Estudo Dirigido Microbiologia - Identificação e Diferenciação de Bactérias

Atividade avaliativa de microbiologia Estudo dirigido Questão 01 Desenhe o esquema de como identificar e diferenciar bactérias gram negativas e quais são suas provas detalhando o tipo de prova e como proceder com cada uma Questão 02 Para que serve uma coloração de gram e quando é indicado fazer uma o que esta metodologia acrescenta em uma rotina Questão 04 Explique e diferencie o que são meios seletivos e não seletivos indicando ainda o que são meios de crescimento e meios diferenciais Questão 05 O que são meios cromogênicos e como estes são usados em uma rotina laboratorial Questão 06 Explique sucintamente o que é o teste de camp e quando é realizado este teste Questão 07 Explique o por que é tão complicado de tratar infecções de fungos e como estas podem implicar em um desgaste celular humano Questão 08 Explique o que é tintura da china o meio adequado para o crescimento de fungos e como diferenciar as suas estruturas Questão 09 Explique as provas do Indol para os bacilos BGN Questão 10 Explique sucintamente como é realizada a coleta do LCR e quais os principais cuidados desde a coleta até o seu método de processamento Questão 11 Explicar os principais métodos de antibiograma e como estes são realizados além disso cite os principais mecanismos de resistências de bactérias Questão 12 Explique o que é o efeito antabuse e como este pode implicar em uma resistência de bactérias Respostas da atividade 2 A coloração de Gram é uma técnica laboratorial que permite diferenciar bactérias em Grampositivas ou Gramnegativas com base nas diferenças de suas paredes celulares A técnica envolve a adição de corantes cristais de violeta e iodeto de potássio seguido de um decolorante álcool ou acetona e uma contracorante safranina Essa técnica é amplamente utilizada em microbiologia para a identificação preliminar de bactérias em amostras clínicas ambientais e alimentares A coloração de Gram é indicada quando se deseja identificar a presença o tipo e a quantidade de bactérias em uma amostra o que auxilia no diagnóstico e tratamento de infecções bacterianas Na rotina laboratorial a coloração de Gram é uma técnica rápida e eficiente que pode ser realizada em amostras de esfregaços de vários tipos de materiais clínicos como sangue urina secreções e fluidos corporais Além disso essa metodologia permite uma rápida identificação de algumas bactérias importantes como os estreptococos estafilococos e bacilos gramnegativos Assim a coloração de Gram é uma importante ferramenta para a identificação e caracterização preliminar de bactérias sendo amplamente utilizada em laboratórios de microbiologia em todo o mundo 4 Os meios de cultura são compostos utilizados para o crescimento e manutenção de microrganismos em laboratório Eles podem ser classificados em diferentes tipos de acordo com suas propriedades e funcionalidades Entre os principais tipos de meios de cultura destacamse os meios seletivos não seletivos diferenciais e de enriquecimento Os meios seletivos são aqueles que possuem componentes que inibem o crescimento de alguns tipos de microrganismos enquanto favorecem o crescimento de outros Esses meios são úteis para o isolamento de bactérias específicas em amostras complexas como o sangue ou fezes por exemplo Eles podem conter antibióticos sais biliares ou outros compostos que inibem o crescimento de microrganismos indesejados Por outro lado os meios não seletivos são aqueles que não possuem componentes que inibem o crescimento de nenhum tipo de microrganismo permitindo o crescimento de diversos tipos de bactérias fungos e outros microrganismos presentes na amostra Esses meios são utilizados para a manutenção de culturas de microrganismos ou para o isolamento de microrganismos não específicos Os meios diferenciais são aqueles que possuem componentes que permitem a distinção entre diferentes tipos de microrganismos com base em suas características bioquímicas ou fisiológicas Eles são úteis para a identificação de microrganismos específicos em amostras complexas e podem conter indicadores de pH corantes ou outros compostos que permitam a diferenciação dos microrganismos Por fim os meios de enriquecimento são aqueles que possuem componentes que favorecem o crescimento de um tipo específico de microrganismo em detrimento de outros Eles são utilizados para o isolamento de microrganismos que são pouco abundantes na amostra como os patógenos por exemplo Esses meios podem conter nutrientes específicos que favoreçam o crescimento de um tipo de microrganismo em particular 5 Meios cromogênicos são meios de cultura utilizados para facilitar a identificação de microrganismos específicos com base em sua capacidade de produzir determinados pigmentos coloridos Esses meios contêm substratos cromogênicos que são compostos químicos que são metabolizados pelas bactérias e em seguida produzem uma cor característica Quando uma bactéria cresce em um meio cromogênico ela produzirá uma cor específica que pode ser usada para identificála Esses meios são usados na rotina laboratorial para a identificação rápida e precisa de microrganismos patogênicos em amostras clínicas Por exemplo um meio cromogênico específico para Escherichia coli produzirá colônias de cor azul esverdeada enquanto um meio cromogênico específico para a bactéria Salmonella produzirá colônias de cor rosa Essa identificação precisa e rápida é importante para a escolha do tratamento adequado para o paciente permitindo a adoção de medidas preventivas para evitar a propagação de doenças infecciosas 6 O teste de Camp é um teste bioquímico usado para identificar a presença de uma enzima chamada fosfolipase C em bactérias A fosfolipase C é capaz de hidrolisar o fosfolipídeo lecitina presente em muitas células liberando colina e ácido fosfatídico No teste de Camp uma amostra de bactérias é cultivada em um meio contendo sangue de cavalo e a enzima é detectada pela formação de uma zona de precipitação em torno da colônia quando o meio é incubado com células de Streptococcus agalactiae previamente tratadas com hipoclorito de sódio O teste é utilizado principalmente na identificação de S agalactiae um patógeno humano que pode causar infecções do trato urinário septicemia e meningite em recémnascidos 7 As infecções fúngicas são difíceis de tratar porque os fungos são organismos eucarióticos ou seja possuem semelhanças estruturais e metabólicas com as células humanas o que dificulta a identificação de alvos terapêuticos específicos que não afetem as células do hospedeiro Além disso muitos fungos são capazes de se adaptar e desenvolver resistência aos antifúngicos disponíveis no mercado tornando o tratamento ainda mais difícil e prolongado O desgaste celular humano pode ocorrer devido à destruição de células saudáveis durante o processo inflamatório causado pela infecção fúngica e pela liberação de toxinas pelos próprios fungos Isso pode levar a uma série de sintomas e danos aos tecidos afetados comprometendo a saúde e a qualidade de vida do indivíduo infectado 8 A tintura da China é uma solução alcoólica utilizada para fixar e colorir micro organismos em lâminas de vidro para posterior observação em microscópio O meio adequado para o crescimento de fungos pode variar dependendo da espécie mas geralmente é um meio de cultura rico em nutrientes como a Sabouraud ou o agar batata dextrose Esses meios contêm nutrientes que os fungos precisam para crescer como glicose peptona e extrato de levedura Para diferenciar as estruturas dos fungos podese utilizar técnicas de coloração como a coloração de Gram ou a coloração com tinta da Índia A coloração de Gram é capaz de distinguir a parede celular dos fungos que pode ser grampositiva ou gramnegativa Já a coloração com tinta da Índia é utilizada para identificar estruturas específicas dos fungos como a parede celular de quitina presente em fungos filamentosos 9 As provas do Indol são testes bioquímicos utilizados para identificar a capacidade de certas bactérias Gramnegativas BGN em produzir indol a partir do aminoácido triptofano O indol é uma substância orgânica nitrogenada produzida pela hidrólise do triptofano pelas enzimas da bactéria Existem diferentes métodos para a realização da prova do Indol porém o mais comum é o teste de Kovac Neste teste uma pequena quantidade de uma solução de Kovac contendo ácido clorídrico e pdimetilaminobenzaldeído é adicionada ao meio de cultura onde a bactéria cresceu Se a bactéria produzir indol ocorrerá uma reação química na qual a solução de Kovac reagirá com o indol formando um anel vermelho na superfície do meio As provas do Indol são amplamente utilizadas para identificar bactérias do gênero Escherichia coli que é capaz de produzir indol diferenciandoas de outras bactérias Gramnegativas que não produzem essa substância Isso é importante na identificação de bactérias em amostras clínicas pois a presença de E coli pode indicar uma infecção urinária por exemplo 10 A coleta do líquido cefalorraquidiano LCR é realizada por meio de uma punção lombar procedimento invasivo que consiste na inserção de uma agulha na região lombar da coluna vertebral para retirada do líquido Para realização da punção lombar o paciente deve estar em posição fetal com a cabeça e os joelhos flexionados É necessário anestesiar a pele e os tecidos mais profundos com anestésico local antes de se realizar a punção para reduzir a dor e o desconforto Após a coleta do LCR é importante realizar a identificação adequada da amostra bem como o transporte e armazenamento em condições adequadas para evitar contaminações e alterações das características do líquido As amostras são processadas em laboratórios de microbiologia onde são realizados exames para identificar a presença de microrganismos causadores de infecções no sistema nervoso central 11 O antibiograma é um teste que tem como objetivo avaliar a sensibilidade de bactérias a diferentes antibióticos Existem diferentes métodos para realizar o antibiograma incluindo o disco difusão a microdiluição e o Etest O método de disco difusão é o mais comumente utilizado e consiste em cultivar a bactéria em uma placa de Petri com meio de cultura e em seguida adicionar discos impregnados com diferentes antibióticos Após incubação é medida a zona de inibição de crescimento da bactéria ao redor de cada disco que indica a sensibilidade ou resistência da bactéria a cada antibiótico testado Os principais mecanismos de resistência de bactérias incluem a produção de enzimas que destroem ou modificam o antibiótico a alteração da estrutura da membrana celular para impedir a entrada do antibiótico a alteração dos alvos do antibiótico na bactéria e a eficiência de mecanismos de efluxo que expulsam o antibiótico da célula bacteriana antes que ele possa causar danos Esses mecanismos podem ser adquiridos por mutações genéticas ou transferência de material genético entre diferentes bactérias incluindo plasmídeos e transposons A resistência bacteriana é um problema crescente e preocupante na saúde pública uma vez que limita as opções de tratamento disponíveis e pode aumentar a morbidade e a mortalidade associadas a infecções bacterianas 12 O efeito antabuse é uma reação adversa que ocorre quando uma pessoa em tratamento com o medicamento dissulfiram consome álcool Isso causa uma série de sintomas desagradáveis incluindo náuseas vômitos tonturas e dores de cabeça intensas Acreditase que o dissulfiram cause esse efeito ao interferir na metabolização do álcool pelo organismo levando ao acúmulo de acetaldeído uma substância tóxica Embora o efeito antabuse seja usado no tratamento do alcoolismo ele também pode ter implicações na resistência de bactérias Isso ocorre porque alguns microrganismos possuem uma enzima chamada álcooldesidrogenase que é capaz de metabolizar o dissulfiram em uma substância menos tóxica Essa capacidade de alguns microrganismos em degradar o dissulfiram pode levar à resistência ao medicamento em tratamentos prolongados e em altas doses Por isso é importante monitorar a eficácia do dissulfiram e utilizar outros medicamentos em casos de resistência