Controle de Qualidade Microbiologico e de Embalagens - Atividade Reflexiva

Atividade Reflexiva Temática Controle de qualidade microbiológico e de embalagens Disciplina Controle de qualidade de medicamentos e alimentos Professor Camila Rigobello 1 Objetivo Discriminar a importância e os tipos de testes microbiológicos exigidos para cada tipo de categoria de registro de produtos farmacêuticos estéril ou nãoestéril bem como os testes de controle de qualidade de embalagens previstos para cada material através da análise e interpretação dos resultados 2 Contextualizaçãoproblematização As inúmeras fontes de nutrientes em fármacos medicamentos e correlatos propiciam o crescimento de microrganismos cuja presença pode acarretar em prejuízos ao produto alterações organolépticas e das propriedades físicoquímicas eou usuário toxiinfecções de OLIVEIRA 2019 FB 2019 Avaliar o cumprimento das especificações microbiológicas é uma das competências do setor de controle de qualidade assegurando a correta execução das análises a fim de avaliar os produtos nas diferentes etapas do processo fabril BRASIL 2019 A depender da via de administração dos medicamentos e da probabilidade do acesso à corrente sanguínea os produtos são classificados como do tipo estéreis ou nãoestéreis FB 2019 Mesmo os produtos nãoestéreis devem ser submetidos ao controle de qualidade microbiológico uma vez que devese garantir que haja o cumprimento dos limites aceitáveis para os microrganismos viáveis e ausência de microrganismos patógenos PINTO KANEKO OHARA 2003 Os limites microbiológicos especificados e a frequência dos testes é variável nos produtos nãoestéreis a depender da origem da matériaprima vegetal mineral animal sintética e características do produto acabado tais como o elevado teor de água em soluções orais aquosas e cremes por exemplo FB 2019 Os medicamentos estéreis devem não só garantir a ausência de microrganismos viáveis mas também de endotoxinas FB 2019 As endotoxinas são substâncias advindas da estrutura do microrganismo capazes de acarretar em uma resposta pirogênica com presença de febre e inflamação Assim garantir sua ausência é importante pois os principais procedimentos de esterilização são pouco efetivos na remoção de endotoxinas GUIMARÃES 2017 3 Apresentação da atividadeexercício Analise cada um dos casos descritos abaixo e responda às questões propostas Responda a Quais são os meios de cultura e as técnicas de contagem que poderão ser utilizados para a contagem total dos microrganismos viáveis b Utilizando determinado método de contagem foram obtidos os seguintes resultados Diluição da amostra Colônias por placas UFCg ou mL 110 1600 1100 153 1 1000 17 Calcule as Unidades Formadoras de Colônias UFC constatadas em cada uma das diluições Ainda forneça a média obtida Dica Há um exemplo de cálculo para o método de contagem na aula de 03 da unidade 04 CASO 01 Considere que o setor de controle de qualidade microbiológico ao qual você trabalha deverá analisar amostras de comprimidos de captopril c Complete a tabela abaixo com os microrganismos patogênicos a serem analisados no produto em teste os respectivos meios de cultura e características das colônias que indicarão uma presença provável dos microrganismos MICRORGANISMO MEIO DE CULTURA CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA Número de tubos positivos Data da coleta 101 102 103 Dia 01 3 2 2 Dia 02 3 2 1 Dia 03 2 2 1 Dia 04 2 1 1 Dia 05 1 0 0 Responda a Qual o número mais provável NMP por mL de água em cada um dos dias CASO 02 Em uma estação de tratamento de água realizase a análise microbiológica diária da água a fim de identificar a presença de microrganismos Para o método de contagem foi empregada a técnica de número mais provável onde obtevese os seguintes dados Responda a Descreva quais são os meios de cultura utilizados durante o teste de esterilidade e para quais tipos de microrganismos cada um deles está voltado a pesquisar b Explique como é possível garantir que os meios de cultura irão promover o crescimento de microrganismos quando presentes na amostra c Descreva qual o tipo de inoculação é recomendado para realização do teste de esterilidade para o produto em teste e como este procedimento é realizado d A farmacopeia brasileira vigente especifica que o limite de endotoxina não pode ultrapassar 555 EUmg de butilbrometo de hioscina escopolamina Considerando o kit para o teste LAL a ser empregado apresenta uma sensibilidade de 0125EUmL Unidades de Endotoxina por mililitro calcule a máxima diluição válida MDV permitida para a análise da amostra sem que hajam prejuízos na determinação do limite de endotoxina e A imagem abaixo ilustra o que foi possível constatar no teste de endotoxina in vitro ao verter o tubo teste e controle O que é possível concluir a partir destes resultados Os dados obtidos são confiáveis CASO 03 Considere que o setor de controle de qualidade microbiológico ao qual você trabalha deverá analisar soluções aquosas injetáveis de butilbrometo de hioscina escopolamina a 200 mgmL em ampolas de 1 mL f Durante o controle de qualidade da embalagem vidro do tipo I realizouse a pesagem de 10 ampolas preenchidas com água destilada em temperatura de 24º C após estas terem sido taradas vazias e secas Analise os dados abaixo ilustrados e calcule a capacidade volumétrica total CVT 4 Referências bibliográficas BRASIL Agência Nacional de Vigilância Sanitária Resolução da Diretoria Colegiada nº 301 de 21 de Agosto de 2019 Dispõe sobre as Diretrizes Gerais de Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos Diário Oficial da União Poder Executivo Brasília 22 ago 2019 de OLIVEIRA A M Controle de qualidade recurso eletrônico volume 11 1ª ed Rio de Janeiro Atheneu 2019 FB FARMACOPEIA BRASILEIRA Agência Nacional de Vigilância Sanitária Farmacopeia Brasileira 6ed Vol 1 2019 Disponível em httpportalanvisagovbr GUIMARÃES DS Controle de Endotoxina na indústria Farmacêutica Análise dos Métodos In Vivo e In Vitro 2017 Monografia Pós Graduação em Tecnologias Industriais Farmacêutica Instituto de Tecnologia em Fármacos Farmanguinhos Fundação Oswaldo Cruz Rio de Janeiro 2017 43p Unidade Peso g Unidade Peso g 1 10220 6 10330 2 10123 7 10020 3 10103 8 09989 4 11111 9 10013 5 10001 10 09999 PINTO T J A KANEKO T M OHARA M T Controle biológico de qualidade de produtos farmacêuticos correlatos e cosméticos 2ed São Paulo Atheneu 2003 5 Fontes de pesquisa de OLIVEIRA A M Controle de qualidade recurso eletrônico volume 11 1ª ed Rio de Janeiro Atheneu 2019 FB FARMACOPEIA BRASILEIRA Agência Nacional de Vigilância Sanitária Farmacopeia Brasileira 6ed Vol 1 2019 Disponível em httpportalanvisagovbr Atividade Reflexiva Temática Controle de qualidade microbiológico e de embalagens Disciplina Controle de qualidade de medicamentos e alimentos Professor Camila Rigobello 1 Objetivo Discriminar a importância e os tipos de testes microbiológicos exigidos para cada tipo de categoria de registro de produtos farmacêuticos estéril ou nãoestéril bem como os testes de controle de qualidade de embalagens previstos para cada material através da análise e interpretação dos resultados 2 Contextualizaçãoproblematização As inúmeras fontes de nutrientes em fármacos medicamentos e correlatos propiciam o crescimento de microrganismos cuja presença pode acarretar em prejuízos ao produto alterações organolépticas e das propriedades físicoquímicas eou usuário toxiinfecções de OLIVEIRA 2019 FB 2019 Avaliar o cumprimento das especificações microbiológicas é uma das competências do setor de controle de qualidade assegurando a correta execução das análises a fim de avaliar os produtos nas diferentes etapas do processo fabril BRASIL 2019 A depender da via de administração dos medicamentos e da probabilidade do acesso à corrente sanguínea os produtos são classificados como do tipo estéreis ou nãoestéreis FB 2019 Mesmo os produtos nãoestéreis devem ser submetidos ao controle de qualidade microbiológico uma vez que devese garantir que haja o cumprimento dos limites aceitáveis para os microrganismos viáveis e ausência de microrganismos patógenos PINTO KANEKO OHARA 2003 Os limites microbiológicos especificados e a frequência dos testes é variável nos produtos nãoestéreis a depender da origem da matéria prima vegetal mineral animal sintética e características do produto acabado tais como o elevado teor de água em soluções orais aquosas e cremes por exemplo FB 2019 Os medicamentos estéreis devem não só garantir a ausência de microrganismos viáveis mas também de endotoxinas FB 2019 As endotoxinas são substâncias advindas da estrutura do microrganismo capazes de acarretar em uma resposta pirogênica com presença de febre e inflamação Assim garantir sua ausência é importante pois os principais procedimentos de esterilização são pouco efetivos na remoção de endotoxinas GUIMARÃES 2017 3 Apresentação da atividadeexercício Analise cada um dos casos descritos abaixo e responda às questões propostas CASO 01 Considere que o setor de controle de qualidade microbiológico ao qual você trabalha deverá analisar amostras de comprimidos de captopril Responda a Quais são os meios de cultura e as técnicas de contagem que poderão ser utilizados para a contagem total dos microrganismos viáveis R Os meios de cultura são ágar nutritivo triptona soja sabouraud macconkey e cetrimida e as técnicas de clivagem seriam contagem em placa em câmara de Neubauer ou por filtração bUtilizando determinado método de contagem foram obtidos os seguintes resultados Diluição da amostra Colônias por placas UFCg ou mL 110 1600 16000 UFCmL 1100 153 15300 UFCmL 1 1000 17 17000 UFCmL Calcule as Unidades Formadoras de Colônias UFC constatadas em cada uma das diluições Ainda forneça a média obtida Dica Há um exemplo de cálculo para o método de contagem na aula de 03 da unidade 04 c Complete a tabela abaixo com os microrganismos patogênicos a serem analisados no produto em teste os respectivos meios de cultura e características das colônias que indicarão uma presença provável dos microrganismos MICRORGANISMO MEIO DE CULTURA CARACTERÍSTICAS DA COLÔNIA E coli Ágar MacConkey Colônias rosadas pois fermentam lactose Salmonella spp Ágar xilose lysine deoxycholate Colônias amarelasvermelhas com ou sem centro preto Staphylococcus aureus Ágar BairdParker Colônias pretas ou cinza com halo de precipitação Listeria monocytogenes Ágar PALCAM Colônias pretas a cinzas opacas com halo de precipitação ao redor Clostridium botulinum Ágar TPGY Colônias opacas em forma de saco de papel com odor característico Candida albicans Ágar Sabouraud Colônias brancas e cremosas lisas ou rugosas com aspecto de levedura CASO 02 Em uma estação de tratamento de água realizase a análise microbiológica diária da água a fim de identificar a presença de microrganismos Para o método de contagem foi empregada a técnica de número mais provável onde obtevese os seguintes dados Responda a Qual o número mais provável NMP por mL de água em cada um dos dias Dia 1 20 NMPg DIa 2 17 NMPg Dia 3 12 NMPg Dia 4 92 NMPg Dia 5 2 NMPg CASO 03 Considere que o setor de controle de qualidade microbiológico ao qual você trabalha deverá analisar soluções aquosas injetáveis de butilbrometo de hioscina escopolamina a 200 mgmL em ampolas de 1 mL Responda a Descreva quais são os meios de cultura utilizados durante o teste de esterilidade e para quais tipos de microrganismos cada um deles está voltado a pesquisar R Os meios de cultura são Meio de cultura de Ágar Sabouraud meio usado para detectar fungos e leveduras Meio de cultura de Caldo de Soja Caseína TSB Tryptic Soy Broth usado para detectar bactérias aeróbias e anaeróbias estritas Meio de cultura de Caldo de Fosfato com Tween 80 meio usado para detecção de microrganismos fastidiosos como micobactérias Meio de cultura de Caldo de Tripticase de Soja TSB meio usado para detecção geral de bactérias Meio de cultura de Caldo de Peptona de Água PW meio de cultura específico para detecção de enterobactérias Meio de cultura de Caldo de Caldo Tioglicolato meio de cultura usado para detectar anaeróbios facultativos e bactérias microaerofílicas b Explique como é possível garantir que os meios de cultura irão promover o crescimento de microrganismos quando presentes na amostra R Os principais fatores que garantem que os meios de cultura sejam eficazes são Composição Química Adequada Os meios de cultura são formulados com base nas necessidades nutricionais dos microrganismos que se deseja detectar A composição química deve incluir fontes de carbono nitrogênio sais minerais vitaminas e outros nutrientes essenciais para o crescimento microbiano pH Apropriado O pH do meio de cultura deve ser ajustado para um valor adequado ao tipo de microrganismo que se deseja cultivar Condições de Aerobiose ou Anaerobiose alguns microrganismos são aeróbios o que significa que precisam de oxigênio para crescer enquanto outros são anaeróbios e crescem melhor em ausência de oxigênio Temperatura de Incubaçãoa temperatura de incubação do meio de cultura deve ser definida de acordo com a faixa de temperatura de crescimento dos microrganismosalvo Estéril meios de cultura devem ser estéreis antes de serem inoculados com a amostra Isso é alcançado pela esterilização adequada como autoclavagem ou filtração para eliminar qualquer contaminação antes de serem usados no teste de esterilidade Controle de Contaminação é essencial tomar medidas rigorosas para evitar a contaminação por outros microrganismos indesejados Isso inclui a realização de procedimentos em áreas limpas e utilizando técnicas assépticas Meios de Cultura Seletivos meios de cultura seletivos podem ser usados para inibir o crescimento de certos tipos de microrganismos permitindo apenas o crescimento dos microrganismos de interesse Isso é útil quando se deseja detectar um grupo específico de microrganismos em uma amostra complexa c Descreva qual o tipo de inoculação é recomendado para realização do teste de esterilidade para o produto em teste e como este procedimento é realizado R O tipo de inoculação recomendado para o teste de esterilidade em produtos farmacêuticos como o butilbrometo de hioscina escopolamina a 200 mgmL em ampolas de 1 mL é a inoculação direta Neste procedimento uma pequena quantidade da amostra do produto é transferida para o meio de cultura estéril A amostra é distribuída uniformemente no meio de cultura e são incubados nas condições apropriadas de temperatura e tempo para permitir o crescimento de microrganismos caso estejam presentes na amostra d A farmacopeia brasileira vigente especifica que o limite de endotoxina não pode ultrapassar 555 EUmg de butilbrometo de hioscina escopolamina Considerando o kit para o teste LAL a ser empregado apresenta uma sensibilidade de 0125EUmL Unidades de Endotoxina por mililitro calcule a máxima diluição válida MDV permitida para a análise da amostra sem que hajam prejuízos na determinação do limite de endotoxina R Limite de Endotoxina 555 EUmg x 1 mgmL 555 EUmL MDV Limite de Endotoxina Sensibilidade do Kit MDV 555 EUmL 0125 EUmL 4440 Portanto a Máxima Diluição Válida MDV permitida para a análise da amostra é de 4440 vezes e A imagem abaixo ilustra o que foi possível constatar no teste de endotoxina in vitro ao verter o tubo teste e controle O que é possível concluir a partir destes resultados Os dados obtidos são confiáveis R Foi possível constatar que houve diferença entre os resultados havendo presença de endotoxinas no controle e não no tubo teste Tendo em vista o método utilizado os resultados podem ser considerados confiáveis f Durante o controle de qualidade da embalagem vidro do tipo I realizou se a pesagem de 10 ampolas preenchidas com água destilada em temperatura de 24º C após estas terem sido taradas vazias e secas Analise os dados abaixo ilustrados e calcule a capacidade volumétrica total CVT Unidade Peso g Unidade Peso g 1 10220 6 10330 2 10123 7 10020 3 10103 8 09989 4 11111 9 10013 5 10001 10 09999 Para calcular a capacidade volumétrica total CVT das ampolas você pode utilizar a média dos pesos das ampolas preenchidas com água destilada Aqui está o cálculo R 10220 10123 10103 11111 10001 10330 10020 09989 10013 09999 101919 gramas CVT 101919 g 10 101919 g por ampola 4 Referências bibliográficas BRASIL Agência Nacional de Vigilância Sanitária Resolução da Diretoria Colegiada nº 301 de 21 de Agosto de 2019 Dispõe sobre as Diretrizes Gerais de Boas Práticas de Fabricação de Medicamentos Diário Oficial da União Poder Executivo Brasília 22 ago 2019 de OLIVEIRA A M Controle de qualidade recurso eletrônico volume 11 1ª ed Rio de Janeiro Atheneu 2019 FB FARMACOPEIA BRASILEIRA Agência Nacional de Vigilância Sanitária Farmacopeia Brasileira 6ed Vol 1 2019 Disponível em httpportalanvisagovbr GUIMARÃES DS Controle de Endotoxina na indústria Farmacêutica Análise dos Métodos In Vivo e In Vitro 2017 Monografia Pós Graduação em Tecnologias Industriais Farmacêutica Instituto de Tecnologia em Fármacos Farmanguinhos Fundação Oswaldo Cruz Rio de Janeiro 2017 43p PINTO T J A KANEKO T M OHARA M T Controle biológico de qualidade de produtos farmacêuticos correlatos e cosméticos 2ed São Paulo Atheneu 2003 5 Fontes de pesquisa de OLIVEIRA A M Controle de qualidade recurso eletrônico volume 11 1ª ed Rio de Janeiro Atheneu 2019 FB FARMACOPEIA BRASILEIRA Agência Nacional de Vigilância Sanitária Farmacopeia Brasileira 6ed Vol 1 2019 Disponível em httpportalanvisagovbr