Exercicios Resolvidos Pirosequenciamento Diagnostico Molecular Genetica

Exercício de Fixação Pirosequenciamento Programa de Pós Graduação Diagnóstico Molecular de Doenças Genéticas Disciplina Técnicas Aplicadas ao Diagnóstico Molecular Professor Sabrina de Andrade Franco Parma Aluno Oferta 7 Turma 1 Valor 10 pontos 1 No pirosequenciamento existe uma proporcionalidade entre as amplitudes e o número de nucleotídeos incorporados Ao realizar as análises dos pirogramas gerados é possível observar que as adeninas incorporadas geram um pico de amplitude maior que os demais nucleotídeos Descreva o motivo da ocorrência desse evento e explique sua importância durante o processo de sequenciamento 2 A principal aplicação do pirosequenciamento são leituras curtas sendo uma das mais comuns técnicas utilizadas em laboratórios clínicos para realizar sequenciamentos de oncogenes em tumores onde a porcentagem de células tumorais pode ser baixa com cerca de apenas 10 Tendo em vista a informação acima descreva qual a importância da dispensação otimizada quais momentos devemos optar por esse tipo de dispensação e quais os principais problemas que podem ser encontrados 3 Numa análise de diagnóstico molecular clínico temos que inserir na corrida controles selvagens e controles brancos para cada fragmento que será pesquisado Relate qual a importância desses dois controles 4 Durante a análise de um pirograma foi observado um controle selvagem com perfil mutado para uma variante clinicamente importante Nessa situação elabore de forma detalhada quais os procedimentos e quais as investigações que devemos adotar nessa corrida 5 Um médico oncologista pediu uma pesquisa de mutações clinicamente relevantes nos códons 12 e 13 do gene KRAS para um paciente com tumor de colorretal Após o processamento da amostra no sequenciamento obtivemos o perfil de pirograma representado na imagem abaixo Descreva ao menos duas decisões que devemos adotar com essa amostra visto que os controles branco e selvagem foram validados na corrida