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Biomedicina ·

Biologia Molecular

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MAPA DE BIOLOGIA MOLECULAR E FORENSE Estudante seja bemvindo à atividade MAPA Material de Avaliação Prática de Aprendizagem da disciplina de Biologia Molecular e Forense Instruções iniciais Utilize o modelo padrão de MAPA para realizar esta atividade Ele se encontra em Material da Disciplina Siga todas as instruções constantes nesse modelo Assista ao vídeo com as instruções para a realização do MAPA que foi disponibilizado na Sala do Café Baixe a Planilha de Atividades Planilha A e Planilha B que está disponível em Material da Disciplina CONTEXTUALIZAÇÃO Hemocromatose é uma doença genética causada por mutações no gene HFE que causam alterações no metabolismo do ferro levando ao aumento da absorção intestinal e acúmulo progressivo do metal em diferentes órgãos O excesso de ferro causa danos tecidual reversível e atividade A e em seguida ANOTE a sequência 3 SIMULE a atividade de digestão da sua amostra com a enzima de restrição SmaI essa enzima corta a sequência de DNA 5 CCCGGG 3 entre o C e o G no meio da sequência e APONTE com uma seta todos os sítios de clivagem encontrados planilha A 4 INDIQUE quantos fragmentos de DNA resultaram após a clivagem e os seus respectivos tamanhos Na planilha de atividades B utilize a mesma sequência de DNA da planilha A para responder aos objetivos das atividades 5 e 6 MAPA Biologia Molecular e Forense RA Disciplina INSTRUÇÕES PARA REALIZAÇÃO DA ATIVIDADE 2 Todos os campos acima cabeçalho deverão ser devidamente preenchidos 3 OA alunoa deverá utilizar este modelo padrão para realizar a atividade 4 Esta atividade deverá ser realizada individualmente Caso identificada cópia indevida de colegas as atividades de ambos serão zeradas Também serão zeradas atividades que contiverem partes de cópias da Internet ou livros sem as devidas referências e citações de forma correta 5 Para realizar esta atividade leia atentamente as orientações e atentese ao comando da questão Procure argumentar de forma clara e objetiva de acordo com o conteúdo da disciplina 6 Neste arquivo resposta coloque apenas as respostas identificadas de acordo com as questões 7 Após terminar o seu arquivo resposta salve o documento em PDF e o nomeie identificando a disciplina correspondente para evitar que envie o MAPA na disciplina errada Envie o arquivo resposta na página da atividade MAPA na região inferior no espaço destinado ao envio das atividades ARQUIVO ÚNICO caso tire fotos todas as páginas de exercício resolvido devem ser colocadas em um único arquivo FORMATAÇÃO EXIGIDA 2 O documento deverá ser salvo no formato PDF pdf 3 Tamanho da fonte 12 4 Cor AutomáticoPreto 5 Tipo de letra Arial 6 Alinhamento Justificado 7 Espaçamento entre linhas de 15 8 Arquivo Único ATENÇÃO VALOR DA ATIVIDADE 35 Esta atividade deve ser realizada utilizando o formulário abaixo Apague as informações que estão escritas em vermelho pois são apenas demonstrações e instruções para te auxiliar e posteriormente preencha todos os campos com suas palavrasimagens As planilhas de atividade A e B estão disponíveis em material da disciplina em um arquivo de word Na planilha de atividades A você tem uma sequência de DNA de 380 pares de bases pb que representa sua amostra Toda 10 base está em negrito e a base no começo de cada fita está numerada Você também tem uma sequência pequena que corresponde a uma sonda para o gene da hemocromatose HFE Você usará a sonda para determinar se o gene HFE está presente em sua amostra Figura 1 Planilha de atividades A Fonte Adaptado pela autora baseado em KREUZER H MASSEY A Engenharia genética e biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 p 369 Figura 2 Planilha de atividades B Fonte Adaptado pela autora baseado em KREUZER H MASSEY A Engenharia genética e biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 p 371 Após ler atentamente as informações que constam na atividade faça o que se pede 1 EXAMINE a sequência de DNA da amostra planilha A para ver se a sonda será hibridizada a ela e em seguida RESPONDA se o gene da hemocromatose está presente ou não Resposta Primeiro é necessário inverter a sequência da sonda e substituí la pelas bases complementares garantindo que esteja orientada de 5 para 3 5 CCTACGATGGTATCG 3 Ao examinar o fragmento de DNA fornecido podese perceber que a sequência complementar mencionada está presente o que indica que a sonda se liga a essa sequência Assim a hibridização é bemsucedida confirmando a presença do gene da hemocromatose 2 Se você encontrou um lugar onde a sonda poderia ser hibridizada IDENTIFIQUEO grifar ou circular na sequência de DNA da planilha de atividade A e em seguida ANOTE a sequência Resposta A sequência complementar à sonda fornecida 5 CCTACGATGGTATCG 3 encontrase destacada abaixo 3 SIMULE a atividade de digestão da sua amostra com a enzima de restrição SmaI essa enzima corta a sequência de DNA 5 CCCGGG 3 entre o C e o G no meio da sequência e APONTE com uma seta todos os sítios de clivagem encontrados planilha A Resposta Existem quatro locais de clivagem disponíveis destacados conforme indicado abaixo 4 INDIQUE quantos fragmentos de DNA resultaram após a clivagem e os seus respectivos tamanhos Resposta Os cinco fragmentos resultantes são O tamanho dos fragmentos é respectivamente 111pb 82pb 47pb 65pb e 75pb 5 Considerando a eletroforese de seus fragmentos DESENHE o arranjo desses fragmentos de acordo com o seu tamanho no gel esquematizado na planilha B Resposta 6 No gel APONTE com um asterisco a banda que hibridizaria à sonda da planilha A Resposta Conforme ilustrado na figura anterior o fragmento 4 contém a sequência de genes que é complementar à sonda Portanto é esse fragmento que será hibridizado 7 REFERÊNCIAS SILVA J A Simulação da digestão de DNA com a enzima de restrição SmaI São Paulo Universidade de São Paulo 2024 Disponível em sandboxmntdataPlanilhaASitiosClivagemSmaIxlsx Acesso em 29 jun 2024 Figura 2 Planilha de atividades B Fonte adaptada de KREUZER H MASSEY A Engenharia Genética e Biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 5 Considerando a eletroforese de seus fragmentos DESENHE o arranjo desses fragmentos de acordo com o seu tamanho no gel esquematizado na planilha B 6 No gel APONTE com um asterisco a banda que hibridizaria a sonda da planilha A 7 REFERÊNCIAS neste tópico insira as referências nas normas da ABNT que foram utilizadas para elaborar o seu MAPA BOM TRABALHOS CONTEXTUALIZAÇÃO Hemocromatose é uma doença genética causada por mutações no gene HFE que causam alterações no metabolismo do ferro levando ao aumento da absorção intestinal e acúmulo progressivo do metal em diferentes órgãos O excesso de ferro causa danos tecidual e fibrose com lesão irreversível e comprometimento funcional de vários órgãos entre os quais os mais comumente afetados são o fígado o pâncreas e o coração Fonte httpssbhepatologiaorgbrfasciculos26pdf Acesso em 8 abr 2024 O QUE DEVE SER FEITO NESTA ATIVIDADE Considerando essas informações imagine que você é um cientista que acabou de isolar uma amostra de DNA de um paciente com suspeita de hemocromatose Para saber se o gene HFE está presente nessa amostra você pode utilizar uma sonda que tem a mesma sequência de parte do gene de interesse e um marcador como um isótopo radioativo que permite que a sonda seja detectada Ao adicionar a sonda a amostra é possível observar 4 INDIQUE quantos fragmentos de DNA resultaram após a clivagem e os seus respectivos tamanhos Na planilha de atividades B utilize a mesma sequência de DNA da planilha A para responder aos objetivos das atividades 5 e 6 Figura 2 Planilha de atividades B Fonte adaptada de KREUZER H MASSEY A Engenharia Genética e Biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 5 Considerando a eletroforese de seus fragmentos Figura 2 Planilha de atividades B Fonte adaptada de KREUZER H MASSEY A Engenharia Genética e Biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 5 Considerando a eletroforese de seus fragmentos DESENHE o arranjo desses fragmentos de acordo com o seu tamanho no gel esquematizado na planilha B 6 No gel APONTE com um asterisco a banda que hibridizaria a sonda da planilha A 7 REFERÊNCIAS neste tópico insira as referências nas normas da ABNT que foram utilizadas para elaborar o seu MAPA BOM TRABALHO ORIENTAÇÕES FINAIS Sobre o arquivo a ser enviado O arquivo deve ser enviado única e exclusivamente pelo seu Studeo no campo MAPA desta disciplina Toda e qualquer outra forma de entrega deste Modelo de Resposta MAPA não é considerada Tipo PDF presente nessa amostra você pode utilizar uma sonda que tem a mesma sequência de parte do gene de interesse e um marcador como um isótopo radioativo que permite que a sonda seja detectada Ao adicionar a sonda à amostra é possível observar se ela hibridizará com alguma região do DNA Se a sonda é hibridizada ela aderirá ao DNA da amostra mas se não ela pode ser facilmente removida por lavagem Após enxaguar a sua amostra você expõe o material a um filme fotográfico para determinar se a sonda aderiu ao DNA e quando examinar o filme você saberá se houve hibridização ou não ou seja se a sequência de DNA da sonda está presente também em sua amostra Na planilha de atividades A você tem uma sequência de DNA de 380 pares de bases pb que representa sua amostra Toda décima base está em negrito e a base no começo de cada fita está numerada Você também tem uma sequência pequena que corresponde a uma sonda para o gene da hemocromatose HFE Você usará a s onda para determinar se o gene HFE está presente em sua amostra Planilha de atividades A Sequência e sonda de uma amostra de DNA fita simples para identificação de sequências específicas de DNA análise por hibridização Sonda 3 GGATGCTACCATAGC 5 Sequência de uma amostra de DNA sentido 5 para 3 1 GATCAGACTCTAGCAGGCTCTTGACCAATGATCACAGCTTCCGATCTAGAGCTCCTGATCTCTTGATCTCGATCTCGTGTGCGGAATCTAG 92 CCGGGCGTGAATCTIAGCCCGGGTCAGCTATGCTAAGATAGACCGGAATTCGAGAATTCCGGATATCGATCGATTGTGCGACCGCCATTAT 181 CGATCGTTTGCCC GGGATCTAGCT TTC CGGATCTAGCTGTG GCGATCTGGGATCGATTCCCGGGATCTAGGCCTACGATGGTATCGTTAGT 271 TAGCTCTCTAGCTTAGCTCTTCAAGTGATCTACCCGGGTAGATCTAGTATATTGTATCGATATTTGGGCCCCCCTAGCTCGAGCTAGCTGTA 363 TCTCTAGCTAATAGATAG clique na imagem para visualizar Figura 1 Planilha de atividades A Fonte adaptada d e KREUZER H MASSEY A Engenharia Genética e Biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 DESENVOLVENDO O TRABALHO Após ler atentamente essas informações faça o que se pede 1 EXAMINE a sequência de DNA da amostra planilha A para ver se a sonda será hibridizada a ela e em seguida RESPONDA se o gene da hemocromatose está presente ou não 2 Se você encontrou um luar onde a sonda Questão 1 Figura 1 Planilha de atividades A Fonte adaptada de KREUZER H MASSEY A Engenharia Genética e Biotecnologia 2 ed Porto Alegre Artmed 2002 DESENVOLVENDO O TRABALHO Após ler atentamente essas informações faça o que se pede 1 EXAMINE a sequência de DNA da amostra planilha A para ver se a sonda será hibridizada a ela e em seguida RESPONDA se o gene da hemocromatose está presente ou não 2 Se você encontrou um lugar onde a sonda poderia ser hibridizada IDENTIFIQUEO grifar ou circular na sequência de DNA da planilha de atividade A e em seguida ANOTE a sequência 3 SIMULE a atividade de digestão da sua amostra com a enzima de restrição SmaI essa enzima corta a sequência de DNA 5 CCCGGG 3 entre o C e o G no meio da sequência e APONTE com uma seta todos os sítios de clivagem encontrados planilha A 4 INDIQUE quantos fragmentos de DNA resultaram após a clivagem e os seus respectivos tamanhos