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REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 174 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA CURCUMA LONGA L SOBRE ESCHERICHIA COLI ARTIGO ORIGINAL BANDEIRA Debora Marina1 MARCHI Juliana Pelissari2 GOMES Simone Damasceno3 PELLIZZARO Luciana4 BANDEIRA Debora Marina et al Atividade antimicrobiana da Curcuma longa L sobre Escherichia coli Revista Científica Multidisciplinar Núcleo do Conhecimento Ano 08 Ed 04 Vol 03 pp 0516 Abril de 2023 ISSN 24480959 Link de acesso httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividade antimicrobiana DOI 1032749nucleodoconhecimentocombrbiologiaatividade antimicrobiana RESUMO Curcuma longa é uma planta que tem se destacado em pesquisas que avaliam atividade antimicrobiana antinflamatória antiprotozoária anticarcinogênica e antifúngica A descoberta de novas alternativas para desenvolvimento de fármacos com origem em princípios ativos de plantas se faz necessária considerando a alta capacidade adaptativa dos diferentes microrganismos Dessa forma o presente estudo teve por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos da oleoresina e da suspensão de pó de rizomas de Curcuma longa frente à bactéria Escherichia coli Neste estudo não foi observada atividade antimicrobiana para os extratos da cúrcuma em pó e da oleoresina frente à Escherichia coli Verificase na literatura uma grande variedade de resultados obtidos frente a testes com C longa sobre os diferentes microrganismos sendo alguns positivos demonstrando ação antimicrobiana e outros negativos Essa divergência se justifica por fatores como diferentes metodologias utilizadas clima tipos de solo adubação disponibilidade hídrica do cultivo da planta bem como a forma de colheita e armazenamento os quais interferem nos componentes presentes e em sua concentração na planta Embora os resultados deste estudo tenham sido negativos não significa que a planta não possua atividade antimicrobiana sendo indicada a continuidade nos ensaios visando identificar os fatores que geram discordância entre os estudos já realizados REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 175 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Palavraschave Produtos naturais Óleo resina Pó de cúrcuma Curcumina Atividade antimicrobiana 1 INTRODUÇÃO Produtos naturais têm sido utilizados ao longo da História no tratamento e prevenção de doenças Atualmente eles vêm ganhando grande importância nas pesquisas para a elaboração de fármacos de origem natural Vários grupos de pesquisadores têm estudado a atividade biológica de plantas medicinais originárias de diversas partes do mundo guiados pelo uso popular das espécies nativas SILVA FILHO et al 2009 SANTOS et al 2021 BANDEIRA et al 2022 Uma planta que além de ser utilizada na culinária tem estado presente nas pesquisas das áreas farmacológicas é Curcuma longa L conhecida popularmente por açafrão ou cúrcuma É uma planta herbácea pertence à família Zingiberaceae nativa do sudeste asiático mais precisamente das florestas tropicais da Índia país de maior produção mundial PEREIRA STRINGHETA 1998 FRANCO et al 2007 SABIR et al 2021 A parte do vegetal com maior utilização é o rizoma no qual são encontradas as substâncias responsáveis pelo seu valor mercadológico e ação terapêutica COLLINO 2014 São três os pigmentos curcuminoides presentes no rizoma a curcumina principal composto responsável pelas várias atividades da planta a desmetoxicurcumina e a bisdesmetoxicurcumina SILVA FILHO et al 2009 SABIR et al 2021 Pereira e Stringheta 1998 explicam que a cúrcuma possui três produtos disponíveis comercialmente o pó de cúrcuma a oleoresina de cúrcuma e o extrato de curcumina Pesquisas com C longa comprovaram sua atividade antimicrobiana MAIA et al 2003 KALAYCIOGLU et al 2017 antinflamatória antioxidante antiprotozoária anticarcinogênica e antifúngica AKRAM et al 2010 MARCHI et al 2016 Frente à resistência que os microrganismos patogênicos têm desenvolvido surge a REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 176 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana necessidade e o incentivo pela procura de fármacos de origem natural BANDEIRA et al 2022 A bactéria E coli por exemplo é um microrganismo comensal presente no intestino de mamíferos e aves que tem sido apontado como um dos agentes bacterianos mais frequentes em diarreias de seres humanos e animais podendo ocasionar em seres humanos diversas infecções incluindo a meningite FERREIRA KNÖBL 2009 ALMEIDA 2013 A alta capacidade adaptativa dos microrganismos torna a pesquisa sobre o seu comportamento essencial para a saúde pública A Organização Mundial da Saúde OMS divulgou recentemente a primeira lista de agentes patogênicos prioritários resistentes a antibióticos com 12 famílias de bactérias que representam a maior ameaça para a saúde humana Nesta lista destacase em particular a ameaça de bactérias gramnegativas resistentes a múltiplos antibióticos como é o caso da E coli que junto a outras Enterobacteriaceae estão na lista como prioridade 1 ou seja crítica resistente a carbapenema e cefalosporinas de terceira geração os melhores antibióticos disponíveis para tratamento de bactérias multirresistentes OMS 2018 Além disso a E coli apresenta entre 8 e 65 variável entre diferentes países de resistência à ciprofloxacina um antibiótico comumente usado para tratar infecções do trato urinário OMS 2017 Assim fazse necessária a descoberta de novas alternativas para o desenvolvimento de fármacos com origem nos princípios ativos de algumas plantas Neste contexto este estudo objetivou avaliar a atividade antimicrobiana do extrato da oleoresina e da suspensão de pó de rizomas de C longa sobre a bactéria E coli tendo em vista serem produtos já à disposição dos consumidores REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 177 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 2 MATERIAL E MÉTODOS O estudo foi realizado no Laboratório de Microbiologia da Universidade Paranaense Unidade Universitária de Francisco Beltrão sendo a parte experimental realizada de maio a outubro de 2018 Os rizomas de Curcuma longa foram adquiridos no comércio de Francisco Beltrão Paraná Foram lavados higienizados em água corrente descascados fatiados na espessura de aproximadamente 05 cm Após isto as fatias foram secas em estufa a 50 ºC até a verificação de massa constante O período total de secagem foi de aproximadamente um mês O peso de massa constante foi de 51663 g Após a secagem o pó foi obtido pela trituração dos rizomas em liquidificador doméstico seguido de peneiramento por quatro malhas de diferentes espessuras O pó foi acondicionado em sacos plásticos duplos uma camada de papel kraft e outra de saco plástico até sua utilização e mantido em ambiente seco MARCHI 2018 O pó do rizoma de cúrcuma foi dividido em 180 g para ser feito o extrato alcoólico para a obtenção da oleoresina OR e 17324 g para obtenção da suspensão do pó SP Para obtenção da OR iniciouse fazendo um extrato bruto EB sendo utilizado o processo de maceração com álcool etílico a 70 em temperatura ambiente PEREIRA STRINGHETA 1998 RODRIGUES et al 2016 Foram usados 180 g de pó de cúrcuma para 540 ml de álcool 70 13 mv de plantasolvente o material foi homogeneizado com auxílio de bastão de vidro envasado em recipiente de vidro envolvido por papel alumínio etiquetado para identificação nome data hora e armazenado em local escuro por 15 dias com agitação diária Decorridos quinze dias o EB foi filtrado a vácuo Para isso um funil de Buchner foi acoplado a um kitassato com borracha para completa vedação e do kitassato REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 178 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana seguiu uma mangueira até a bomba de vácuo Após a montagem do equipamento o funil recebeu dois papéis filtro na forma de círculo no qual foi depositado o EB Em seguida o aparelho foi ligado e ocorreu a sucção do EB pela bomba permitindo a sua filtração O filtrado foi direcionado para o interior do kitassato obtendose a tintura contendo álcool totalizando 350 ml O material sólido que ficou retido no papel filtro foi posteriormente descartado MARCHI 2018 A tintura obtida foi colocada em rotaevaporador para remoção do álcool etílico Para tanto a tintura foi colocada em balão de fundo chato que foi conectado ao rotaevaporador e aquecido em banhomaria a uma temperatura de 45 5 ºC O procedimento foi realizado até que 15 da tintura estivesse no balão sendo a partir de então denominada OR 20 O material foi acondicionado em tubos de falcon envolvidos em papel alumínio e armazenados em refrigerador até a diluição para a montagem do experimento MARCHI 2018 Com relação à OR o preparo puro obtido após a rotaevaporação foi considerado como 100 e está diluído nas concentrações de 50 25 125 e 625 em Tween 80 a 01 Para preparo da suspensão do pó a 20 foi feita a adição de 1875 g de pó em 75 ml de uma solução estéril de Tween 80 01 conforme metodologia usada por Dornellas 2016 Cepas de Escherichia coli foram adquiridas e reconstituídas de acordo com a indicação do fornecedor As culturas microbianas foram padronizadas em 108 célulasml estimadas por comparação ao tubo 05 da escala McFarland Para o ensaio adotouse o Método de Difusão por Plugue de Ágar adaptado de Kurtzman Jr 1973 e Harris e Ruger 1953 que consiste em remover um pedaço do meio de cultura do local correspondente ao repique após o período de incubação e colocálos na superfície do meio de cultura inoculado com o material a ser testado onde após isso se observará a inibição de crescimento em função da difusão do produto a ser testado eou do antibiótico a partir do plugue Assim foram utilizadas REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 179 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana placas de Petri de 100 x 20 mm de diâmetro nas quais foram acrescentados 200 ml de ágar Muller Hinton preparados conforme a indicação na embalagem Após serem homogeneizadas e deixadas em repouso até a solidificação com um swab estéril foi inoculada a cultura de E coli uniformemente sobre a superfície do ágar as placas que foram deixadas em repouso em temperatura ambiente por aproximadamente três minutos Paralelamente foram preparadas das placas contendo 150 ml de meio esterilizado mais 50 ml de suspensão em pó ou OR previamente diluídos em suas concentrações 31 meioextrato A mistura foi homogeneizada e se aguardou a solidificação Depois foram removidos os plugues recortes cilíndricos de cada uma dessas placas para o meio contendo o inóculo Em cada placa foram transferidos cinco plugues em suas devidas concentrações da maior para menor de OR 100 50 25 125 e 625 bem como plugues com controle positivo utilizando amoxicilina e cloranfenicol e com controle negativo utilizando Tween 80 a 01 O experimento foi realizado em quintuplicata e as placas incubadas à temperatura 40 3 ºC por 24 horas MARTINS 2010 MINAGAWA 2007 Para a análise da SP seguiuse o mesmo procedimento porém adicionando às placas com meio de cultura e inócuo plugues contendo a SP a 20 nas mesmas concentrações da OR 100 50 25 125 e 625 Após o intervalo de 24 horas a mensuração dos halos de inibição quando formados foi realizada com paquímetro de acordo com os critérios preconizados pelo National Committe for Clinical Laboratory Standards NCCLS 2003 REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 180 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Neste estudo não foi observada atividade antimicrobiana para os extratos da suspensão do pó da cúrcuma SP e da oleoresina OR frente à bactéria Escherichia coli em nenhuma das concentrações testadas Figura 1 Figura 1 Comparação de presença ou não de halos de inibição A Placa de Petri com plugues nas cinco concentrações B Placa de Petri com controle positivo amoxicilina apresentando halos de inibição Fonte A autora 2018 Essa não inibição da E coli por produtos da cúrcuma foi testada em outros estudos PéretAlmeida 2006 por exemplo avaliou a atividade antimicrobiana da cúrcuma em pó dos pigmentos curcuminoides e do óleo essencial de cúrcuma Nesse experimento apenas o óleo essencial teve atividade antimicrobiana sobre E coli Bacillus subitilis Salmonella enterica Choleraesuis Aspergillus niger e Saccharomyces cereviseae O mesmo foi observado nos estudos de Norajit et al 2007 Araújo et al 2015 e Franco et al 2007 os quais também testaram produtos da cúrcuma e não houve atividade contra a E coli A não ação da C longa REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 181 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana contra E coli pode ser justificada por peculiaridades próprias da bactéria ou da planta Quanto à E coli assim como outras bactérias acreditase que o potencial patogênico e resistente de algumas cepas se deve a ganhos genéticos ocorridos durante o processo evolutivo da espécie devido à aquisição de genes de virulência por meio de mutações ou transferência horizontal de material genético que as fez desenvolver mecanismos complexos de resistência VIEIRA 2009 Estes genes de virulência provenientes de materiais genéticos extracromossômicos plasmídeos codificam proteínas que possibilitam colonização penetração e invasão de novos espaços por algumas bactérias CORRÊA 2012 dificultando o controle Da mesma forma a atividade antimicrobiana para bactérias gram negativas é menor quando exposta a alguns antimicrobianos associando esse fato à presença da membrana externa na estrutura das bactérias o que pode restringir a penetração de determinadas substâncias SINGH et al 2002 GUL et al 2004 Embora isso curcumina livre pigmento presente na cúrcuma e microcristais de curcumina apresentaram atividade antimicrobiana sobre E coli Staphylococcus aureus Bacillus cereus e Pseudomonas aeruginosa SANTOS 2015 DORNELLAS 2016 A curcumina também foi efetiva em outro estudo contra bactérias gram negativas como E coli e S chorelaesuis TAKEUCHI 2012 O extrato etanólico e o óleo essencial da C longa também agiram contra cepas padrões e isolados clínicos de E coli tendo o extrato etanólico provocado maior inibição em comparação ao óleo ÀLVAREZ et al 2016 Neste contexto é possível perceber que o extrato etanólico e a curcumina foram mais efetivos contra E coli Isso pode ser explicado pela concentração de curcumina que varia nos rizomas de uma planta para outra pois Pereira e Stringheta 1998 apontaram uma concentração média de curcumina de 25 e Chassagnez REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 182 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Corrêa e Meireles 1997 de 64 A diferença de concentração frequentemente está associada à composição dos rizomas ou à forma como é extraída Assim a espécie de cúrcuma aqui avaliada pode ter apresentado baixa concentração de curcumina influenciando na não atividade antimicrobiana Tendo em vista que não foi feita a análise fitoquímica para C longa usada neste ensaio não se pode confirmar essa hipótese Com relação à utilização da OR temse o intuito de concentrar os compostos curcuminoides em relação ao rizoma da planta moída em pó pois elimina o amido presente em maior quantidade no rizoma 25 a 50 NAGHETINI 2006 SABIR et al 2021 Assim há possibilidade de que a OR seja mais efetiva na sua ação antimicrobiana porém neste estudo isto não se confirmou Vários são os fatores que podem influenciar na concentração de componentes ativos nos produtos da cúrcuma A temperatura de extração e o tamanho das partículas apresentam influência significativa no rendimento da extração de curcumina com etanol conforme estudo realizado por Peron et al 2010 com OR de cúrcuma A temperatura de secagem a 70 ºC favoreceu a extração de OR bem como contribuiu para a manutenção de curcumina na matériaprima CHASSAGNEZ CORRÊA e MEIRELES 1997 A temperatura de secagem e rotaevaporação da OR deste estudo variou de 40ºC a 50ºC o que pode ter influenciado nas concentrações de curcumina porém essa possibilidade só poderia ser comprovada mais uma vez mediante análises fitoquímicas As condições de solo e de cultivo também interferem no teor de curcumina dos rizomas Peron et al 2010 comprovaram existir diferença significativa de 95 entre os rizomas cultivados em Piracicaba comparados aos rizomas cultivados em Monte Alegre do Sul ambas cidades paulistas Além disso há o método de extração utilizado que interfere nas diferenças físico químicas dos produtos das plantas Naghetini 2006 observou que a extração com REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 183 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana hexano foi mais simples rápida e de rendimento maior quando comparada com a hidrodestilação Já Pereira e Stringheta 1998 afirmam que álcool etílico e acetona são indicados como bons solventes sendo a acetona o solvente mais utilizado mesmo apresentando alguns problemas de inflamabilidade e alto custo para sua recuperação a fim de livrar o produto da sua presença Um estudo feito por Krishnamurthy et al 1976 sobre processos de extração dos curcuminoides com acetona etanol e dicloro etileno concluíram que a acetona se apresentou mais eficiente do que o etanol e o dicloro etileno fornecendo um produto contendo 42 de curcuminoides Indicando assim que o etanol solvente utilizado nesse estudo possa não ser tão eficaz na extração dos compostos necessários para a ação antimicrobiana 4 CONCLUSÃO Os extratos em pó e OR produzidos a partir de Curcuma longa comercializados em Francisco Beltrão Paraná não apresentaram atividade antimicrobiana para cepas de Escherichia coli Este resultado pode estar atrelado a diversos fatores como a possível resistência da bactéria aos compostos da planta ou as condições ambientais e de manejo como temperatura tipo de solo adubação disponibilidade hídrica época de colheita e tempo de armazenamento que podem influenciar na composição química e na concentração de componentes da SP e da OR que foram efetivos em outros estudos como a curcumina Sugerese uma continuidade nos ensaios visando identificar qual ou quais são os fatores que causam discordâncias com a literatura bem como a análise dos componentes presentes nos produtos testados REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 184 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 5 AGRADECIMENTOS Agradecemos a Universidade Paranaense pelo ambiente de estudo proporcionado a professora Orientadora Luciana Pellizzaro por todo tempo investido na realização deste trabalho a professora Coorientadora Juliana Pelissari Marchi pela experiência no assunto e auxílio na realização deste trabalho e a professora Simone pelo incentivo em publicar meu trabalho REFERÊNCIAS AKRAM M UDDIN S AHMED F USMANGHANI K HANNAN A MOHIUDDIN E ASIF M Curcuma longa and Curcumin A review article Romanian Journal Biology Plant Biology Bucharest vol 55 n 2 p 6570 2010 ALMEIDA A M S Características biológicas e antigênicas de Escherichia coli com ênfase aos genes de virulência Seminário PósGraduação em Ciência Animal Universidade Federal de Goiás Goiânia 2013 30 f ÀLVAREZ N M ORTÍZ A A MARTÍNEZ C O Atividad antibacteriana in vitro de Curcuma longa Zingiberaceae frente a bactérias nosocomiales em Montería Colombia Revista Biologia Tropical vol 64 n 3 p 12011208 2016 ARAÚJO R G M ASSIS D LEMES S R MELOREIS P R ARAÚJO L A PAIVA E S SILVA C B Avaliação da atividade antimicrobiana do óleo essencial do açafrão Curcuma longa estudo de caso PUC Goiânia vol 42 n 4 p 425431 2015 BANDEIRA D M CORRÊA J M LASKOSKI L V BATISTA J M ROSSET J COSTA W F KUO L H PINTO F G S Extraction characterization of bioactive compounds and biological activities of the leaves of Podocarpus lambertii Klotzch ex Endl J Appl Res Med Aromat Plantas n 31 p 100427 2022 CHASSAGNEZ A L M CORRÊA N C F MEIRELES M A A Extração de oleoresina de cúrcuma Curcuma longa L com CO² surpercrítico Ciênc e Tecnol de Aliment Campinas vol 17 n 4 1997 COLLINO L Curcumina de especiaria a nutracêutico Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Farmacêutica Bioquímica Universidade Estadual Paulista Araraquara 2014 88f REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 185 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana CORRÊA F A F Características dos patótipos de E coli e implicações de E coli patogênica para aves em achados de abatedouros frigoríficos Seminário Pós Graduação em Ciência Animal Universidade Federal de Goiás Goiânia 2012 37 f DORNELLAS F C Atividade antifúngica de Curcuma longa L Zingiberaceae contra fungos deteriorantes de pães Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Tecnologia em Alimentos Universidade Tecnológica Federal do Paraná Campo Mourão 2016 39 f FERREIRA A J P KNÖBL T Enfermidades bacterianas In JÚNIOR BERCHIERI A et al Doenças das aves 2ª Ed Campinas Facta 2009 pp 457 474 FRANCO A L P OLIVEIRA T B FERRI P H BARRA M T PAULA J R Avaliação da composição química e atividade antibacteriana dos óleos essenciais de Aloysia gratíssima Gillies Hook Tronc alfazema Ocimum gratissimum L alfavacacarvo e Curcuma longa L açafrão Rev Eletrônica de Farmácia vol 5 n 2 p 22888 2007 GUL N AHMAD S MUJAHID Y T Studies on the Antibacterial Effect of Different Fractions of Curcuma longa against urinary tract infection isolantes Pak J Biol Sci vol 7 n 12 p 205560 2004 HARRIS D A RUGER M L Microbiological aspects of new antibiotic screening A plug test procedure Antibiotics Chemotherapy vol 3 n 1 p 26570 1953 KALAYCIOGLU Z TORLAK E AKINEVINGÜR G ÖZEN İ ERIM FB Antimicrobial and physical properties of chitosan films incorporated with turmeric extract International Journal of Biological Macromolecules vol 101 n 1 p 882888 2017 KRISHNAMURTHY N MATHEW A G NAMBUDIRI E S SHIVASANKAR S LEWIS Y S NATARAJAN C P Oil and oleoresin of turmeric Tropical Science vol 18 n 37 p 3745 1976 KURTZMAN JR R H AgarPlug cutter and inoculation device Mycologia vol 65 n 1 p 23639 1973 MAIA S R FERREIRA A C ABREU L R Uso do açafrão Curcuma longa L na redução da Escherichia coli ATCC 25992 e Enterobacter aerogenes ATCC 13048 em ricota Lavras UFLA 2003 MARCHI J P TEDESCO L MELO A C FRASSON A C FRANÇA A C SATO S W LOVATO E C W Curcuma longa L o açafrãodaterra e seus REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 186 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana benefícios medicinais Arquivo de Ciências da Saúde UNIPAR Umuarama vol 20 n 3 p 18994 2016 MARCHI J P Composição química e atividade antioxidante de duas preparações de extrato de rizomas de Curcuma longa L Dissertação Mestrado Profissional em Plantas Medicinais e Fitoterápicos na Atenção Básica da Universidade Paranaense Universidade Paranaense Umuarama 2018 MARTINS A L G A Atividade antibacteriana dos óleos essenciais do manjeirão Ocimum basilicum Linnaeus e do gengibre Zingiber officinale Roscoe frente a linhagens de Escherichia coli enteropatogênicas isoladas de hortaliças Tese Doutorado em Ciência e Tecnologia de Alimentos Universidade Federal da Paraíba João Pessoa 2010 110 f MINAGAWA C W Estudo microbiológico fecal de linhagens de camundongos de estirpe de E coli e do meio ambiente em biotérios Dissertação Mestrado em Medicina Veterinária Universidade de São Paulo São Paulo 2007 108 f NAGHETINI C C Caracterização físicoquímica e atividade antifúngica dos óleos essenciais da cúrcuma Dissertação Mestrado em Ciências de Alimentos Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte 2006 NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS NCCLS Performance standards for antimicrobial susceptibility testing tenth informational suplemente M100S10 Wayne 2003 NORAJIT K LAOHAKUNJIT N KERDCHOECHUEN O Antibacterial effect of five Zingiberaceae essential oils Molecules vol 12 n 8 p 204760 2007 ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE OMS Novos dados revelam níveis elevados de resistência aos antibióticos em todo o mundo OMS 2018 Disponível em httpswwwpahoorgptnoticias2912018novos dadosrevelamniveiselevadosresistenciaaosantibioticosemtodo mundotext2920de20janeiro20de202018de20alta20e20baixa 20renda Acesso em 16 abr 2018 ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE OMS OMS publica de bactérias para as quais se necessitam novos antibióticos urgentemente OMS 2017 Disponível em httpswwwpahoorgptnoticias2722017omspublicalistabacteriasparaquais senecessitamnovosantibioticos Acesso em 16 abr 2018 PEREIRA A S STRINGHETA P C Considerações sobre a cultura e processamento do açafrão Hortic Bras Brasília vol 16 n 2 p 1025 1998 REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 187 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana PÉRETALMEIDA L Caracterização de pigmentos da Curcuma longa L avaliação da atividade antimicrobiana morfogênese in vitro na produção de curcuminoides e óleos essenciais Tese Doutorado em Ciência de Alimentos Faculdade de Farmácia Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte 2006 120 f PERON I L CARVALHO P R N DA SILVA M G AZEVEDO FILHO J A De PINHEIRO J B SIGRIST M S ZUCCHI M I Avaliação dos teores de curcumina em diferentes acessos de Cúrcuma Curcuma longa L 2010 Anais Campinas Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Universidade de São Paulo 2010 RODRIGUES R R GONZÁLEZ M E L QUEIROZ A A A de Eletrossíntese e caracterização de poli 2hidroxietilmetacrilato contendo curcuminoides Dissertação Mestrado em Materiais para Engenharia Universidade Federal de Itajubá Itajubá 2016 90 f SABIR S M ZEB A MAHMOOD M ABBAS SR AHMAD Z IQBAL N Phytochemical analysis and biological activities of ethanolic extract of Curcuma longa rhizome Brazilian Journal of Biology Revista Brasileira de Biologia vol 81 n 3 p 737740 2021 SANTOS F D P Avaliação da atividade antimicrobiana de microcristais de curcumina Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Engenharia de Alimentos Universidade Tecnológica Federal do Paraná Campo Mourão 2015 36 f SANTOS V C MALLMANN A P TOLEDO G A BANDEIRA D M CONCEIÇÃO L H S M CORRÊA J M PINTO F G S Phytochemical prospection antioxidant and antimicrobial activities of leaves extracts from Myrcia palustris DC Int J Dev Res n 11 p 4472444729 2021 SINGH G SINGH O P MAURYA S Chemical and biocidal ivestigations on essential oils of some Indian Curcuma species Progress in crystal growth and charecterization of materials vol 45 n 1 p 7581 2002 SILVA FILHO C R M SOUZA A G CONCEIÇÃO M M SILVA T G SILVA T M S RIBEIRO A P L Avaliação da bioatividade de extratos cúrcuma Curcuma longa L Zingiberaceae em Artemia salina e Biomphalaria glabrata Ver Bras de Farmacogn São Paulo vol 19 n 4 p 91923 2009 TAKEUCHI A P Caracterização antimicrobiana de componentes do açafrão Curcuma Longa L e elaboração de filmes ativos com montimorilonita e óleo resina de açafrão Dissertação Mestrado Programa de PósGraduação em Ciências e Tecnologia de Alimentos Universidade Federal de Goiás Goiânia 2012 59 f REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 188 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana VIEIRA M A M Ilhas de patogenicidade O mundo da saúde São Paulo vol 33 n 4 p 406 14 2009 Enviado 23 de Fevereiro 2023 Aprovado 10 de Março 2023 1 Mestre em Conservação e Manejo de Recursos Naturais ORCID 0000000159567210 Currículo Lattes httpslattescnpqbr5619420533247630 2 Mestra em Plantas Medicinais e Fitoterápicos na Atenção Básica ORCID 0000000277790253 Currículo Lattes httplattescnpqbr3593944907268063 3 Doutora em Agronomia ORCID 0000000176398500 CURRÍCULO LATTES httplattescnpqbr3362104483832351 4 Orientadora Mestre em Ciências Ambientais ORCID 0000000317019763 CURRÍCULO LATTES httplattescnpqbr9146011936057512 MULTIDISCIPLINARY SCIENTIFIC JOURNAL REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA CURCUMA LONGA L SOBRE ESCHERICHIA COLI ARTIGO ORIGINAL BANDEIRA Debora Marina1 MARCHI Juliana Pelissari2 GOMES Simone Damasceno3 PELLIZZARO Luciana4 BANDEIRA Debora Marina et al Atividade antimicrobiana da Curcuma longa L sobre Escherichia coli Revista Científica Multidisciplinar Núcleo do Conhecimento Ano 08 Ed 04 Vol 03 pp 0516 Abril de 2023 ISSN 24480959 Link de acesso httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana DOI 1032749nucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Contextualização da Curcuma longa Curcuma longa conhecida como açafrão daterra é uma planta amplamente utilizada na medicina tradicional e na culinária devido às suas propriedades medicinais e aromáticas Estudos prévios sugerem que compostos bioativos presentes na cúrcuma como curcuminoides e óleos essenciais possuem potencial antimicrobiano Principais compostos ativos da Curcuma longa Curcuminoides especialmente curcumina são os principais constituintes ativos da cúrcuma Estes compostos são conhecidos por suas propriedades antioxidantes anti inflamatórias e antimicrobianas que têm sido objeto de diversos estudos científicos Objetivo da pesquisa Avaliar a atividade antimicrobiana da cúrcuma longa contra Escherichia coli Investigar a eficácia de diferentes concentrações de oleoresina OR e suspensão em pó SP de cúrcuma longa através de testes de sensibilidade Metodologia Utilização de placas de Petri contendo ágar Muller Hinton para testes de sensibilidade Inoculação uniforme de Escherichia coli nas placas após a solidificação do meio Aplicação de diferentes concentrações de OR e SP de cúrcuma longa em quintuplicata Controles positivos amoxicilina e cloranfenicol e negativo Tween 80 a 01 foram utilizados para comparação Resultados da atividade antimicrobiana Não foram observados halos de inibição significativos nas concentrações testadas de OR e SP Comparação com os controles positivos revelou diferenças na eficácia antimicrobiana contra Escherichia coli Discussão A ausência de atividade antimicrobiana observada pode ser atribuída a várias razões possíveis como variações na composição química dos extratos testados ou às especificidades genéticas e de parede celular da Escherichia coli estudada Este resultado contrasta com estudos anteriores que mostraram efeitos antimicrobianos positivos da curcumina e seus derivados em diferentes condições experimentais Comparação com Estudos Anteriores Estudos anteriores mostraram resultados variáveis quanto à atividade antimicrobiana da cúrcuma longa contra diferentes cepas bacterianas Variações nos métodos de extração concentrações de compostos ativos e características das cepas bacterianas podem influenciar os resultados Conclusões do estudo OS RESULTADOS INDICAM QUE OR E SP DE CÚRCUMA LONGA COMERCIALIZADOS NÃO DEMONSTRARAM ATIVIDADE ANTIMICROBIANA SIGNIFICATIVA CONTRA ESCHERICHIA COLI NAS CONDIÇÕES TESTADAS SUGERESE A CONTINUIDADE DOS ESTUDOS PARA INVESTIGAR FATORES QUE PODEM INFLUENCIAR NA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA COMO VARIAÇÕES NA COMPOSIÇÃO QUÍMICA DA PLANTA E MÉTODOS DE PREPARAÇÃO
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REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 174 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA CURCUMA LONGA L SOBRE ESCHERICHIA COLI ARTIGO ORIGINAL BANDEIRA Debora Marina1 MARCHI Juliana Pelissari2 GOMES Simone Damasceno3 PELLIZZARO Luciana4 BANDEIRA Debora Marina et al Atividade antimicrobiana da Curcuma longa L sobre Escherichia coli Revista Científica Multidisciplinar Núcleo do Conhecimento Ano 08 Ed 04 Vol 03 pp 0516 Abril de 2023 ISSN 24480959 Link de acesso httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividade antimicrobiana DOI 1032749nucleodoconhecimentocombrbiologiaatividade antimicrobiana RESUMO Curcuma longa é uma planta que tem se destacado em pesquisas que avaliam atividade antimicrobiana antinflamatória antiprotozoária anticarcinogênica e antifúngica A descoberta de novas alternativas para desenvolvimento de fármacos com origem em princípios ativos de plantas se faz necessária considerando a alta capacidade adaptativa dos diferentes microrganismos Dessa forma o presente estudo teve por objetivo avaliar a atividade antimicrobiana dos extratos da oleoresina e da suspensão de pó de rizomas de Curcuma longa frente à bactéria Escherichia coli Neste estudo não foi observada atividade antimicrobiana para os extratos da cúrcuma em pó e da oleoresina frente à Escherichia coli Verificase na literatura uma grande variedade de resultados obtidos frente a testes com C longa sobre os diferentes microrganismos sendo alguns positivos demonstrando ação antimicrobiana e outros negativos Essa divergência se justifica por fatores como diferentes metodologias utilizadas clima tipos de solo adubação disponibilidade hídrica do cultivo da planta bem como a forma de colheita e armazenamento os quais interferem nos componentes presentes e em sua concentração na planta Embora os resultados deste estudo tenham sido negativos não significa que a planta não possua atividade antimicrobiana sendo indicada a continuidade nos ensaios visando identificar os fatores que geram discordância entre os estudos já realizados REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 175 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Palavraschave Produtos naturais Óleo resina Pó de cúrcuma Curcumina Atividade antimicrobiana 1 INTRODUÇÃO Produtos naturais têm sido utilizados ao longo da História no tratamento e prevenção de doenças Atualmente eles vêm ganhando grande importância nas pesquisas para a elaboração de fármacos de origem natural Vários grupos de pesquisadores têm estudado a atividade biológica de plantas medicinais originárias de diversas partes do mundo guiados pelo uso popular das espécies nativas SILVA FILHO et al 2009 SANTOS et al 2021 BANDEIRA et al 2022 Uma planta que além de ser utilizada na culinária tem estado presente nas pesquisas das áreas farmacológicas é Curcuma longa L conhecida popularmente por açafrão ou cúrcuma É uma planta herbácea pertence à família Zingiberaceae nativa do sudeste asiático mais precisamente das florestas tropicais da Índia país de maior produção mundial PEREIRA STRINGHETA 1998 FRANCO et al 2007 SABIR et al 2021 A parte do vegetal com maior utilização é o rizoma no qual são encontradas as substâncias responsáveis pelo seu valor mercadológico e ação terapêutica COLLINO 2014 São três os pigmentos curcuminoides presentes no rizoma a curcumina principal composto responsável pelas várias atividades da planta a desmetoxicurcumina e a bisdesmetoxicurcumina SILVA FILHO et al 2009 SABIR et al 2021 Pereira e Stringheta 1998 explicam que a cúrcuma possui três produtos disponíveis comercialmente o pó de cúrcuma a oleoresina de cúrcuma e o extrato de curcumina Pesquisas com C longa comprovaram sua atividade antimicrobiana MAIA et al 2003 KALAYCIOGLU et al 2017 antinflamatória antioxidante antiprotozoária anticarcinogênica e antifúngica AKRAM et al 2010 MARCHI et al 2016 Frente à resistência que os microrganismos patogênicos têm desenvolvido surge a REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 176 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana necessidade e o incentivo pela procura de fármacos de origem natural BANDEIRA et al 2022 A bactéria E coli por exemplo é um microrganismo comensal presente no intestino de mamíferos e aves que tem sido apontado como um dos agentes bacterianos mais frequentes em diarreias de seres humanos e animais podendo ocasionar em seres humanos diversas infecções incluindo a meningite FERREIRA KNÖBL 2009 ALMEIDA 2013 A alta capacidade adaptativa dos microrganismos torna a pesquisa sobre o seu comportamento essencial para a saúde pública A Organização Mundial da Saúde OMS divulgou recentemente a primeira lista de agentes patogênicos prioritários resistentes a antibióticos com 12 famílias de bactérias que representam a maior ameaça para a saúde humana Nesta lista destacase em particular a ameaça de bactérias gramnegativas resistentes a múltiplos antibióticos como é o caso da E coli que junto a outras Enterobacteriaceae estão na lista como prioridade 1 ou seja crítica resistente a carbapenema e cefalosporinas de terceira geração os melhores antibióticos disponíveis para tratamento de bactérias multirresistentes OMS 2018 Além disso a E coli apresenta entre 8 e 65 variável entre diferentes países de resistência à ciprofloxacina um antibiótico comumente usado para tratar infecções do trato urinário OMS 2017 Assim fazse necessária a descoberta de novas alternativas para o desenvolvimento de fármacos com origem nos princípios ativos de algumas plantas Neste contexto este estudo objetivou avaliar a atividade antimicrobiana do extrato da oleoresina e da suspensão de pó de rizomas de C longa sobre a bactéria E coli tendo em vista serem produtos já à disposição dos consumidores REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 177 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 2 MATERIAL E MÉTODOS O estudo foi realizado no Laboratório de Microbiologia da Universidade Paranaense Unidade Universitária de Francisco Beltrão sendo a parte experimental realizada de maio a outubro de 2018 Os rizomas de Curcuma longa foram adquiridos no comércio de Francisco Beltrão Paraná Foram lavados higienizados em água corrente descascados fatiados na espessura de aproximadamente 05 cm Após isto as fatias foram secas em estufa a 50 ºC até a verificação de massa constante O período total de secagem foi de aproximadamente um mês O peso de massa constante foi de 51663 g Após a secagem o pó foi obtido pela trituração dos rizomas em liquidificador doméstico seguido de peneiramento por quatro malhas de diferentes espessuras O pó foi acondicionado em sacos plásticos duplos uma camada de papel kraft e outra de saco plástico até sua utilização e mantido em ambiente seco MARCHI 2018 O pó do rizoma de cúrcuma foi dividido em 180 g para ser feito o extrato alcoólico para a obtenção da oleoresina OR e 17324 g para obtenção da suspensão do pó SP Para obtenção da OR iniciouse fazendo um extrato bruto EB sendo utilizado o processo de maceração com álcool etílico a 70 em temperatura ambiente PEREIRA STRINGHETA 1998 RODRIGUES et al 2016 Foram usados 180 g de pó de cúrcuma para 540 ml de álcool 70 13 mv de plantasolvente o material foi homogeneizado com auxílio de bastão de vidro envasado em recipiente de vidro envolvido por papel alumínio etiquetado para identificação nome data hora e armazenado em local escuro por 15 dias com agitação diária Decorridos quinze dias o EB foi filtrado a vácuo Para isso um funil de Buchner foi acoplado a um kitassato com borracha para completa vedação e do kitassato REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 178 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana seguiu uma mangueira até a bomba de vácuo Após a montagem do equipamento o funil recebeu dois papéis filtro na forma de círculo no qual foi depositado o EB Em seguida o aparelho foi ligado e ocorreu a sucção do EB pela bomba permitindo a sua filtração O filtrado foi direcionado para o interior do kitassato obtendose a tintura contendo álcool totalizando 350 ml O material sólido que ficou retido no papel filtro foi posteriormente descartado MARCHI 2018 A tintura obtida foi colocada em rotaevaporador para remoção do álcool etílico Para tanto a tintura foi colocada em balão de fundo chato que foi conectado ao rotaevaporador e aquecido em banhomaria a uma temperatura de 45 5 ºC O procedimento foi realizado até que 15 da tintura estivesse no balão sendo a partir de então denominada OR 20 O material foi acondicionado em tubos de falcon envolvidos em papel alumínio e armazenados em refrigerador até a diluição para a montagem do experimento MARCHI 2018 Com relação à OR o preparo puro obtido após a rotaevaporação foi considerado como 100 e está diluído nas concentrações de 50 25 125 e 625 em Tween 80 a 01 Para preparo da suspensão do pó a 20 foi feita a adição de 1875 g de pó em 75 ml de uma solução estéril de Tween 80 01 conforme metodologia usada por Dornellas 2016 Cepas de Escherichia coli foram adquiridas e reconstituídas de acordo com a indicação do fornecedor As culturas microbianas foram padronizadas em 108 célulasml estimadas por comparação ao tubo 05 da escala McFarland Para o ensaio adotouse o Método de Difusão por Plugue de Ágar adaptado de Kurtzman Jr 1973 e Harris e Ruger 1953 que consiste em remover um pedaço do meio de cultura do local correspondente ao repique após o período de incubação e colocálos na superfície do meio de cultura inoculado com o material a ser testado onde após isso se observará a inibição de crescimento em função da difusão do produto a ser testado eou do antibiótico a partir do plugue Assim foram utilizadas REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 179 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana placas de Petri de 100 x 20 mm de diâmetro nas quais foram acrescentados 200 ml de ágar Muller Hinton preparados conforme a indicação na embalagem Após serem homogeneizadas e deixadas em repouso até a solidificação com um swab estéril foi inoculada a cultura de E coli uniformemente sobre a superfície do ágar as placas que foram deixadas em repouso em temperatura ambiente por aproximadamente três minutos Paralelamente foram preparadas das placas contendo 150 ml de meio esterilizado mais 50 ml de suspensão em pó ou OR previamente diluídos em suas concentrações 31 meioextrato A mistura foi homogeneizada e se aguardou a solidificação Depois foram removidos os plugues recortes cilíndricos de cada uma dessas placas para o meio contendo o inóculo Em cada placa foram transferidos cinco plugues em suas devidas concentrações da maior para menor de OR 100 50 25 125 e 625 bem como plugues com controle positivo utilizando amoxicilina e cloranfenicol e com controle negativo utilizando Tween 80 a 01 O experimento foi realizado em quintuplicata e as placas incubadas à temperatura 40 3 ºC por 24 horas MARTINS 2010 MINAGAWA 2007 Para a análise da SP seguiuse o mesmo procedimento porém adicionando às placas com meio de cultura e inócuo plugues contendo a SP a 20 nas mesmas concentrações da OR 100 50 25 125 e 625 Após o intervalo de 24 horas a mensuração dos halos de inibição quando formados foi realizada com paquímetro de acordo com os critérios preconizados pelo National Committe for Clinical Laboratory Standards NCCLS 2003 REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 180 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 3 RESULTADOS E DISCUSSÃO Neste estudo não foi observada atividade antimicrobiana para os extratos da suspensão do pó da cúrcuma SP e da oleoresina OR frente à bactéria Escherichia coli em nenhuma das concentrações testadas Figura 1 Figura 1 Comparação de presença ou não de halos de inibição A Placa de Petri com plugues nas cinco concentrações B Placa de Petri com controle positivo amoxicilina apresentando halos de inibição Fonte A autora 2018 Essa não inibição da E coli por produtos da cúrcuma foi testada em outros estudos PéretAlmeida 2006 por exemplo avaliou a atividade antimicrobiana da cúrcuma em pó dos pigmentos curcuminoides e do óleo essencial de cúrcuma Nesse experimento apenas o óleo essencial teve atividade antimicrobiana sobre E coli Bacillus subitilis Salmonella enterica Choleraesuis Aspergillus niger e Saccharomyces cereviseae O mesmo foi observado nos estudos de Norajit et al 2007 Araújo et al 2015 e Franco et al 2007 os quais também testaram produtos da cúrcuma e não houve atividade contra a E coli A não ação da C longa REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 181 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana contra E coli pode ser justificada por peculiaridades próprias da bactéria ou da planta Quanto à E coli assim como outras bactérias acreditase que o potencial patogênico e resistente de algumas cepas se deve a ganhos genéticos ocorridos durante o processo evolutivo da espécie devido à aquisição de genes de virulência por meio de mutações ou transferência horizontal de material genético que as fez desenvolver mecanismos complexos de resistência VIEIRA 2009 Estes genes de virulência provenientes de materiais genéticos extracromossômicos plasmídeos codificam proteínas que possibilitam colonização penetração e invasão de novos espaços por algumas bactérias CORRÊA 2012 dificultando o controle Da mesma forma a atividade antimicrobiana para bactérias gram negativas é menor quando exposta a alguns antimicrobianos associando esse fato à presença da membrana externa na estrutura das bactérias o que pode restringir a penetração de determinadas substâncias SINGH et al 2002 GUL et al 2004 Embora isso curcumina livre pigmento presente na cúrcuma e microcristais de curcumina apresentaram atividade antimicrobiana sobre E coli Staphylococcus aureus Bacillus cereus e Pseudomonas aeruginosa SANTOS 2015 DORNELLAS 2016 A curcumina também foi efetiva em outro estudo contra bactérias gram negativas como E coli e S chorelaesuis TAKEUCHI 2012 O extrato etanólico e o óleo essencial da C longa também agiram contra cepas padrões e isolados clínicos de E coli tendo o extrato etanólico provocado maior inibição em comparação ao óleo ÀLVAREZ et al 2016 Neste contexto é possível perceber que o extrato etanólico e a curcumina foram mais efetivos contra E coli Isso pode ser explicado pela concentração de curcumina que varia nos rizomas de uma planta para outra pois Pereira e Stringheta 1998 apontaram uma concentração média de curcumina de 25 e Chassagnez REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 182 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Corrêa e Meireles 1997 de 64 A diferença de concentração frequentemente está associada à composição dos rizomas ou à forma como é extraída Assim a espécie de cúrcuma aqui avaliada pode ter apresentado baixa concentração de curcumina influenciando na não atividade antimicrobiana Tendo em vista que não foi feita a análise fitoquímica para C longa usada neste ensaio não se pode confirmar essa hipótese Com relação à utilização da OR temse o intuito de concentrar os compostos curcuminoides em relação ao rizoma da planta moída em pó pois elimina o amido presente em maior quantidade no rizoma 25 a 50 NAGHETINI 2006 SABIR et al 2021 Assim há possibilidade de que a OR seja mais efetiva na sua ação antimicrobiana porém neste estudo isto não se confirmou Vários são os fatores que podem influenciar na concentração de componentes ativos nos produtos da cúrcuma A temperatura de extração e o tamanho das partículas apresentam influência significativa no rendimento da extração de curcumina com etanol conforme estudo realizado por Peron et al 2010 com OR de cúrcuma A temperatura de secagem a 70 ºC favoreceu a extração de OR bem como contribuiu para a manutenção de curcumina na matériaprima CHASSAGNEZ CORRÊA e MEIRELES 1997 A temperatura de secagem e rotaevaporação da OR deste estudo variou de 40ºC a 50ºC o que pode ter influenciado nas concentrações de curcumina porém essa possibilidade só poderia ser comprovada mais uma vez mediante análises fitoquímicas As condições de solo e de cultivo também interferem no teor de curcumina dos rizomas Peron et al 2010 comprovaram existir diferença significativa de 95 entre os rizomas cultivados em Piracicaba comparados aos rizomas cultivados em Monte Alegre do Sul ambas cidades paulistas Além disso há o método de extração utilizado que interfere nas diferenças físico químicas dos produtos das plantas Naghetini 2006 observou que a extração com REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 183 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana hexano foi mais simples rápida e de rendimento maior quando comparada com a hidrodestilação Já Pereira e Stringheta 1998 afirmam que álcool etílico e acetona são indicados como bons solventes sendo a acetona o solvente mais utilizado mesmo apresentando alguns problemas de inflamabilidade e alto custo para sua recuperação a fim de livrar o produto da sua presença Um estudo feito por Krishnamurthy et al 1976 sobre processos de extração dos curcuminoides com acetona etanol e dicloro etileno concluíram que a acetona se apresentou mais eficiente do que o etanol e o dicloro etileno fornecendo um produto contendo 42 de curcuminoides Indicando assim que o etanol solvente utilizado nesse estudo possa não ser tão eficaz na extração dos compostos necessários para a ação antimicrobiana 4 CONCLUSÃO Os extratos em pó e OR produzidos a partir de Curcuma longa comercializados em Francisco Beltrão Paraná não apresentaram atividade antimicrobiana para cepas de Escherichia coli Este resultado pode estar atrelado a diversos fatores como a possível resistência da bactéria aos compostos da planta ou as condições ambientais e de manejo como temperatura tipo de solo adubação disponibilidade hídrica época de colheita e tempo de armazenamento que podem influenciar na composição química e na concentração de componentes da SP e da OR que foram efetivos em outros estudos como a curcumina Sugerese uma continuidade nos ensaios visando identificar qual ou quais são os fatores que causam discordâncias com a literatura bem como a análise dos componentes presentes nos produtos testados REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 184 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana 5 AGRADECIMENTOS Agradecemos a Universidade Paranaense pelo ambiente de estudo proporcionado a professora Orientadora Luciana Pellizzaro por todo tempo investido na realização deste trabalho a professora Coorientadora Juliana Pelissari Marchi pela experiência no assunto e auxílio na realização deste trabalho e a professora Simone pelo incentivo em publicar meu trabalho REFERÊNCIAS AKRAM M UDDIN S AHMED F USMANGHANI K HANNAN A MOHIUDDIN E ASIF M Curcuma longa and Curcumin A review article Romanian Journal Biology Plant Biology Bucharest vol 55 n 2 p 6570 2010 ALMEIDA A M S Características biológicas e antigênicas de Escherichia coli com ênfase aos genes de virulência Seminário PósGraduação em Ciência Animal Universidade Federal de Goiás Goiânia 2013 30 f ÀLVAREZ N M ORTÍZ A A MARTÍNEZ C O Atividad antibacteriana in vitro de Curcuma longa Zingiberaceae frente a bactérias nosocomiales em Montería Colombia Revista Biologia Tropical vol 64 n 3 p 12011208 2016 ARAÚJO R G M ASSIS D LEMES S R MELOREIS P R ARAÚJO L A PAIVA E S SILVA C B Avaliação da atividade antimicrobiana do óleo essencial do açafrão Curcuma longa estudo de caso PUC Goiânia vol 42 n 4 p 425431 2015 BANDEIRA D M CORRÊA J M LASKOSKI L V BATISTA J M ROSSET J COSTA W F KUO L H PINTO F G S Extraction characterization of bioactive compounds and biological activities of the leaves of Podocarpus lambertii Klotzch ex Endl J Appl Res Med Aromat Plantas n 31 p 100427 2022 CHASSAGNEZ A L M CORRÊA N C F MEIRELES M A A Extração de oleoresina de cúrcuma Curcuma longa L com CO² surpercrítico Ciênc e Tecnol de Aliment Campinas vol 17 n 4 1997 COLLINO L Curcumina de especiaria a nutracêutico Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Farmacêutica Bioquímica Universidade Estadual Paulista Araraquara 2014 88f REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 185 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana CORRÊA F A F Características dos patótipos de E coli e implicações de E coli patogênica para aves em achados de abatedouros frigoríficos Seminário Pós Graduação em Ciência Animal Universidade Federal de Goiás Goiânia 2012 37 f DORNELLAS F C Atividade antifúngica de Curcuma longa L Zingiberaceae contra fungos deteriorantes de pães Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Tecnologia em Alimentos Universidade Tecnológica Federal do Paraná Campo Mourão 2016 39 f FERREIRA A J P KNÖBL T Enfermidades bacterianas In JÚNIOR BERCHIERI A et al Doenças das aves 2ª Ed Campinas Facta 2009 pp 457 474 FRANCO A L P OLIVEIRA T B FERRI P H BARRA M T PAULA J R Avaliação da composição química e atividade antibacteriana dos óleos essenciais de Aloysia gratíssima Gillies Hook Tronc alfazema Ocimum gratissimum L alfavacacarvo e Curcuma longa L açafrão Rev Eletrônica de Farmácia vol 5 n 2 p 22888 2007 GUL N AHMAD S MUJAHID Y T Studies on the Antibacterial Effect of Different Fractions of Curcuma longa against urinary tract infection isolantes Pak J Biol Sci vol 7 n 12 p 205560 2004 HARRIS D A RUGER M L Microbiological aspects of new antibiotic screening A plug test procedure Antibiotics Chemotherapy vol 3 n 1 p 26570 1953 KALAYCIOGLU Z TORLAK E AKINEVINGÜR G ÖZEN İ ERIM FB Antimicrobial and physical properties of chitosan films incorporated with turmeric extract International Journal of Biological Macromolecules vol 101 n 1 p 882888 2017 KRISHNAMURTHY N MATHEW A G NAMBUDIRI E S SHIVASANKAR S LEWIS Y S NATARAJAN C P Oil and oleoresin of turmeric Tropical Science vol 18 n 37 p 3745 1976 KURTZMAN JR R H AgarPlug cutter and inoculation device Mycologia vol 65 n 1 p 23639 1973 MAIA S R FERREIRA A C ABREU L R Uso do açafrão Curcuma longa L na redução da Escherichia coli ATCC 25992 e Enterobacter aerogenes ATCC 13048 em ricota Lavras UFLA 2003 MARCHI J P TEDESCO L MELO A C FRASSON A C FRANÇA A C SATO S W LOVATO E C W Curcuma longa L o açafrãodaterra e seus REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 186 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana benefícios medicinais Arquivo de Ciências da Saúde UNIPAR Umuarama vol 20 n 3 p 18994 2016 MARCHI J P Composição química e atividade antioxidante de duas preparações de extrato de rizomas de Curcuma longa L Dissertação Mestrado Profissional em Plantas Medicinais e Fitoterápicos na Atenção Básica da Universidade Paranaense Universidade Paranaense Umuarama 2018 MARTINS A L G A Atividade antibacteriana dos óleos essenciais do manjeirão Ocimum basilicum Linnaeus e do gengibre Zingiber officinale Roscoe frente a linhagens de Escherichia coli enteropatogênicas isoladas de hortaliças Tese Doutorado em Ciência e Tecnologia de Alimentos Universidade Federal da Paraíba João Pessoa 2010 110 f MINAGAWA C W Estudo microbiológico fecal de linhagens de camundongos de estirpe de E coli e do meio ambiente em biotérios Dissertação Mestrado em Medicina Veterinária Universidade de São Paulo São Paulo 2007 108 f NAGHETINI C C Caracterização físicoquímica e atividade antifúngica dos óleos essenciais da cúrcuma Dissertação Mestrado em Ciências de Alimentos Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte 2006 NATIONAL COMMITTEE FOR CLINICAL LABORATORY STANDARDS NCCLS Performance standards for antimicrobial susceptibility testing tenth informational suplemente M100S10 Wayne 2003 NORAJIT K LAOHAKUNJIT N KERDCHOECHUEN O Antibacterial effect of five Zingiberaceae essential oils Molecules vol 12 n 8 p 204760 2007 ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE OMS Novos dados revelam níveis elevados de resistência aos antibióticos em todo o mundo OMS 2018 Disponível em httpswwwpahoorgptnoticias2912018novos dadosrevelamniveiselevadosresistenciaaosantibioticosemtodo mundotext2920de20janeiro20de202018de20alta20e20baixa 20renda Acesso em 16 abr 2018 ORGANIZAÇÃO MUNDIAL DA SAÚDE OMS OMS publica de bactérias para as quais se necessitam novos antibióticos urgentemente OMS 2017 Disponível em httpswwwpahoorgptnoticias2722017omspublicalistabacteriasparaquais senecessitamnovosantibioticos Acesso em 16 abr 2018 PEREIRA A S STRINGHETA P C Considerações sobre a cultura e processamento do açafrão Hortic Bras Brasília vol 16 n 2 p 1025 1998 REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 187 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana PÉRETALMEIDA L Caracterização de pigmentos da Curcuma longa L avaliação da atividade antimicrobiana morfogênese in vitro na produção de curcuminoides e óleos essenciais Tese Doutorado em Ciência de Alimentos Faculdade de Farmácia Universidade Federal de Minas Gerais Belo Horizonte 2006 120 f PERON I L CARVALHO P R N DA SILVA M G AZEVEDO FILHO J A De PINHEIRO J B SIGRIST M S ZUCCHI M I Avaliação dos teores de curcumina em diferentes acessos de Cúrcuma Curcuma longa L 2010 Anais Campinas Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz Universidade de São Paulo 2010 RODRIGUES R R GONZÁLEZ M E L QUEIROZ A A A de Eletrossíntese e caracterização de poli 2hidroxietilmetacrilato contendo curcuminoides Dissertação Mestrado em Materiais para Engenharia Universidade Federal de Itajubá Itajubá 2016 90 f SABIR S M ZEB A MAHMOOD M ABBAS SR AHMAD Z IQBAL N Phytochemical analysis and biological activities of ethanolic extract of Curcuma longa rhizome Brazilian Journal of Biology Revista Brasileira de Biologia vol 81 n 3 p 737740 2021 SANTOS F D P Avaliação da atividade antimicrobiana de microcristais de curcumina Trabalho de Conclusão de Curso Graduação em Engenharia de Alimentos Universidade Tecnológica Federal do Paraná Campo Mourão 2015 36 f SANTOS V C MALLMANN A P TOLEDO G A BANDEIRA D M CONCEIÇÃO L H S M CORRÊA J M PINTO F G S Phytochemical prospection antioxidant and antimicrobial activities of leaves extracts from Myrcia palustris DC Int J Dev Res n 11 p 4472444729 2021 SINGH G SINGH O P MAURYA S Chemical and biocidal ivestigations on essential oils of some Indian Curcuma species Progress in crystal growth and charecterization of materials vol 45 n 1 p 7581 2002 SILVA FILHO C R M SOUZA A G CONCEIÇÃO M M SILVA T G SILVA T M S RIBEIRO A P L Avaliação da bioatividade de extratos cúrcuma Curcuma longa L Zingiberaceae em Artemia salina e Biomphalaria glabrata Ver Bras de Farmacogn São Paulo vol 19 n 4 p 91923 2009 TAKEUCHI A P Caracterização antimicrobiana de componentes do açafrão Curcuma Longa L e elaboração de filmes ativos com montimorilonita e óleo resina de açafrão Dissertação Mestrado Programa de PósGraduação em Ciências e Tecnologia de Alimentos Universidade Federal de Goiás Goiânia 2012 59 f REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr 188 RC 143154 Disponível em httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana VIEIRA M A M Ilhas de patogenicidade O mundo da saúde São Paulo vol 33 n 4 p 406 14 2009 Enviado 23 de Fevereiro 2023 Aprovado 10 de Março 2023 1 Mestre em Conservação e Manejo de Recursos Naturais ORCID 0000000159567210 Currículo Lattes httpslattescnpqbr5619420533247630 2 Mestra em Plantas Medicinais e Fitoterápicos na Atenção Básica ORCID 0000000277790253 Currículo Lattes httplattescnpqbr3593944907268063 3 Doutora em Agronomia ORCID 0000000176398500 CURRÍCULO LATTES httplattescnpqbr3362104483832351 4 Orientadora Mestre em Ciências Ambientais ORCID 0000000317019763 CURRÍCULO LATTES httplattescnpqbr9146011936057512 MULTIDISCIPLINARY SCIENTIFIC JOURNAL REVISTA CIENTÍFICA MULTIDISCIPLINAR NÚCLEO DO CONHECIMENTO ISSN 24480959 httpswwwnucleodoconhecimentocombr ATIVIDADE ANTIMICROBIANA DA CURCUMA LONGA L SOBRE ESCHERICHIA COLI ARTIGO ORIGINAL BANDEIRA Debora Marina1 MARCHI Juliana Pelissari2 GOMES Simone Damasceno3 PELLIZZARO Luciana4 BANDEIRA Debora Marina et al Atividade antimicrobiana da Curcuma longa L sobre Escherichia coli Revista Científica Multidisciplinar Núcleo do Conhecimento Ano 08 Ed 04 Vol 03 pp 0516 Abril de 2023 ISSN 24480959 Link de acesso httpswwwnucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana DOI 1032749nucleodoconhecimentocombrbiologiaatividadeantimicrobiana Contextualização da Curcuma longa Curcuma longa conhecida como açafrão daterra é uma planta amplamente utilizada na medicina tradicional e na culinária devido às suas propriedades medicinais e aromáticas Estudos prévios sugerem que compostos bioativos presentes na cúrcuma como curcuminoides e óleos essenciais possuem potencial antimicrobiano Principais compostos ativos da Curcuma longa Curcuminoides especialmente curcumina são os principais constituintes ativos da cúrcuma Estes compostos são conhecidos por suas propriedades antioxidantes anti inflamatórias e antimicrobianas que têm sido objeto de diversos estudos científicos Objetivo da pesquisa Avaliar a atividade antimicrobiana da cúrcuma longa contra Escherichia coli Investigar a eficácia de diferentes concentrações de oleoresina OR e suspensão em pó SP de cúrcuma longa através de testes de sensibilidade Metodologia Utilização de placas de Petri contendo ágar Muller Hinton para testes de sensibilidade Inoculação uniforme de Escherichia coli nas placas após a solidificação do meio Aplicação de diferentes concentrações de OR e SP de cúrcuma longa em quintuplicata Controles positivos amoxicilina e cloranfenicol e negativo Tween 80 a 01 foram utilizados para comparação Resultados da atividade antimicrobiana Não foram observados halos de inibição significativos nas concentrações testadas de OR e SP Comparação com os controles positivos revelou diferenças na eficácia antimicrobiana contra Escherichia coli Discussão A ausência de atividade antimicrobiana observada pode ser atribuída a várias razões possíveis como variações na composição química dos extratos testados ou às especificidades genéticas e de parede celular da Escherichia coli estudada Este resultado contrasta com estudos anteriores que mostraram efeitos antimicrobianos positivos da curcumina e seus derivados em diferentes condições experimentais Comparação com Estudos Anteriores Estudos anteriores mostraram resultados variáveis quanto à atividade antimicrobiana da cúrcuma longa contra diferentes cepas bacterianas Variações nos métodos de extração concentrações de compostos ativos e características das cepas bacterianas podem influenciar os resultados Conclusões do estudo OS RESULTADOS INDICAM QUE OR E SP DE CÚRCUMA LONGA COMERCIALIZADOS NÃO DEMONSTRARAM ATIVIDADE ANTIMICROBIANA SIGNIFICATIVA CONTRA ESCHERICHIA COLI NAS CONDIÇÕES TESTADAS SUGERESE A CONTINUIDADE DOS ESTUDOS PARA INVESTIGAR FATORES QUE PODEM INFLUENCIAR NA ATIVIDADE ANTIMICROBIANA COMO VARIAÇÕES NA COMPOSIÇÃO QUÍMICA DA PLANTA E MÉTODOS DE PREPARAÇÃO