi Sun JunSheng Luo and HuaChuan Zheng Author information Article notes Copyright and License information Disclaimer Fig 6 Capa do artigo 6 INTRODUÇÃO O inibidor da família de crescimento proteína do membro 3 ING3 pode ser capaz de bloquear o ciclo celular por meio da ativação de promotores transativados de p53 da proteína X associada a p21 e Bcl2 e pode induzir apoptose por meio de uma via de sinalização dependente de Fascaspase8 A expressão de ING3 estava restrita ao citoplasma e ao núcleo excluindo a distribuição citoplasmática identificada na mama e carcinoma hepatocelular CANCÊR E AS INGS O ING3 foi mais frequentemente expresso em tipos de câncer de mama e ginecológicos incluindo câncer de ovário 592 endométrio 479 mama 389 e cervical 355 Os casos positivos para ING3 foram mais raros em células claras renais 177 hepatocelular 161 e carcinoma esofágico 178 Fig 7 Célula de câncer 7 MECANISMO A família do inibidor de crescimento ING é composta por cinco membros com várias isoformas devido ao splicing alternativo Suas proteínas codificadas compreendem um homeodomínio vegetal altamente conservado PHD uma forma Cys 4 HisCys 3 de dedo de zinco que interage diretamente com a histona H3 e uma sequência de localização nuclear NLS Fig 8 Spicling 8 MECANISMO A proteína ING3 foi detectada positivamente no citoplasma de cardiomiócitos rim e células do músculo esquelético Uma distribuição citoplasmática e nuclear da proteína ING3 foi observada no epitélio brônquico e alveolar células gástricas intestinais e das glândulas mamárias A proteína ING3 foi expressa no cérebro baço pele e fígado de forma esporádica Fig 9 Mecanismo 9 CONCLUSÃO o presente estudo esclareceu a expressão diferencial eou localização subcelular de ING3 em vários tecidos tipos de células e células únicas em tecidos normais de camundongos e humanos e tecido de câncer humano sugerindo envolvimento funcional diferencial Com base nos resultados do presente estudo levantase a hipótese de que o ING3 pode estar envolvido na reparação e regeneração de órgãos ou tecidos podendo ter um papel significativo na carcinogénese ginecológica Fig 10 Tipos de tecidos 10 Referencias GOU WF et al Immunohistochemical profile of ING3 protein in normal and cancerous tissues Oncology Letters v 13 n 3 p 16311636 23 jan 2017 MARTINEZVARGAS Y DEL C et al ING3 and ING4 immunoexpression and their relation to the development of benign odontogenic lesions Brazilian Dental Journal v 32 n 4 p 7482 ago 2021 Perfil imunohistoquímico da proteína ING3 em tecidos normais e cancerosos httpswwwncbinlmnihgovpmcarticlesPMC5403501 textING320immunoreactivity20was20strongly 20detectedtested20cancer20entities2035525 O inibidor da família de crescimento proteína do membro 3 ING3 pode ser capaz de bloquear o ciclo celular por meio da ativação de promotores transativados de p53 da proteína X associada a p21 e Bcl2 e pode induzir apoptose por meio de uma via de sinalização dependente de Fascaspase8 No presente estudo a imunohistoquímica foi realizada para caracterizar o perfil de expressão da proteína ING3 em microarranjos de tecido contendo tecido normal de camundongo e humano hepatocelular humano n62 células claras renais n62 pancreático n62 células escamosas esofágicas n45 células escamosas cervicais n31 mama n144 gástrica n196 colorretal n96 ovariana n208 endometrial n96 e carcinoma de pulmão n192 Em tecido de camundongo a proteína ING3 foi detectada positivamente no citoplasma de cardiomiócitos células renais e musculares esqueléticas e foi detectado adicionalmente no citoplasma e núcleo do epitélio brônquico e alveolar glândula gástrica e intestinal e células da glândula mamária Nos tecidos humanos a proteína ING3 foi distribuída principalmente no citoplasma mas foi observada no citoplasma e núcleo da língua esôfago estômago intestino pulmão pele apêndice bexiga colo do útero e células da mama A imunorreatividade de ING3 foi fortemente detectada no estômago pele e tecidos cervicais enquanto um sinal fraco foi detectado no cerebelo tronco cerebral timo fígado músculo esquelético testículos e próstata No total amostras positivas para ING3 foram identificadas em 424 de 1194 entidades cancerosas testadas 355 Em vários casos observouse que a expressão de ING3 estava restrita ao citoplasma e ao núcleo excluindo a distribuição citoplasmática identificada na mama e carcinoma hepatocelular Entre esses casos o ING3 foi mais frequentemente expresso em tipos de câncer de mama e ginecológicos incluindo câncer de ovário 592 endométrio 479 mama 389 e cervical 355 Os casos positivos para ING3 foram mais raros em células claras renais 177 hepatocelular 161 e carcinoma esofágico 178 Sugerese que ING3 pode estar envolvido no reparo e regeneração de órgãos ou tecidos e pode estar intimamente associado à carcinogênese ginecológica 1 e carcinoma esofágico 178 Sugerese que ING3 pode estar envolvido no reparo e regeneração de órgãos ou tecidos e pode estar intimamente associado à carcinogênese ginecológica 1 e carcinoma esofágico 178 Sugerese que ING3 pode estar envolvido no reparo e regeneração de órgãos ou tecidos e pode estar intimamente associado à carcinogênese ginecológica Síntese Nesse artigo se avalia a real influencia de IGN3 desse modo por meio do estudo histoquímico tem se que ING3 pode estar envolvido no reparo e regeneração de órgãos ou tecidos e pode estar intimamente associado à carcinogênese ginecológica Porque como elucidado pode estar envolvido no reparo e regeneração de órgãos ou tecidos Já que atua como capaz de bloquear o ciclo celular por meio da ativação de promotores transativados de p53 da proteína X associada a p21 e Bcl2 e pode induzir apoptose por meio de uma via de sinalização