Lista Interação de Proteínas

1 Explique o princípio do ensaio de doishíbridos para determinar a interação entre proteínas 2 Quando o ensaio é realizado em levedura célula hospedeira a seleção de clones é feita principalmente por seleção auxotrófica Explique esse aspecto exemplificando o modelo 3 Quando o ensaio é realizado em células animais células humanas pex a interação é identificada por um sistema repórter por exemplo a atividade da enzima luciferase Explique essa bordagem exemplificando o modelo 4 Em um ensaio de doishíbridos para determinar a putativa interação entre duas proteínas em um modelo em leveduras foram usados os vetores pGBKT7 e pGADT7 Sabendo que o ensaio foi conduzido em S cerevisiae usando um repórter de interação genômico pontue as três características do genótipo de uma cepa de escolha para o ensaio 5 No Mammalian TwoHybrid System CheckMateTM figura abaixo o domínio de ligação ao DNA e o domínio de ativação transcricional produzidos por plasmídeos separados estão intimamente associados quando uma proteína X fusionada a um domínio de ligação ao DNA interage com uma segunda proteína Y fusionado a um domínio de ativação transcricional Nesse sistema a interação entre as proteínas X e Y resulta na transcrição de um gene repórter Referência Sadowski I et al 1988 Nature 335 5634 Entre os vetores apresentados na figura acima identifique a construção codificante da proteína de fusão encerrando a o ativador transcricional b o domínio de ligação ao DNA e c a construção codificante do sistema repórter