Cálculo de Unidades Formadoras de Colônias (UFC)

Regra 1 Se a contagem foi feita numa placa inoculada com a amostra sem diluição sem duplicata o número de unidades formadoras de colónias UFC é igual ao número de colónias Exemplos 1 e 2 Se foi feita duplicata o número de UFC é igual à média aritmética da contagem obtida em cada uma das placas da duplicata Exemplos 3 e 4 Regra 2 Se a contagem foi feita numa placa inoculada com a diluição 10¹ ou maior sem duplicata calcular o número de UFCg ou ml multiplicando o número de colónias pelo inverso da diluição inoculada O inverso da diluição 10¹ é 10¹ o inverso da 10² é 10² e assim por diante Exemplos 5 e 6 Se foi feita duplicata considerar como número de colónias a média aritmética da contagem obtida em cada uma das placas da duplicata e multiplicar pelo inverso da diluição Exemplos 7 e 8 Regra 3 Se o volume inoculado da primeira diluição ou da amostra sem diluição foi diferente de 1ml e a contagem foi feita na placa inoculada com esse volume valem as regras anteriores mas o número de colónias deve ser dividido pelo volume inoculado para calcular o resultado Exemplos 9 10 11 e 12 Regra 9 Todas as placas com mais de 250 colônias Nestes casos há quatro alternativas para estimar o número de UFCg ou ml Em todos os casos o resultado deve ser apresentado como contagem estimada est 9a Se for possível contar todas as colônias da placa contar e calcular o número de UFC a partir da contagem obtida Exemplos 23 e 35 do Quadro 31 9b Se não for possível contar todas as colônias da placa mas o número de colôniascm² estiver abaixo de 10 contar as colônias em 12 quadrados de 1cm² 6 quadrados consecutivos na horizontal e 6 quadrados consecutivos na vertical utilizando os quadrados demarcados no contador de colônias como guia Calcular o número médio de colôniascm² e a partir da média determinar o número total de colônias na placa multiplicando a média pela área total da placa Lembrar que a área total da placa é igual a πd²4 onde d é o diâmetro interno Por exemplo placas de 100mm têm diâmetro interno por volta de 9cme área total de aproximadamente 65cm² Utilizar este número total de colônias para calcular o número de UFC Exemplo 24 do Quadro 31 9c Se o número de colôniascm² for maior do que 10 contar as colônias em quatro quadrados representativos da distribuição das colônias nas placas e calcular o número de UFC da mesma forma utilizada no caso de 12 quadrados Exemplo 25 do Quadro 31 9d Se o número de colôniascm² for maior do que 100 apresentar o resultado como maior do que a área total da placa x inverso da diluição Exemplo 26 do Quadro 31 Regra 12 Placas em que o crescimento é proporcionalmente maior nas maiores diluições Esta situação pode ser decorrente da contaminação acidental da amostra durante o plaquetamento de erro na identificação da diluição nas placas ou da presença de substâncias inibidoras na amostra Considerar o resultado como acidente de laboratório e repetir o ensaio Se a suspeita de presença de substâncias inibidoras na amostra for alta utilizar na repetição um procedimento adequado para suprimir ou reduzir a influência desses componentes no resultado vide anexo 22 do Capítulo 2 Exemplo 29 do Quadro 31 Quadro 31 Exemplos do cálculo dos resultados do plaquetamento em profundidade em condições não ideais