Exercicios de Fixacao - Pirosequenciamento e Diagnostico Molecular

Exercício de Fixação Pirosequenciamento Programa de Pós Graduação Diagnóstico Molecular de Doenças Genéticas Disciplina Técnicas Aplicadas ao Diagnóstico Molecular Professor Sabrina de Andrade Franco Parma Aluno Oferta 7 Turma 1 Valor 10 pontos No pirosequenciamento existe uma proporcionalidade entre as amplitudes e o número de nucleotídeos incorporados Ao realizar as análises dos pirogramas gerados é possível observar que as adeninas incorporadas geram um pico de amplitude maior que os demais nucleotídeos Descreva o motivo da ocorrência desse evento e explique sua importância durante o processo de sequenciamento A principal aplicação do pirosequenciamento são leituras curtas sendo uma das mais comuns técnicas utilizadas em laboratórios clínicos para realizar sequenciamentos de oncogenes em tumores onde a porcentagem de células tumorais pode ser baixa com cerca de apenas 10 Tendo em vista a informação acima descreva qual a importância da dispensação otimizada quais momentos devemos optar por esse tipo de dispensação e quais os principais problemas que podem ser encontrados Numa análise de diagnóstico molecular clínico temos que inserir na corrida controles selvagens e controles brancos para cada fragmento que será pesquisado Relate qual a importância desses dois controles Durante a análise de um pirograma foi observado um controle selvagem com perfil mutado para uma variante clinicamente importante Nessa situação elabore de forma detalhada quais os procedimentos e quais as investigações que devemos adotar nessa corrida Um médico oncologista pediu uma pesquisa de mutações clinicamente relevantes nos códons 12 e 13 do gene KRAS para um paciente com tumor de colorretal Após o processamento da amostra no sequenciamento obtivemos o perfil de pirograma representado na imagem abaixo Descreva ao menos duas decisões que devemos adotar com essa amostra visto que os controles branco e selvagem foram validados na corrida