Slide Relatorio Fisiologia

Pesquisa comportamental do cérebro233 2012 398404 Listas de conteúdo disponíveis emCiênciaDireta do SciVerse Pesquisa comportamental do cérebro página inicial do jornalwww todos eles com l oc ate bb r Relatório de pesquisa Dieta materna rica em gordura em camundongos programa comportamento emocional na idade adulta Daria PelegRaibstein Edlira Luca Christian Wolfrum Instituto Federal Suíço de Tecnologia ETH Zurique Instituto de Alimentos Nutrição e Saúde Schorenstrasse 16 8603 Schwerzenbach Suíça destaques A dieta rica em gordura da mãe leva ao aumento de comportamentos ansiosos nos filhos A DH materna não afeta a resposta condicionada ao medo na prole A HFD materna leva a alterações no BDNF do hipocampo dorsal na prole A DH materna leva a alterações serotoninérgicas no hipocampo ventral da prole A DH materna leva a alterações GABAérgicas hipocampais ventrais na prole informação do artigo resumo Histórico do artigo Recebido em 17 de abril de 2012 Recebido em forma revisada em 8 de maio de 2012 Aceito em 14 de maio de 2012 Disponível online em 23 de maio de 2012 O ambiente materno tem um papel significativo no desenvolvimento normal do feto e pode ter impacto a longo prazo no desenvolvimento do cérebro incluindo vias centrais críticas como o ácido gamaaminobutírico GABA os sistemas serotoninérgico e neurotrófico Por exemplo a desnutrição materna desempenha um papel importante na programação de muitos aspectos da fisiologia e do comportamento incluindo a predisposição a transtornos relacionados à saúde mental como a ansiedade Aqui investigamos os efeitos da dieta rica em gordura materna ou da dieta de controle por nove semanas antes da gestação gestação e lactação na prole adulta com relação a comportamentos relacionados à ansiedade bem como à exploração e à resposta ao medo condicionado Descobrimos que a prole nascida de mães com dieta rica em gordura apresentou aumento de comportamentos semelhantes à ansiedade mas resposta ao medo condicionado intacta e comportamento exploratório Além disso o fator neurotrófico derivado do cérebro BDNF foi significativamente aumentado no hipocampo dorsal enquanto o GABAUMA subunidade do receptor alfa2 e o receptor 5hidroxitriptamina 1A 5HT1A apresentaram níveis aumentados no hipocampo ventral Em resumo essas descobertas sugerem que o consumo materno de dieta rica em gordura durante períodos críticos no desenvolvimento do feto pode aumentar o risco de comportamentos anormais na idade adulta relacionados à ansiedade Palavraschave Ratos Dieta rica em gordura Ansiedade Medo condicionado Nutrição materna 2012 Elsevier BV Todos os direitos reservados 1 Introdução publicou uma série de estudos epidemiológicos demonstrando uma associação entre a subnutrição materna e o baixo peso ao nascer maior risco de doença cardíaca coronária diabetes tipo 2 e síndrome metabólica na progênie adulta68 Isso levou à hipótese das origens fetais proposta por Barker que sugeriu que a nutrição adequada durante o desenvolvimento fetal é crítica Embora a hipótese das origens fetais inicial lidasse principalmente com subnutrição e má nutrição estudos mais recentes se concentraram em investigar a supernutrição materna eou obesidade e o risco subsequente da prole de desenvolver as mesmas doenças crônicas associadas à restrição do crescimento fetal Essa mudança de foco reflete o fato de que a supernutrição é mais comum do que a subnutrição no mundo ocidental Além disso a dieta rica em gordura materna durante a gravidez pode alterar o desenvolvimento do cérebro do feto o que pode colocar a prole em alto risco de várias patologias mais tarde na vida síndrome metabólica diabetes tipo 2 distúrbios cardiovasculares Relativamente pouca atenção foi dada até agora ao impacto da superalimentação durante a gravidez e ao efeito que ela pode ter no comportamento emocional mais tarde na vida da prole como ansiedade O conceito de programação referese ao processo pelo qual a exposição a estímulos ou insultos ambientais durante períodos críticos de desenvolvimento leva a mudanças permanentes na fisiologia incluindo o metabolismo do organismo cujas consequências são frequentemente observadas muito mais tarde na vida1 O estado de saúde da gestante nutrição supernutrição ou subnutrição infecção materna ou trauma físico ou psicológico podem afetar não só o crescimento fetal mas também aumentar o risco de diversas patologias como obesidade doença coronária diabetes tipo 2 e transtorno mental na prole25 Algumas das evidências anteriores que apoiam a associação entre o ambiente fetal e o maior risco de doenças em adultos originaramse no trabalho de David Barker no final da década de 1980 Barker e colaboradores Autor correspondente Tel 41 44 655 73 50 fax 41 44 655 72 03 Endereço de emaildariapelegethzch D PelegRaibstein 01664328 veja matéria inicial 2012 Elsevier BV Todos os direitos reservados httpdxdoiorg101016jbbr201205027 Traduzido do Inglês para o Português wwwonlinedoctranslatorcom D PelegRaibstein et al Pesquisa comportamental do cérebro233 2012 398404 399 comportamento depressão respostas emocionais alteradas e déficits cognitivos Embora se possa extrair desses estudos epidemiológicos uma relação entre uma nutrição materna abaixo do ideal subnutrição ou supernutrição no início da vida e o risco de doenças mais tarde uma ligação causal não pode ser estabelecida entre esses fatores Ao considerar estudos em humanos destrinchar os efeitos diretos da obesidade materna das influências genéticas compartilhadas eou do estilo de vida alimentar pós natal na criança em desenvolvimento parece virtualmente impossível uma vez que as crianças compartilham seus hábitos alimentares e predisposição genética com suas mães Consequentemente estudos em animais são essenciais para estabelecer uma relação de causa e efeito entre nutrição materna e problemas de saúde posteriores Muito trabalho foi publicado em animais sobre a associação entre subnutrição materna restrição alimentar e os riscos de saúde ao longo da vida para a progênie como doença cardíaca coronária diabetes tipo 2 e obesidade entre outras doenças19 11 Apenas recentemente modelos animais que estudam os efeitos da dieta rica em gordura materna administrada antes da gestação durante a gestação e durante a lactação indicam que os descendentes são propensos à obesidade e aos distúrbios metabólicos relacionados na idade adulta1216 Apesar do efeito de programação da dieta materna rica em gordura no metabolismo e nos distúrbios metabólicos pouco se sabe até agora sobre as possíveis consequências da dieta materna rica em gordura em fatores psicológicos em vez de somáticos como o comportamento emocional da prole O presente estudo foi portanto projetado para investigar em camundongos os efeitos de 9 semanas de exposição à dieta materna rica em gordura 3 semanas antes do acasalamento 3 semanas durante a gestação e 3 semanas durante a lactação em comportamentos relacionados à ansiedade e resposta emocional condicionada na prole adulta Para entender as mudanças moleculares subjacentes avaliamos a expressão de vários genes associados à ansiedade e ao comportamento emocional Escolhemos avaliar a expressão de GABAérgicos17e receptores serotoninérgicos 1819uma vez que estão ligados à regulação dos transtornos de humor e do BDNF uma vez que está implicado na fisiopatologia da ansiedade e da depressão17 Para esse fim o tecido cerebral de uma coorte ingênua de descendentes nascidos de mães controle e expostas à dieta rica em gordura foi avaliado utilizando RTPCR quantitativo qPCR Nós nos concentramos em avaliar esses sistemas no hipocampo uma vez que é conhecido por ser uma estrutura cerebral chave implicada na emoção vivário animal controlado sob um ciclo de luz e escuridão invertido de 1212 h conforme descrito acima Descendentes de oito ninhadas independentes 8 HFD 8 Controle foram selecionados aleatoriamente para os testes comportamentais e moleculares Tanto os descendentes masculinos quanto os femininos foram incluídos em todos os testes descritos abaixo para avaliar os potenciais efeitos dependentes do sexo da exposição materna à HFD Uma primeira coorte de HFD n 21 12 machos 9 fêmeas e descendentes de controle n 22 12 homens 10 mulheres em cada grupo experimental foi submetido a testes comportamentais na seguinte ordem de teste 1 labirinto em cruz elevado 2 atividade locomotora espontânea em campo aberto 3 neofobia alimentar e 4 condicionamento pavloviano congelamento a um estímulo condicionado por tom veja abaixo Uma coorte independente comportamentalmente ingênua de HFD n 8 e controle n 7 a prole foi usada para avaliação qPCR veja abaixo Todos os testes comportamentais começaram quando a prole atingiu o estágio adulto de desenvolvimento ou seja dia pósnatal PND 90 em diante 24 Labirinto em cruz elevado O labirinto em cruz elevado consistia em dois braços expostos e dois fechados unidos a uma plataforma quadrada central Sua construção foi descrita anteriormente em detalhes 20 O labirinto estava localizado em uma sala experimental mal iluminada O nível de luz nos braços abertos foi mantido em 30 lx e nos braços fechados em 4 lx Uma câmera digital foi montada acima do labirinto e imagens capturadas a uma taxa de 5 Hz foram transmitidas para um PC executando o sistema de rastreamento Ethovision Noldus Technology Holanda O camundongo foi gentilmente colocado no quadrado central de frente para um dos braços abertos Então foi permitido que ele se movesse sem ser perturbado por 5 min Antes de cada teste os braços foram limpos com água e secos Duas medidas foram tomadas porcentagem de tempo gasto nos braços abertos tempo nos braços abertostempo em todos os braços100 e a distância total percorrida em todo o labirinto como uma medida da atividade locomotora geral 25 Atividade locomotora espontânea em campo aberto O 40 cm40 cm35 cm de altura feitos de madeira e pintados de branco As arenas foram localizadas em uma sala de testes sob iluminação difusa fraca 30 lx Uma câmera digital foi montada diretamente acima das arenas capturando imagens de todas as quatro arenas a uma taxa de 5 Hz As imagens foram então transmitidas para um PC executando o sistema de rastreamento Ethovision Noldus Technology Holanda e a atividade locomotora espontânea foi avaliada por 1 h e foi indexada pela distância percorrida em toda a arena expressa como uma função de 12 bins sucessivos de 5 min aparelho consistia de quatro idêntico campo aberto arenas 26 Teste de neofobia alimentar O teste foi realizado em uma gaiola padrão medindo 45 cm23 cm18 cm Tecniplast Milão Itália contendo cama de serragem idêntica à usada nas gaiolas dos camundongos e uma tampa de arame Foi colocada sobre uma mesa localizada no meio de uma sala de testes mal iluminada 30 lx Um canto da tampa de arame foi cortado para fornecer acesso para introdução dos camundongos na gaiola de teste Do dia anterior ao teste até o final do experimento os camundongos foram mantidos em uma dieta alimentar restrita com 1 h por dia de acesso à comida na gaiola O peso corporal dos camundongos foi monitorado diariamente e não foi permitido cair abaixo de 90 do seu peso adlib Nos dias 13 os camundongos foram expostos individualmente à gaiola de teste por um período de 3 min para habituálos ao contexto do teste Nos dias 46 um pedaço de ração familiar de laboratório Provimi Kliba SA Kaiseraugst Suíça pesando aproximadamente 3 g foi colocado no canto oposto de onde o sujeito foi introduzido na gaiola de teste A sessão de teste terminou 10 s após o camundongo ter começado a consumir o pellet de comida ou quando 3 min se passaram No dia 7 o procedimento foi semelhante ao do dia 6 exceto que 2 pedaços de Kelloggs Frosted Flakes Kelloggs Switzerland GmbH foram colocados no canto mais distante da gaiola de teste Nos dias 47 as seguintes medições foram pontuadas pelo experimentador que não sabia da identidade do grupo dos sujeitos a a latência para o primeiro contato voluntário com o item alimentar e b a latência para consumir o alimento A latência líquida para o consumo de alimentos foi então calculada como a diferença entre as duas medidas de latência e foi usada como um índice de neofobia alimentar 2 Materiais e métodos 21 Animais Camundongos C57BL6N foram usados durante todo o estudo Reprodutores fêmeas e machos foram obtidos de Charles River Charles River Alemanha com 1011 semanas de idade A alimentação foi iniciada após 2 semanas de aclimatação à nova sala de espera dos animais que fica em um ambiente com temperatura e umidade controladas 211C 555 e os animais foram mantidos sob um ciclo inverso de luzescuridão luzes apagadas 07001900 h Todos os animais tiveram acesso ad libitum a alimentos Kliba 3430 Klibamühlen Kaiseraugst Suíça e água Todos os procedimentos descritos no presente estudo foram aprovados anteriormente pelo Cantonal Veterinarians Office de Zurique e estão de acordo com os princípios de cuidados com animais de laboratório noGuia para o Cuidado e Uso de Animais de Laboratório Publicação do National Institutes of Health nº 8623 revisada em 1985 27 Congelamento condicionado pavloviano 22 Exposição materna à dieta rica em gordura O aparelho consistia em dois conjuntos distintos de quatro câmaras de teste fornecendo dois contextos O primeiro conjunto de câmaras contexto A compreendia quatro câmaras operantes Modelo E1010 Coulbourn Instruments Allentown Pensilvânia EUA cada uma instalada em um baú ventilado e com isolamento acústico Cada câmara era equipada com um piso de grade feito de hastes de aço inoxidável 4 mm de diâmetro espaçadas em um intervalo de 10 mm de centro a centro Um choque elétrico embaralhado de 1 s de duração e 03 mA de intensidade poderia ser administrado através do piso de grade Modelo E1314 Coulbourn Instruments A câmara tinha uma área total de piso de 30 cm25 cm e uma altura de 29 cm mas o rato estava confinado a uma região retangular 175 cm13 cm no centro definido por um invólucro de Plexiglas transparente A iluminação dentro da câmara era fornecida por uma luz de casa 28 W posicionada na parede do painel 25 lx 21 cm acima do piso da grade O segundo conjunto de câmaras contexto B compreendia quatro invólucros cilíndricos 19 cm de diâmetro de Plexiglas fixados em um piso de plástico branco com cada Para o propósito da exposição de 9 semanas à dieta rica em gordura materna HFD Provimi Kliba Kaiseraugst Suíça contendo 60 de energia de gordura camundongos fêmeas foram expostos à HFD 3 semanas antes do acasalamento 3 semanas durante a gestação e 3 semanas durante a lactação As barragens de controle foram expostas à ração normal de laboratório Kliba 3430 Klibamühlen Kaiseraugst Suíça 23 Caracterização fenotípica da prole Todos os filhotes foram desmamados e sexados no dia pósnatal PND 21 Os irmãos de ninhada do mesmo sexo foram enjaulados separadamente Todos os animais foram mantidos sob alimentação ad libitum ração de laboratório e água e foram mantidos em temperatura e umidade 400 Pesquisa Cerebral233 2012 398404 Figura 1Diagrama esquemático representando o condicionamento pavloviano em um paradigma de congelamento condicionado Isso ilustra as três fases diferentes do experimento ao longo de cinco dias localizado em um gabinete de madeira ventilado e com isolamento acústico A iluminação era fornecida por uma fonte de luz infravermelha em vez de luz visível Cada uma das oito câmaras foi equipada com um Sonalert Modelo SC628 Mallory EUA e uma câmera digital montada 30 cm diretamente acima do centro da área de interesse O Sonalert forneceu um estímulo de tom contínuo 29 kHz a uma intensidade de 86 dB A saída da câmera foi alimentada para um multiplexador Modelo YSQ430 Sony Tóquio Japão antes de ser transmitida para um computador executando o software NIH Image versão 161 para análise em tempo real O algoritmo do procedimento de detecção de resposta de congelamento foi validado e totalmente descrito anteriormente 21 Resumidamente imagens digitalizadas sucessivas 192144 27648 pixels em uma escala de cinza de 8 bits obtidos a uma taxa de 1 Hz foram comparados após determinar o limite apropriado O número de pixels diferindo entre quadros adjacentes foi então computado Se a diferença fosse menor que 005 do número total de pixels em um quadro o mouse era considerado congelado naquele intervalo de 1 s O protocolo consistiu em três fases distintas a condicionamento b teste de congelamento de contexto condicionado e c teste de congelamento de tom condicionado ao longo dos dias Figura 1 No dia 1 do teste todos os camundongos receberam três testes de condicionamento no Contexto A Cada teste consistiu em um estímulo de tom de 30 s seguido imediatamente por um choque de 1 s 03 mA no pé O primeiro teste foi administrado 3 min após os camundongos serem colocados nas câmaras Testes sucessivos foram administrados a cada 3 min A sessão de condicionamento concluiu com um intervalo final de 3 min No dia 2 do teste os camundongos foram devolvidos ao Contexto A Eles foram colocados na câmara de teste por um período de 4 min Nos dias 3 a 5 do teste o congelamento do estímulo condicionado EC ao estímulo de tom foi avaliado no Contexto B O estímulo de tom foi administrado 2 min após os camundongos serem colocados na câmara de teste O tom permaneceu ligado por um período de 4 min Figura 2O teste do labirinto em cruz elevado A HFD materna levou a um aumento pronunciado nos níveis de ansiedade Todos os valores são médiasSEM O símbolo referese à significância estatística deP 005e Controle 22 12 homens 10 mulherese HFD 21 12 homens 9 mulheres F139 556P 003 refletindo a tendência reduzida da condição HFD de passar tempo nos braços abertos Figura 2 a média SEM a porcentagem de tempo gasto nos braços abertos em cada grupo é a seguinte HFD 2484386 e Controle 4119626 Nenhum outro efeito atingiu significância estatística A atividade locomotora geral foi indexada pela distância total percorrida e analisada por um 225 tratamentosexo1 min bins ANOVA A atividade locomotora foi comparável entre os grupos de tratamento bem como entre os gêneros e não produziu efeitos principais significativos nem interações dados não mostrados A média SEM a distância total percorrida em cm em cada grupo é a seguinte HFD 19799661 e Controle 18702736 28 PCR em tempo real Para dissecção o cérebro fresco foi cortado com uma lâmina de barbear em seções coronais de 1 mm de espessura As fatias foram colocadas em uma placa de dissecção gelada para a remoção do hipocampo dorsal e ventral usando um micropunch de 1 mm As seções coronais foram preparadas ao longo das seguintes coordenadas com relação ao bregma anteriorposterior 12 a 22 mm para o hipocampo dorsal e 28 a 38 mm para o hipocampo ventral as coordenadas foram adotadas do atlas do cérebro do rato Paxinos e Franklin 2001 Para armazenamento o tecido foi congelado a 80C O RNA do tecido foi extraído usando o método Trizolclorofórmio Invitrogen tratado com DNase Ambion Austin Texas por 30 min a 37C então convertido em cDNA usando o kit de transcrição reversa de cDNA de alta capacidade Applied Biosystems ABI Foster City CA 10 ng de cDNA foram analisados por PCR em tempo real usando o master mix SYBR Green ABI e o método de comparação relativa Ct onde a expressão do gene alvo é normalizada para a expressão do gene de manutenção Gapdh BDNF 5 GCCTTCATGCAACCGAAGTA33TGAGTCTCCAGGACAGCAAA5 5HT1AR 5 GTTTAAACCTCGGCGATTCA 3 3 AGCAAGAGGAGGGAGGAGAGAC5 5HT1BR 5 CTGGTGTGGGTCTTCTCCAT33 GTTCACAAAGCAGTCCAGCA5GABAUMR 2 5 TGCACCTGGAGGATTTCCCGA33 CGGGAGCAACCTGAACGGAGT5 32 Campo aberto Consistente com os resultados obtidos no teste do labirinto em cruz elevado o comportamento exploratório não foi significativamente afetado pela exposição materna à HFD no teste de campo aberto Um 2212 tratamentosexo5 min bins A ANOVA da distância percorrida revelou um efeito principal significativo dos bins de 5 min que reflete um efeito de habituação com uma redução da atividade locomotora ao longo do tempo e isso foi semelhante em ambos os grupos F11308 2675P 00001 Nenhum efeito principal ou suas interações envolvendo o fator sexo foram revelados na ANOVA da distância total percorrida dados não mostrados 29 Análises estatísticas Todos os dados foram submetidos a análises de variância ANOVA com tratamento dieta de controle vs exposição materna à dieta rica em gordura e sexo como fatores entre os sujeitos Fatores adicionais dentro dos sujeitos por exemplo ensaios dias também foram incluídos conforme determinado pela natureza das variáveis dependentes em consideração Análises restritas suplementares também foram conduzidas para auxiliar a interpretação dos dados sempre que apropriado Todos os dados são mostrados como médiaerro padrão de medida A significância estatística foi definida emp 005 Todas as análises estatísticas foram realizadas usando o software estatístico StatView versão 50 implementado em um PC executando o sistema operacional Windows XP 33 Neofobia alimentar Uma diminuição gradual na latência líquida para o consumo de alimentos foi observada tanto em filhotes nascidos de mães HFD quanto de controle nos três dias de teste utilizando ração familiar de laboratório Ambos os grupos de tratamento atingiram uma latência líquida mínima semelhante para consumir o alimento familiar no terceiro dia de teste Esta observação foi apoiada por um 223 tratamentosexodias ANOVA da latência líquida para o consumo de alimentos que revelou um efeito principal significativo de dias F240 3259P 00001 Figura 3 A exposição materna à HFD levou a um aumento na latência para consumir o novo alimento cornflakes Isso foi apoiado por um 22 3 Resultados 31 Labirinto em cruz elevado Um 22 tratamentosexo A ANOVA da porcentagem de tempo gasto nos braços abertos revelou um efeito principal significativo do tratamento Pesquisa do Cérebro Ural233 2012 398404 401 consumo do último dia de alimentos familiares com o dia de teste de novos alimentos empregando um 222 tratamentosexodias ANOVA A análise revelou uma interação significativa do tratamentodias F120 433P 005 demonstrando que os descendentes nascidos de mães HFD apresentaram maior latência para consumir o novo alimento em comparação aos descendentes de controle e esse efeito foi limitado ao dia do teste 34 Congelamento condicionado pavloviano 341 Condicionamento A resposta de congelamento ao tom CS aumentou em seus três pares sucessivos de tomchoque O desempenho entre os dois grupos de tratamento foi altamente comparável Um 223 tratamentosexoANOVA da porcentagem de congelamento de tempo produziu apenas um efeito principal significativo dos ensaios F256 1944P 00001 Figura 4um 342 Congelamento de contexto A expressão do congelamento condicionado em relação ao contexto Contexto A foi avaliada quando os animais retornaram à câmara de condicionamento 24 h após o condicionamento Os dados foram expressos como porcentagem de tempo de congelamento por compartimentos de 1 min e analisados usando um 224 tratamentosexo1 min bins ANOVA de congelamento de tempo percentual Houve um aumento geral no nível de congelamento em função do tempo levando a um efeito principal significativo dos bins F384 1029P 00001 Figura 4b O nível de congelamento foi mais pronunciado em mulheres em comparação aos homens A ANOVA produziu um efeito principal significativo do sexo F126 1234P 0002 dados não mostrados Figura 3O teste de neofobia alimentar A HFD materna levou a um aumento na latência para consumir o novo alimento cornflakes Nenhuma diferença significativa foi encontrada quando o alimento familiar ração de laboratório foi apresentado no terceiro dia de teste Todos os valores são médiasSEM O símbolo referese à significância estatística deP 005não Controle 12 6 homens 6 mulherese HFD 12 6 homens 6 mulheres tratamentosexo ANOVA da latência líquida do consumo de alimentos que produziu uma significância P 004 Figura 3 Nenhum outro significado tical Restringir 343 Congelamento de tom CS ramal como Figura 4Condicionamento pavloviano a um estímulo condicionado por tom CS a A aquisição de medo condicionado no dia do condicionamento O nível de congelamento expresso como uma porcentagem de congelamento de tempo de 30 s durante a apresentação do CS de tom é descrito como uma função de ensaios b O nível de congelamento como uma porcentagem de congelamento de tempo exibido ao longo de um período de 4 min quando os camundongos foram devolvidos ao mesmo contexto onde o pareamento de choque de tom ocorreu 24 h antes é ilustrado como uma função de intervalos de 1 min c O nível de congelamento como uma porcentagem de congelamento de tempo ao longo de três dias de teste de tom dias 35 d Porcentagem de congelamento de tempo expressa como uma função de intervalos sucessivos de 1 min colapsados ao longo dos 3 dias de teste de tom Não houve efeito da HFD materna na aquisição e expressão do congelamento condicionado Todos os valores são médiasSEMe Controle 16 8 machos 8 fêmeasnão HFD 16 8 homens 8 mulheres 402 Figura 5A RTPCR quantitativa foi usada para examinar os níveis de expressão de mRNA dos subtipos de receptores de serotonina 5HT1A e 5HT1B BDNF e GABAUMSubunidade R a2 no SNC de descendentes adultos que nasceram de mães HFD ou controle Descendentes nascidos de mães HFD tiveram um aumento significativo na expressão de BDNF no hipocampo dorsal e 5HT1A e GABAUM a2 no hipocampo ventral O nível de expressão de cada gene examinado foi normalizado paraGAPDHníveis e expressos em relação ao grupo de controle definido como 1 Os valores são médiasSEM O símbolo referese à significância estatística deP 005e Controle 7e HFD 8 porcentagem de tempo de congelamento por 1 min em caixas e analisadas usando um 2234 tratamentosexodias1 min bins ANOVA Congelamento de tom aprimorado foi observado em mulheres em comparação com homens e esta observação foi apoiada por um efeito principal significativo do sexo F128 1483P 00007 A resposta de congelamento condicionado geralmente diminuiu em função do tempo dentro e entre os dias Esse efeito de extinção foi evidente independentemente do sexo ou tratamento o que foi apoiado por efeitos principais significativos de dias F1256 1500P 00001 e caixas F384 626P 00008 bem como por um dia significativointeração de caixas F6168 319 P 0006 Figura 4c e b hipocampo dorsal e ventral regulando a emocionalidade na prole adulta No teste do labirinto em cruz elevado os filhotes nascidos de mães HFD apresentaram comportamento semelhante à ansiedade aprimorado em comparação com os controles uma vez que passaram menos tempo nos braços abertos do labirinto em cruz elevado O aumento recíproco no tempo gasto nos braços fechados não reflete comportamento exploratório alterado uma vez que não foram observadas diferenças entre os filhotes nascidos de mães HFD ou de controle na distância total percorrida no labirinto em cruz elevado ou no campo aberto Nossos dados estão de acordo com descobertas anteriores que demonstram níveis aumentados de ansiedade em filhotes nascidos de mães HFD maternas1322 Resultados indicativos de uma direção similar foram obtidos no teste de neofobia alimentar Aqui o comportamento semelhante à ansiedade é assumido como sendo expresso por uma supressão do comportamento consumatório diante de um novo alimento2324 O consumo de alimentos familiares em um novo ambiente foi inibido em extensão semelhante em descendentes de mães HFD e de controle Quando novos alimentos palatáveis foram apresentados os descendentes nascidos de mães HFD apresentaram maior inibição de comer em comparação aos descendentes nascidos de mães controle Essa maior inibição do consumo de alimentos foi restrita ao dia do teste quando os animais foram apresentados ao novo alimento Portanto concluímos que os descendentes nascidos de mães HFD maternas apresentam níveis elevados de comportamento semelhante à ansiedade Estudos recentes mostraram que os descendentes nascidos de mães HFD demonstram maior preferência por alimentos palatáveis como HFD ou solução de sacarose25sugerindo que o padrão de ansiedade acima mencionado não reflete uma diferença motivacional Os resultados descritos até agora são baseados em medidas não condicionadas de ansiedade Para testar se a prole da exposição materna à HFD mostra formas condicionadas alteradas de medo usamos a resposta emocional condicionada ao medo expressa no congelamento teste de condicionamento de medo pavloviano Tanto a prole HFD quanto a prole de controle exibiram altos níveis de congelamento subsequentes aos pares de choque de tom no dia do condicionamento No teste de congelamento contextual no mesmo ambiente que ocorreu 24 h depois e no teste de tom que ocorreu 48 h depois em um contexto diferente não houve diferença nos níveis de congelamento entre os dois grupos de prole 35 PCR em tempo real Examinamos a expressão de BDNF GABAUMSubunidade R a2 e os receptores de serotonina 5HT1A e 5HT1B no hipocampo dorsal dHP e no hipocampo ventral vHP usando RTPCR quantitativo As diferenças mais notáveis no dHP foram observadas na expressão de BDNF da prole HFD que foi quase 2 vezes maior do que na prole de camundongos controle F113 1002P 0007 A expressão de 5HT1AR 5HT1BR e GABAUMR 2 não diferiu significativamente entre os grupos de tratamento F113 082P 005 F113 001P 005F113 076P 005 respectivamente Figura 5 No vHP os níveis de 5HT1AR e GABA UMR 2 foi significativamente elevado em descendentes nascidos de mães HFD em comparação com descendentes nascidos de mães controle F113 518P 005F113 741P 002 eF113 504P 005 respectivamente Os níveis de expressão de 5HT1BR e BDNF não diferiram entre os grupos de tratamento F113 025 P 005F113 011 P 005 respectivamente Figura 5 4 Discussão O presente estudo mostra que a dieta materna rica em gordura por 9 semanas antes do acasalamento durante a gestação e durante a lactação afeta significativamente os comportamentos relacionados à ansiedade na prole adulta na ausência de mudanças na atividade locomotora espontânea e na resposta condicionada ao medo Essas mudanças no comportamento de ansiedade estão associadas a mudanças na expressão gênica de marcadores no D PelegRaibstein et al Pesquisa comportamental do cérebro233 2012 398404 403 Além disso a taxa de extinção em todos os grupos foi equivalente Esses resultados sugerem que a HFD materna não tem influência na resposta de medo condicionado Para entender as mudanças moleculares subjacentes ao fenótipo de ansiedade em descendentes de HFD analisamos marcadores relacionados à ansiedade no hipocampo uma vez que é considerada uma área importante do cérebro que controla a emocionalidade2628 Observamos mudanças significativas na expressão de três genes no hipocampo Um ou a combinação desses genes para o fenótipo semelhante à ansiedade aumentado visto em descendentes nascidos de mães HFD Escolhemos avaliar o sistema serotoninérgico uma vez que ele está fortemente implicado na regulação neural do humor e do estado de ansiedade e muitos medicamentos ansiolíticos comumente usados têm como alvo esse sistema em humanos2930 As concentrações hipocampais de serotonina aumentam nas primeiras duas semanas de vida em roedores31e a expressão adequada do receptor 5HT1A durante este período de tempo é crítica para estabelecer um comportamento normal semelhante à ansiedade na idade adulta 1819 Gross et al demonstraram que em camundongos com knockout global de 5HT1AR a reintrodução da expressão de 5HT1AR especificamente no hipocampo e no córtex durante o período pósnatal inicial mas não na idade adulta resgata o fenótipo de ansiedade desses camundongos18 Além disso os animais privados de cuidados maternos apresentam aumento da atividade serotoninérgica e aumento do comportamento ansioso3233e estudos sobre a desnutrição materna restrição alimentar durante períodos específicos de desenvolvimento afetam os sistemas neurotransmissores implicados na emocionalidade incluindo serotonina dopamina noradrenalina e glutamato e aumentam o comportamento de ansiedade na prole13436 Portanto insultos no início da vida podem induzir alterações no neurodesenvolvimento que podem levar ao desenvolvimento de transtornos de humor ou seja depressão ansiedade na idade adulta No estudo atual a exposição materna à HFD resultou em aumento da expressão gênica do 5 HT1AR no hipocampo ventral mas não dorsal A diferença na expressão do 5 HT1AR entre as duas regiões não é surpreendente dadas as diferenças funcionais entre as duas subregiões2337 Com base nos estudos acima mencionados e em nossas descobertas a HFD pode afetar o desenvolvimento do sistema serotoninérgico na prole o que pode levar ao aumento da atividade serotoninérgica e ao aumento do comportamento ansioso na idade adulta O BDNF é um fator neurotrófico amplamente expresso no sistema nervoso central SNC especialmente no hipocampo3839 que influencia quase todos os aspectos do desenvolvimento do SNC38 Em humanos o BDNF tem sido implicado em diferentes transtornos psiquiátricos incluindo ansiedade e depressão4042 Foi demonstrado que variações genéticas que resultam em maior liberação dependente de atividade de BDNF foram associadas a maiores traços de ansiedade43 enquanto um polimorfismo genético que reduz a atividade do BDNF foi protetor contra a ansiedade44 Em roedores várias linhas de evidência sugerem uma relação estreita entre o estado nutricional e os níveis de BDNF 4546 Por exemplo Coupe et al relataram que a subnutrição materna modifica os níveis de BDNF no SNC de ratos com crescimento restrito 45 Além disso a separação materna causou um aumento dramático no BDNF hipocampal na idade adulta4748 E finalmente os ratos com superexpressão de BDNF apresentam fenótipos semelhantes aos da ansiedade aumentados4950 e condicionamento normal do medo50 Portanto como a expressão do BDNF é regulada pelo estresse no início da vida e pela disponibilidade nutricional e mudanças nos níveis de BDNF correlacionadas com a ansiedade comparamos a expressão do BDNF entre os descendentes nascidos de mães controle e descendentes nascidos de mães expostas à HFD A exposição materna à HFD levou ao aumento da expressão do BDNF no hipocampo dorsal na prole adulta Esses resultados estão de acordo com relatórios publicados anteriormente uma vez que a superexpressão do BDNF no hipocampo dorsal usando vetores virais associados ao adenovírus recombinante rAAV levou ao aumento do comportamento semelhante à ansiedade no labirinto em cruz elevado51 Além disso em camundongos C57B6 selvagens a magnitude do comportamento semelhante à ansiedade no labirinto em cruz elevado correlacionase positivamente com os níveis de expressão do BDNF no hipocampo dorsal5253 Levado Juntos esses estudos e nossos dados indicam que a expressão do BDNF hipocampal é regulada pela nutrição materna e pela HFD e pode estar correlacionada ao aumento da ansiedade A interrupção do sistema neurotransmissor GABAérgico está implicada na fisiopatologia da ansiedade e sabese que os medicamentos ansiolíticos melhoram a transmissão GABAérgica aberrante5455 Especificamente as subunidades alfa dos receptores GABA estão associadas à ansiedade5657 Acreditase que os medicamentos benzodiazepínicos usados no tratamento de transtornos de ansiedade em humanos tenham como alvo principalmente os GABA alfa2 e alfa3UMreceptores5859 No entanto a ação ansiolítica do diazepam um GABA não seletivoUMO agonista R estava ausente em alfa2 mas não em alfa3 GABAUMratos mutantes receptores 60 sugerindo que o efeito ansiolítico dos medicamentos benzodiazepínicos é mediado pelo alfa2 GABAUMreceptores Dado que o alfa2 GABAUM Os receptores são altamente expressos no sistema límbico60 examinamos se a HFD materna modifica a expressão de GABAUM subunidade do receptor alfa2 na prole adulta De fato nossos resultados mostram que a exposição materna à HFD afetou o GABAUMexpressão da subunidade do receptor alfa2 no hipocampo ventral na idade adulta Até onde sabemos este é o primeiro relatório que fornece evidências de uma diferença específica da região no GABAUMexpressão da subunidade do receptor após exposição materna à HFD Nossos resultados sugerem que o insulto durante períodos críticos do desenvolvimento interrompe o desenvolvimento normal do sistema GABAérgico o que por sua vez pode contribuir para o aumento dos níveis de ansiedade na prole adulta Em conclusão a exposição materna à dieta rica em gordura em camundongos resulta em comportamentos semelhantes à ansiedade incondicional aumentados ao longo da vida e não afeta o comportamento de ansiedade condicionada Além disso a exposição materna à dieta rica em gordura aumenta a expressão de GABA UMsubunidade do receptor alfa2 e receptor 5HT1A no hipocampo ventral e do BDNF no hipocampo dorsal na prole adulta Uma implicação desses resultados é que distúrbios durante períodos críticos no início da vida como a exposição materna à dieta rica em gordura podem estar associados à modificação dos sistemas serotoninérgico GABAérgico e neurotrofina na prole Nossas descobertas podem portanto sugerir uma ligação entre a interrupção desses sistemas no início da vida e o surgimento de níveis aumentados de ansiedade na idade adulta Referências 1 LangleyEvans SC Programação nutricional da doença desvendando o mecanismo Journal of Anatomy 20092153651 2 Boksa P Modelos animais de complicações obstétricas em relação à esquizofrenia Brain Research Reviews 200445117 3 Kahn SE Hull RL Utzschneider KM Mecanismos que ligam a obesidade à resistência à insulina e ao diabetes tipo 2 Nature 20064448406 4 Marx J Desvendando as causas do diabetes Science 20022966869 5 Van Gaal LF Mertens IL De Block CE Mecanismos que ligam a obesidade com a doença cardiovascular Nature 200644487580 6 Barker DJ As origens da teoria das origens do desenvolvimento Journal of Internal Medicine 20072614127 7 Barker DJ Bull AR Osmond C Simmonds SJ Tamanho fetal e placentário e risco de hipertensão na vida adulta British Medical Journal 199030125962 8 Eriksson J Forsen T Tuomilehto J Osmond C Barker D Tamanho ao nascer crescimento infantil e obesidade na vida adulta International Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders 20012573540 9 McMillen IC Adam CL Muhlhausler BS Origens iniciais da obesidade programação do sistema regulador do apetite Journal of Physiology 2005565917 10 Holemans K Aerts L Van Assche FA Restrição do crescimento fetal e consequências para a prole em modelos animais Journal of the Society for Gynecologic Investigation 2003103929 11 Stocker CJ Arch JR Cawthorne MA Origens fetais da resistência à insulina e obesidade Proceedings of the Nutrition Society 20056414351 12 Bayol SA Farrington SJ Stickland NC Uma dieta materna de junk food durante a gravidez e lactação promove um gosto exacerbado por junk food e uma maior propensão à obesidade em filhotes de ratos British Journal of Nutrition 20079884351 13 Bilbo SD Tsang V Consequências duradouras da obesidade materna para a inflamação cerebral e comportamento da prole FASEB Journal 201024210415 14 Chechi K Herzberg GR Cheema SK A ingestão de gordura dietética materna durante a gestação e lactação altera a composição de ácidos graxos do tecido na prole adulta de camundongos C57Bl6 Prostaglandinas Leucotrienos e Ácidos Graxos Essenciais 20108397104 404 D PelegRaibstein et al Pesquisa comportamental do cérebro233 2012 398404 15 Elahi MM Cagampang FR Mukhtar D Anthony FW Ohri SK Hanson MA A alimentação materna rica em gordura a longo prazo do desmame à gestação e lactação predispõe a prole à hipertensão aumento de lipídios plasmáticos e fígado gorduroso em camundongos British Journal of Nutrition 20091025149 16 Gregorio BM SouzaMello V Carvalho JJ MandarimdeLacerda CA Aguila MB A ingestão materna de gordura elevada predispõe à doença hepática gordurosa não alcoólica em descendentes C57BL6 American Journal of Obstetrics and Gynecology 2010203495 e18e 17 Castren E Rantamaki T O papel do BDNF e seus receptores na depressão e na ação de medicamentos antidepressivos reativação da plasticidade do desenvolvimento Neurobiologia do Desenvolvimento 20107028997 18 Gross C Zhuang X Stark K Ramboz S Oosting R Kirby L et al O receptor de serotonina 1A atua durante o desenvolvimento para estabelecer um comportamento normal semelhante à ansiedade no adulto Nature 2002416396400 19 Heisler LK Chu HM Brennan TJ Danao JA Bajwa P Parsons LH et al Ansiedade elevada e respostas semelhantes a antidepressivos em camundongos mutantes do receptor de serotonina 5HT1A Anais da Academia Nacional de Ciências dos Estados Unidos da América 1998951504954 20 Yee BK Hauser J Dolgov VV Keist R Mohler H Rudolph U et al Os receptores GABA contendo a subunidade alfa5 mediam o efeito traço no condicionamento aversivo e apetitivo e na extinção do medo condicionado European Journal of Neuroscience 200420192836 21 Richmond MA Murphy CA Pouzet B Schmid P Rawlins JN Feldon J Uma análise controlada por computador do comportamento de congelamento Journal of Neuroscience Methods 199886919 22 Sullivan EL Grayson B Takahashi D Robertson N Maier A Bethea CL et al O consumo crônico de uma dieta rica em gordura durante a gravidez causa perturbações no sistema serotoninérgico e aumento do comportamento semelhante à ansiedade em descendentes de primatas não humanos Journal of Neuroscience 201030382630 23 Bannerman DM Deacon RM Offen S Friswell J Grubb M Rawlins JN Dupla dissociação de função dentro do hipocampo memória espacial e hiponeofagia Behavioral Neuroscience 2002116884901 24 Deacon RM Rawlins JN Lesões hipocampais comportamentos típicos da espécie e ansiedade em camundongos Pesquisa comportamental do cérebro 20051562419 25 Vucetic Z Kimmel J Totoki K Hollenbeck E Reyes TM Dieta rica em gordura materna altera a metilação e a expressão gênica de genes relacionados à dopamina e aos opioides Endocrinologia 2010151475664 26 Barkus C McHugh SB Sprengel R Seeburg PH Rawlins JN Bannerman DM Receptores NMDA hipocampais e ansiedade na interface entre cognição e emoção European Journal of Pharmacology 20106264956 27 Gray JA McNaughton N A neuropsicologia da ansiedade reprise Simpósio de Motivação de Nebraska 19964361134 28 McNaughton N Disfunção cognitiva resultante da hiperatividade hipocampal uma possível causa de transtorno de ansiedade Farmacologia Bioquímica e Comportamento 19975660311 29 SuranyiCadotte BE Bodnoff SR Welner SA Interações antidepressivasansiolíticas envolvimento dos sistemas benzodiazepínicoGABA e serotonina Progresso em Neuropsicofarmacologia e Psiquiatria Biológica 19901463354 30 Barrett JE Vanover KE Receptores 5HT como alvos para o desenvolvimento de novos medicamentos ansiolíticos modelos mecanismos e direções futuras Psicofarmacologia Berlim 1993112112 31 Lidov HG Molliver ME Um estudo imunohistoquímico do desenvolvimento do neurônio serotoninérgico no rato vias ascendentes e campos terminais Brain Research Bulletin 19828389430 32 Rentesi G Antoniou K Marselos M Fotopoulos A Alboycharali J Konstandi M Consequências de longo prazo da privação materna precoce na atividade serotoninérgica e na função HPA em ratos adultos Neuroscience Letters 2010480711 33 Spinelli S Chefer S Carson RE Jagoda E Lang L Heilig M et al Efeitos do estresse no início da vida sobre os receptores de serotonina 1A em macacos Rhesus jovens medidos por tomografia por emissão de pósitrons Psiquiatria Biológica 2010 67114653 34 Rotta LN Schmidt AP Mello e Souza T Nogueira CW Souza KB Izquierdo IA Efeitos da desnutrição sobre parâmetros glutamatérgicos no cérebro de ratos Neurochemical Research 20032811816 35 Levay EA Paolini AG Govic A Hazi A Penman J Kent S Comportamento semelhante à ansiedade em ratos adultos expostos perinatalmente à restrição calórica materna Pesquisa comportamental do cérebro 200819116472 36 Holmes A le Guisquet AM Vogel E Millstein RA Leman S Belzung C Fatores genéticos epigenéticos e ambientais no início da vida que moldam a emocionalidade em roedores Neuroscience and Biobehavioral Reviews 200529133546 37 Bannerman DM Rawlins JN McHugh SB Deacon RM Yee BK Bast T et al Dissociações regionais dentro do hipocampo memória e ansiedade Neuroscience and Biobehavioral Reviews 20042827383 38 TapiaArancibia L Rage F Givalois L Arancibia S Fisiologia do BDNF foco na função hipotalâmica Frontiers in Neuroendocrinology 20042577107 39 Leibrock J Lottspeich F Hohn A Hofer M Hengerer B Masiakowski P et al Clonagem molecular e expressão do fator neurotrófico derivado do cérebro Nature 198934114952 40 Duman RS Monteggia LM Um modelo neurotrófico para transtornos de humor relacionados ao estresse Psiquiatria Biológica 200659111627 41 Martinowich K Manji H Lu B Novos insights sobre a função do BDNF na depressão e ansiedade Nature Neuroscience 200710108993 42 Schmidt HD Duman RS O papel dos fatores neurotróficos na neurogênese hipocampal adulta tratamentos antidepressivos e modelos animais de comportamento semelhante ao depressivo Farmacologia Comportamental 200718391418 43 Lang UE Hellweg R Kalus P Bajbouj M Lenzen KP Sander T et al Associação de um polimorfismo funcional do BDNF e traços de personalidade relacionados à ansiedade Psicofarmacologia Berlim 2005180959 44 Jiang X Xu K Hoberman J Tian F Marko AJ Waheed JF et al Variação do BDNF e transtornos de humor um novo polimorfismo do promotor funcional e Val66Met estão associados à ansiedade mas têm efeitos opostos Neuropsicofarmacologia 200530135361 45 Coupé B DutriezCasteloot I Breton C Lefevre F Mairesse J DickesCoopman A et al A subnutrição perinatal modifica a proliferação celular e os níveis de fator neurotrófico derivado do cérebro durante janelas de tempo críticas para o desenvolvimento hipotalâmico e hipocampal no rato macho Journal of Neuroendocrinology 200921408 46 Mayeur S Silhol M Moitrot E Barbaux S Breton C Gabory A et al O sistema de sinalização BDNFTrkB da placenta é modulado por distúrbios do crescimento fetal em ratos e humanos Placenta 20103178591 47 Greisen MH Altar CA Bolwig TG Whitehead R Wortwein G Aumento do fator neurotrófico derivado do cérebro do hipocampo adulto e níveis normais de neurogênese em ratos de separação materna Journal of Neuroscience Research 2005797728 48 OSullivan E Barrett E Grenham S Fitzgerald P Stanton C Ross RP et al Expressão de BDNF no hipocampo de ratos separados maternalmente Bifidobacterium breve 6330 altera os níveis de BDNF Beneficial Microbes 20112199207 49 Govindarajan A Rao BS Nair D Trinh M Mawjee N Tonegawa S et al A expressão do fator neurotrófico derivado do cérebro transgênico causa efeitos ansiogênicos e antidepressivos Anais da Academia Nacional de Ciências dos Estados Unidos da América 20061031320813 50 Papaleo F Silverman JL Aney J Tian Q Barkan CL Chadman KK et al Déficits de memória de trabalho aumento de traços semelhantes à ansiedade e suscetibilidade a convulsões em camundongos com superexpressão de BDNF Aprendizagem e Memória 20111853444 51 Pietropaolo S Paterna JC Bueler H Feldon J Yee BK Alterações bidirecionais no aprendizado do labirinto aquático após expressão do fator neurotrófico derivado do cérebro mediada por vetor viral associado ao adenovírus recombinante rAAV no hipocampo do rato Farmacologia Comportamental 20071853347 52 Yee BK Zhu SW Mohammed AH Feldon J Níveis de fatores neurotróficos no hipocampo e na amígdala correlacionamse com comportamento relacionado à ansiedade e ao medo em camundongos C57BL6 Journal of Neural Transmission 200711443144 53 Zhu SW Yee BK Nyffeler M Winblad B Feldon J Mohammed AH Influência da habitação diferencial no comportamento emocional e nos níveis de neurotrofina em camundongos Pesquisa comportamental do cérebro 20061691020 54 Biggio G Concas A Corda MG Giorgi O Sanna E Serra M Transmissão GABAérgica e dopaminérgica no córtex cerebral do rato efeito do estresse drogas ansiolíticas e ansiogênicas Farmacologia e Terapêutica 19904812142 55 Petty F GABA e transtornos de humor uma breve revisão e hipótese Journal of Affective Disorders 19953427581 56 Mohler H O sistema GABA na ansiedade e depressão e seu potencial terapêutico Neurofarmacologia 2012624253 57 Mohler H Fritschy JM Luscher B Rudolph U Benson J Benke D Os receptores GABAA de subunidades para funções diversas Canais iônicos 1996489113 58 Mohler H Fritschy JM Rudolph U Uma nova farmacologia de benzodiazepínicos Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 200230028 59 Rudolph U Mohler H Análise da função do receptor GABAA e dissecação da farmacologia de benzodiazepínicos e anestésicos gerais por meio da genética de camundongos Revisão Anual de Farmacologia e Toxicologia 20044447598 60 Low K Crestani F Keist R Benke D Brunig I Benson JA et al Substrato molecular e neuronal para a atenuação seletiva da ansiedade Science 20002901314 Dieta materna rica em gorduras em camundongos programa o comportamento emocional na idade adulta APRESENTAÇÃO DE ARTIGO CIENTÍFICO Apresentador Liliana Marins RELEMBRANDO ÁREAS DO CÉREBRO Hipocampo Está associado à formação de memórias e ao aprendizado Ele desempenha um papel vital na conversão de memórias de curto prazo em memórias de longo prazo e também na navegação espacial O hipocampo é especialmente sensível a estresse e dietas desbalanceadas fatores que podem prejudicar a capacidade cognitiva e a memória Córtex préfrontal Localizado na parte frontal do cérebro é responsável por funções executivas como tomada de decisões controle de impulsos planejamento e comportamento social O córtex préfrontal também está envolvido no raciocínio lógico e na regulação das emoções Alterações nessa área podem impactar o autocontrole e o comportamento cognitivo Amígdala A amígdala está profundamente envolvida na regulação das emoções particularmente aquelas ligadas à resposta de medo e agressividade Ela também contribui para a formação de memórias emocionais ajudando a atribuir valor emocional às experiências vividas Disfunções na amígdala podem levar a alterações no processamento emocional como ansiedade e reações exageradas ao estresse O ambiente materno tem um papel crucial no desenvolvimento fetal influenciando o desenvolvimento cerebral e a saúde futura Estudos epidemiológicos como os de David Barker associam a desnutrição materna a um maior risco de doenças crônicas na vida adulta ecentemente a supernutrição e a obesidade materna também têm sido investigadas destacando que uma dieta rica em gordura durante a gestação pode alterar o desenvolvimento cerebral do feto Isso aumenta o risco de patologias como síndrome metabólica e diabetes tipo 2 além de potencialmente afetar o comportamento emocional dos descendentes incluindo a ansiedade INTRODUÇÃO Baixa oferta Alta oferta Gestando Definição Medo ou aversão a novos alimentos Comportamentos Hesitação ou recusa em experimentar alimentos desconhecidos Estudo Teste de neofobia alimentar para avaliar o impacto da dieta materna rica em gordura HFD nos filhotes Método Camundongos expostos a um novo alimento cornflakes após habituamento com ração familiar Medição do tempo para os filhotes começarem a consumir o novo alimento NEOFOBIA ALIMENTAR Definição Técnica utilizada para quantificar a expressão de genes associados a comportamentos emocionais e ansiedade Processo Coleta de tecido cerebral hipocampo Extração de RNA e conversão em cDNA Aplicação de qPCR para medir expressão gênica Genes analisados Sistemas GABAérgico e serotoninérgico Fator neurotrófico derivado do cérebro BDNF Vantagens Detecção e quantificação em tempo real da amplificação do DNA Análise precisa das alterações na expressão gênica em resposta à dieta materna PCR EM TEMPO REAL qPCR O objetivo do estudo foi investigar os efeitos da exposição a uma dieta rica em gordura HFD materna sobre o comportamento emocional e a ansiedade nos descendentes de camundongos OBJETIVO DO ESTUDO 1 Camundongos da linhagem C57BL6N 2 Ambiente controlado temperatura umidade ciclo de luz invertido 3 Aclimatação de 2 semanas 4 Divisão em dois grupos Grupo Experimental HFD Dieta rica em gordura 60 de energia proveniente de gordura 3 semanas antes da reprodução 3 semanas durante a gestação 3 semanas durante a lactação Grupo Controle Alimentação com ração normal 5 Desmame e sexagem dos filhotes 6 Manutenção em grupos de irmãos do mesmo sexo 7 Acesso ad libitum a ração e água condições controladas 8 Estudo aprovado pelo Escritório Veterinário Cantonal de Zurique seguindo diretrizes para uso de animais de laboratório MATERIAIS E MÉTODOS RESULTADOS Aumento da Ansiedade Filhotes de mães que consumiram HFD apresentaram Comportamentos de ansiedade aumentados Menor tempo nas áreas abertas do labirinto elevado Comparação com filhotes de mães em dieta controle aumento da ansiedade evidente Neofobia Alimentar Filhotes de mães HFD demonstraram Aumento na latência para consumir novos alimentos cornflakes Comparação com filhotes de mães controle comportamento de neofobia alimentar mais pronunciado Testes de condicionamento emocional Ambos os grupos HFD e controle mostraram altos níveis de congelamento após associação de tom com choque Não houve diferença significativa nos níveis de congelamento entre os grupos durante testes de medo contextual e de tom Conclusão A dieta materna não afetou a resposta condicionada de medo Resposta condicionada de medo Análise da expressão gênica no hipocampo revelou Mudanças significativas em três genes relacionados à ansiedade Sugestão de que a dieta materna HFD pode influenciar a expressão gênica que afeta o comportamento emocional dos filhotes Alterações Moleculares CONCLUSÃO Conclusão do Estudo Efeitos da dieta rica em gordura HFD Exposição em períodos críticos antes da concepção gestação e lactação causa efeitos significativos e duradouros no comportamento emocional dos filhotes Resultados Observados Filhotes de mães que consumiram HFD apresentaram Níveis aumentados de ansiedade Aumento na neofobia alimentar Não houve diferenças na resposta condicionada de medo em comparação com os filhotes de mães controle Análises Moleculares Alterações na expressão gênica observadas Genes relacionados aos sistemas GABAérgico e serotoninérgico Fator neurotrófico derivado do cérebro BDNF Sugestão de que a dieta materna pode influenciar a regulação emocional e comportamental dos descendentes Implicações Importância da nutrição materna como um fator crítico que pode programar comportamentos emocionais e de ansiedade na prole Potenciais implicações para a saúde mental ao longo da vida AGRADEÇO Estou à disposição REFERÊNCIAS PELEGRAIBSTEIN Daria LUCA Edlira WOLFRUM Christian Maternal highfat diet in mice programs emotional behavior in adulthood Behavioural brain research v 233 n 2 p 398404 2012 HALL John E HALL Michael E Guyton Hall Fundamentos de Fisiologia 14th ed Rio de Janeiro GEN Guanabara Koogan 2023 Ebook p1 ISBN 9788595159518